在阴性对照（igG或mockIP）样品中本底较高 抗体过量导致抗体与非靶蛋白结合∶ 与珠子的非特异性结合∶ 染色质的不完金裂解∶ 试剂污染∶ "无DNA" PCR反应显示信号 DNA的较低回收率 ChIP抗体无效或较低亲和力： ChIP抗体不足： 起始样品不足： 细胞不完全溶解和无效裂解： 交联过度： 交联不足： 亲和力较低或珠子质量较差： PCR引物： 优化抗体的浓度。 加入-个残***步理，以除这些非特异性蛋白或添加珠子的阻断剂。 优化取解过程，以民得介于200-100bp长度的染色质。益启生物是Sigma抗体的代理商。杨浦区Sigma抗体抗体咨询问价
关于多克隆抗血清，理想的抗体阴性对照应是来自同一动物的免疫前血清。但是，在缺乏来自同一动物的免疫前血清时，从同一种类的不同动物获得的相等浓度的非免疫（正常）血清也能满足要求。 免疫沉淀法可以分为下述关键步骤： 抗原标记（可选） 样品制备（细胞裂解释放蛋白） 形成抗体-抗原（免疫）复合物 免疫复合物沉淀 分析 染色质免疫沉淀（ChIP） 染色体免疫沉淀（ChIP）是用于研究细胞内蛋白在染色体DNA上分布的经典技术。 这些蛋白质可能是组蛋白亚单位、转录因子或与DNA直接或间接结合的其它调节蛋白或结构蛋白。杨浦区Sigma抗体抗体咨询问价上海益启品牌抗体规格。
无信号 在检测之前，转印膜在贮藏过程中发 生蛋白降解 二抗选择错误 曝光时间太短 抗原上样量不足 抗原可能被破坏 检测系统 一抗的亲和力较低 化学发光底物已丧失活性。 已从膜上剥离抗体并再次杂交。 处理方法 使用新转的膜进行实验。 检查是否使用适当的二抗。 增加曝光时间。 在凝胶上载入更多的抗原，或在载入之前使用超滤管浓缩样品， 或使用免疫沉淀，以增加凝胶中的目标蛋白量。 检查确保电泳处理未破坏抗原性。 增加（和优化）一抗的浓度和培养时间、温度。
在将进行ChIP咳PCR实验的地点期近，不得打开含有扩增PCR产物约试幢。 确保您使用的抗体是在ChIP中给证过的抗体。关于ChIP抗体约完整选择过程，请参见默克官网表观遗传学。如果您正使用ChIP抗体，请增加抗体的解育时间。 一般1-10uq ChIP抗体是足够的。但是，所需抗体量可能取决于您的靶轮蛋白相对丰度和抗体与靶标的亲和力。 在交联前，单独准备一个平板，用于测定细胞数。重新评价每个反应的细您数。增加您的细晚数，特别是在尝试检测较任丰度的靶蛋白时。益启生物公司带您了解抗体详情。
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