7次低速离心,总耗时~100分钟(含60分钟孵育时间)
1. 在Amicon® Pro上样池中加入200μL亲和纯化树脂(50%悬浊液)和1.5 mL漂洗缓冲液。
1,000×g离心1 min。
2. 加入0.5 mL样品并与树脂吸打混匀。孵育1 h,其间可温和搅动促进结合。
3. 1,000×g离心1 min 以去除未结合杂质。
4. 加入1.5 mL漂洗缓冲液,1,000×g离心1 min。
5. 上样池下端接上Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管(可选用50k MWCO型号)。
6. 加入1 mL洗脱缓冲液与树脂混匀。4,000×g离心5 min。
7. 加入200μL 中和缓冲液。4,000×g离心15 min。
8. 加上**终需要的缓冲液1.5 mL。4,000×g离心15 min,置换缓冲液的同时进行浓缩。
9. 倒转Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管,1,000×g离心回收纯化和浓缩好的蛋白。 超滤浓缩管的主要优势是什么。黄浦区默克4ml超滤浓缩管联系人
如果能确保用同样的超滤管对其它蛋白成功操作的话,那么有可能是这个目的蛋白的原因。有时蛋白会因其本身的一些特性(构象差异)而影响浓缩效果,建议选用上一分子量级别的超滤管(如原本选用30k,此时可以选择10k)。
2)如果目的样本也不在滤过液中,那么:
a)蛋白样本起始浓度是否大于25ug/mL? b)用来确定样本浓度的方法是什么?是否可信?
c)目的蛋白是不是沉淀了?如果是的,具体解决方法请参考上面的关于蛋白沉淀问题的解释。 普陀区默克0.5ml超滤浓缩管咨询问价上海超滤浓缩管供应商。
蛋白复性,温和透析
D-Tube™ 透析管
如果样品很敏感而难以处理,采用温和的透析方法可以避免其在过度浓缩时发生沉淀和离心操作剪切力对样品的损害。。D-Tube™是双膜设计的透析管,**提高了样品透析表面积,在2-5小时内即可完成透析,是非常温和而高效的缓冲液置换工具。D-Tube™ 透析管的独特优点:
样品回收率> 89%
• 膜和管壁皆为低吸附性材质,增加样品回收率可靠而易用
• 不会像使用夹子或打结那样造成样品渗漏和污染,安全可靠
旋盖式设计,易于打开和关紧
硬管设计,易于更充分地吸取、移走样品,即使是μL级样品加样方便,功能多样
• 采用标准***头加样,而非注射器和针头加样,减少膜破损的风险提供的浮漂适合在常见的广口烧杯中使用,方便在透析过程中换液D-Tube™ 透析管还可以用于从琼脂糖或丙烯酰凝胶电洗脱样品
上样池下端接上Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管(有5种截留分子量规格可选)。
6. 加入1 mL洗脱缓冲液与树脂混匀。孵育5 min。
7. 4,000×g离心15 min。
8. 加上蛋白样品**终需要的缓冲液1.5 mL。4,000×g离心15 min,置换缓冲液的同时进行浓缩。
9. 倒转Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管,1,000×g离心回收纯化和浓缩好的蛋白。
* 本操作受Amicon® Ultra-0.5 mL超滤管~1 mg蛋白的容量限制。体积较大而蛋白浓度较低的情况下也可以采用如上方法,但溶液体积和离心时间等需要略加优化。
用Protein A或G对抗体进行亲和纯化 上海超滤浓缩管哪家比较专业。
多台同时操作模式
借助Amicon®超滤杯多台操作连接装置可以同时运行多达3个超滤杯。
Amicon® stirred cells 耐溶剂型搅拌式超滤杯
用于对在有机溶剂中的样品进行浓缩和缓冲液置换。有 47mm 和 76mm 两种规格。需要注意醛、酮(如**)、醚酯等会降低碳氟化合物材质 O 形圈的使用寿命。
特点与优点:
采用圆柱形硼硅酸盐玻璃容器和 PTFE
超好化学兼容性超滤膜
可预装膜后进行高压灭菌
直接从上面操作,避免拆卸装置的麻烦
组件少,易于清洁和组装
配套使用 47 或 76 mm 直径预切膜片
应用:
带有有机成分的样品的浓缩、换液 益启生物公司主营 超滤浓缩管销售。南京浓缩管咨询问价
一个好的 超滤浓缩管代理销售需要具备哪些特点您了解吗?黄浦区默克4ml超滤浓缩管联系人
化工工业在各国的国民经济中占有重要地位,是许多大国的基础产业和支柱产业,化学工业的发展速度和规模对社会经济的各个领域有着直接影响。世界各国对环境保护和绿色发展的重视程度日益提升,出台了很多环境方面的政策、法规,同时环境执法力度也在逐步提高,化工私营合伙企业企业需要积极探索绿色低碳、安全环保的技术,加强与信息化技术融合,尽可能地发展环保型产品,实现清洁生产,并在节约能源和资源方面,采用工艺技术,降低原材料消耗;配备废水、废气、废固处理设备,极大限度地降低三废排放量,增加节水措施,提高水的重复利用率等。可以说,“绿色化工”已经成为行业发展潮流。试剂,耗材,科研试剂,仪器设备应用于国民经济和****的众多领域中,成为我国化工体系中市场需求增长**快的领域之一,近年来很多产品的消费量年均增长都在10%以上。贸易型的优化有力地拉动了化工产业的市场需求,产业总体规模迅速扩大,领域不断拓展、结构逐步调整、整体水平有较大提升,运行质量和效益进一步提高。黄浦区默克4ml超滤浓缩管联系人
上海益启生物科技有限公司致力于化工,是一家贸易型的公司。公司自成立以来,以质量为发展,让匠心弥散在每个细节,公司旗下试剂,耗材,科研试剂,仪器设备深受客户的喜爱。公司秉持诚信为本的经营理念,在化工深耕多年,以技术为先导,以自主产品为重点,发挥人才优势,打造化工良好品牌。在社会各界的鼎力支持下,持续创新,不断铸造***服务体验,为客户成功提供坚实有力的支持。