T7EndonucleaseI(T7EI)在CRISPR/Cas9基因编辑中的应用主要体现在突变体检测和基因编辑效率评估上。以下是T7EI在CRISPR/Cas9中的具体应用步骤和特点:1.**基因编辑效率评估**:-T7EI用于评估CRISPR-Cas9在给定的导向RNA靶位点上对细胞群体进行基因编辑的效率。-通过PCR扩增围绕CRISPR导向RNA靶位点的基因组DNA,如果CRISPR-Cas9介导的非同源末端连接(NHEJ)修复事件引入了突变,变性和退火将形成突变型和野生型PCR扩增子的异源双链DNA。2.**突变体检测**:-如果CRISPR/Cas9编辑成功在DNA上引入突变,则可与野生型DNA片段退火产生异质双链DNA。T7EI可以识别该DNA上的不完全配对的DNA位点然后进行双链切割,通过琼脂糖凝胶电泳即可显示酶切后的条带,从而半定量判定基因编辑效果。-T7EI能识别长度大于或等于2bp的插入、缺失或突变导致的错配DNA,不能识别1bp的插入、缺失或突变。3.**实验步骤**:-收集细胞并提取基因组DNA,然后使用PCR扩增期望编辑的基因组区域。扩增子的长度建议为0.5-1kb。-对扩增的DNA进行变性和退火复性,以产生异质双链DNA。-使用T7EI酶处理退火后的DNA产物,在37℃孵育15分钟。Probe qPCR Mix (2×)通常含有热启动DNA聚合酶,这种聚合酶在高温下激发,可以减少非特异性扩增 。Recombinant Human PLXNA1 Protein,His Tag

重组人ST3GAL4蛋白是一种在哺乳动物细胞中表达的重组蛋白,融合了His标签,便于纯化和检测。ST3GAL4(ST3β-Galactosideα-2,3-Sialyltransferase4)是一种重要的糖基转移酶,参与唾液酸化修饰过程,广存在于细胞内高尔基体和内质网中。它通过催化α-2,3-唾液酸键的形成,将唾液酸添加到糖链末端,调节糖蛋白和糖脂的生物活性,在细胞识别、信号转导和免疫反应中发挥重要作用。ST3GAL4的功能与机制ST3GAL4在多种生物学过程中发挥关键作用。它通过催化唾液酸化修饰,调节糖蛋白的稳定性、细胞黏附和信号转导。唾液酸化修饰是细胞表面糖蛋白的重要特征,影响细胞间相互作用和细胞与病原体的识别。ST3GAL4的功能异常与多种疾病相关,包括病、神经退行性疾病和自身免疫疾病。在病中,ST3GAL4的异常表达可能导致肿瘤细胞的侵袭性和转移能力增强。重组人ST3GAL4蛋白(HisTag)的特点重组人ST3GAL4蛋白(HisTag)具有以下明显特点:高纯度:纯度≥95%(经SDS-PAGE和SEC-HPLC验证),确保实验结果的可靠性。低内素:内素水平<0.1EU/μg,适合用于细胞实验和体内研究。功能完整:保留了天然ST3GAL4的酶活性和糖基化修饰功能。RNA/蛋白抽提试剂盒该预混液适用于多种抗凝剂处理的血液样本,但优先推荐使用EDTA抗凝血,因为EDTA可以更好地抑制核酸降解。

