用超滤对分子进行分级
通过选定截留分子量的超滤操作能精确地将混在大分子中的小分子去
除的想法常常不切实际。事实上，膜的规格描述是基于截留而非通过
的性质。一项实验中，采用 100k NMWL 滤膜，大于 100kDa 的分子截
留率 >90%，但这时比膜孔径小的分子并不是完全自由地通过滤膜，
75kDa 的分子截留率为 83%，30kDa 的分子也有 32% 被截留。混合的
溶液中的各 种成分通过膜并不像单一成分的溶液那么简单和容易。实
践中，如果要分离两种大分子，它们之间的分子量差异应该达到 10 倍
以上，或至少膜的 NMWL 规格在两种蛋白之间，则可达到比较理想的
分离。如果蛋白溶液较为稀释，低压下操作也有助于达到更好的效果。 上海超滤浓缩管哪家比较专业。常州离心浓缩管哪家优惠
抗体标记
适合25-200μg样品操作
5次低速离心，总耗时~50分钟
1. 在上样池中加入0.5 mL TBS-T预湿Amicon® Pro。1,000×g离心1 min。
2. 加入抗体样品
• 对于比较稀释的样品（< 1 mg/mL）
- 上样池下端接上Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管（建议使用50k MWCO）。
- 加上至多1 mL抗体样品， 4,000×g离心15 min。
• 对于浓度较高的的样品（≥ 1 mg/mL）
- 在Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管（建议使用50k MWCO）中加入至多100μL样品。
- 将装有样品的Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管接在Amicon®Pro上样池的下端。
3. Amicon®Pro上样池内加入预先准备好的1.5 mL含有染料的反应混合液。
4. 4,000×g离心15 min。
5. 优化选做：将样品在室温下多孵育30 min。
6. 上样池中加入1.5 mL PBS± NaN3。
7. 4,000×g离心15 min换液同时浓缩。
8. 倒转Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管1,000×g离心回收标记好的抗体。 虹口区Merck超滤浓缩管规格一个好的 超滤浓缩管代理销售需要具备哪些特点您了解吗？
核苷酸截留分子量（NCO）
超滤膜的 NMWL 是用球形蛋白标定的，适合各种蛋白研究，但在核酸
和多糖纯化时则要考虑更多因素。这些分子的棒状的三维结构容易漏
过，相对于球形蛋白需要更致密的膜（截留分子量更小）。所以选择
滤膜是更多考虑的是核苷酸长度而非分子量。
浓差极化
浓差极化实质是溶质累积在膜表面造成的堵塞，产生除了膜本身截留分
子量以外的过滤限制。当溶质浓度较高时，会形成相当于第二层滤膜作
用的胶体层，干扰分子通过滤膜，同时降低流速。pH 值、缓冲液的成分
也会影响目的分子的状态而使浓差极化现象加剧或减轻。
加入漂洗缓冲液（体积是树脂柱床体积的7.5倍）并离心。< 500μL树脂时1,000×g离心1 min；≥ 500μL树脂时2,000×g离心4 min。
4. 使用一个新的50 mL离心管作为收集管。
5. 加入洗脱缓冲液（体积是树脂柱床体积的5倍）与树脂混匀并离心。< 500μL树脂时1,000×g离心1 min；≥ 500μL树脂时2,000×g离心4 min。回收管中即纯化好的蛋白。
6. 如果是纯化抗体，在纯化产物中加入中和缓冲液。
* 进行较大体积操作时，可以延长结合反应时间，并用胶带密封上样池上沿以便颠倒混匀操作。离心前去除胶带即可。选购不带Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管的Amicon® Pro时请使用目录号ACS500024。 那么 超滤浓缩管施工的优势都有哪些呢？
默克密理博 Amicon® Ultra 离心式超滤管因其完美的设计，一经推出即成为生物样品操作的行业**产品。不论是蛋白、核酸、病-毒-或颗粒物，抑或低浓度样品或宝贵的活性样品，Amicon® Ultra 都能兼顾高回收率和操作的方便性及标准化，并满足下游各种应用的要求，使研究者处理样品时倍感轻松。
这款Amicon Ultra 15 mL离心式过滤器借助10 kDa NMWL的滤膜可以进行蛋白浓缩。Amicon Ultra离心式过滤器是蛋白纯化、蛋白浓缩和脱盐的理想工具。
Amicon® Ultra 超滤管的独特优点：
有效浓缩同时保证高的蛋白回收率
1.合理的死体积设计
2.避免样品离干而降低回收率
3.便于估计和控制样品浓缩倍数
4.重复性好，便于样品数据相互比较
你知道超滤浓缩管的用途吗？嘉定区Merck离心浓缩管咨询报价
超滤浓缩管的各种系列应用领域还是不一样的。常州离心浓缩管哪家优惠
如果能确保用同样的超滤管对其它蛋白成功操作的话，那么有可能是这个目的蛋白的原因。有时蛋白会因其本身的一些特性（构象差异）而影响浓缩效果，建议选用上一分子量级别的超滤管（如原本选用30k，此时可以选择10k）。
2）如果目的样本也不在滤过液中，那么：
a）蛋白样本起始浓度是否大于25ug/mL？ b）用来确定样本浓度的方法是什么？是否可信？
c）目的蛋白是不是沉淀了？如果是的，具体解决方法请参考上面的关于蛋白沉淀问题的解释。 常州离心浓缩管哪家优惠
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