重组人Kremen-2蛋白(RecombinantHumanKremen-2Protein,HisTag)是一种重要的细胞表面受体,属于Kremen家族,主要参与调控Wnt/β-catenin信号通路。Kremen-2蛋白通过与Dickkopf(DKK)蛋白协同作用,抑制Wnt信号通路的启动,从而在胚胎发育、细胞增殖、组织稳态及病发生等过程中发挥关键作用。该重组蛋白采用真核表达系统(如HEK293细胞)制备,确保了其天然构象和生物活性。其N端融合了His标签,便于通过Ni-NTA亲和层析进行高效纯化,获得高纯度、高稳定性的蛋白产物。这种设计不仅提高了蛋白的溶解性和稳定性,也方便了后续的实验操作,如ELISA、Westernblot、免疫沉淀及蛋白相互作用研究等。研究表明,Kremen-2在多种病中表达异常,与肿瘤细胞的增殖、侵袭及转移密切相关。此外,Kremen-2还参与调控骨代谢和神经发育等生理过程。因此,重组人Kremen-2蛋白不仅是研究Wnt信号通路的重要工具,也为开发相关疾病的治药物提供了有力支持,具有重要的科研和临床应用价值。
Hot-StartTaqDNAPolymerase是一种经过改良的TaqDNA聚合酶,专为提高PCR反应的特异性和灵敏度而设计。它通过结合一种温度敏感的抑制剂(如核酸适配体或抗体)来实现热启动功能。在室温下,抑制剂与酶结合,阻止Taq酶的活性,从而避免因引物错配或二聚体形成导致的非特异性扩增。当反应体系升温至PCR循环条件时,抑制剂释放,酶活性被启动,确保反应在高温下特异性进行。与普通Taq酶相比,Hot-StartTaqDNAPolymerase的优势在于其提高了PCR的特异性和重复性,同时减少了因非特异性扩增导致的背景信号。这种酶还支持在室温下配制反应体系,无需额外的高温启动步骤,简化了实验操作。此外,Hot-StartTaqDNAPolymerase适用于多种复杂的PCR应用场景,包括常规PCR、多重PCR、高GC含量模板扩增以及甲基化分析等。例如,某些版本的Hot-StartTaq酶经过优化,能够扩增经过亚硫酸氢盐转化的DNA,这对于表观遗传学研究具有重要意义。总之,Hot-StartTaqDNAPolymerase通过其独特的热启动机制,为PCR反应提供了更高的特异性和灵敏度,是分子生物学研究和诊断应用中的理想选择。Pfu DNA Polymerase 具有较高的保真度,能够在DNA合成过程中减少错误掺入的碱基,降低非目标突变的发生率。

dUTP,100mMSolution:分子生物学实验中的高效工具dUTP(2-脱氧尿苷5-三磷酸)是一种重要的核苷酸,应用于分子生物学实验中。其100mM溶液形式为研究人员提供了便捷、高效的实验材料,尤其在PCR、qPCR、RT-PCR等技术中表现出色。产品特点高纯度与稳定性dUTP溶液的纯度≥99%(HPLC检测),且不含DNase、RNase等杂质,确保实验结果的可靠性。其以钠盐形式存在,用超纯水配制,pH值调节至7.0左右,具有良好的化学稳定性。即用型设计该产品为即用型溶液,浓度为100mM,无需额外稀释或处理,可直接用于多种分子生物学反应。防污染机制dUTP常用于替代dTTP,使扩增产物中包含尿嘧啶。结合尿嘧啶-N-糖基酶(UNG)使用时,可有效去除残留的PCR产物污染,避免假阳性结果。性能与应用实验应用dUTP适用于多种DNA合成反应,包括PCR、qPCR、RT-PCR、cDNA合成、引物延伸、DNA测序和标记等。其在PCR中的应用尤为突出,通过引入尿嘧啶,可降低交叉污染的风险。优化实验条件dUTP溶液的pH值和浓度经过优化,适合与多种酶(如TaqDNA聚合酶)配合使用,确保反应体系的高效性和特异性。在cDNA末端快速扩增(RACE)技术中,Ultra-Long Master Mix 可以用来扩增5'和3'末端的长片段cDNA。RNA/蛋白抽提试剂盒
蛋白在表达过程中形成包涵体,需要通过复性步骤恢复其活性。这通常涉及物质的存在下进行蛋白质的重折叠。Recombinant Human PLXNA1 Protein,His Tag
在现代替物技术的舞台上,限制性核酸内切酶AccI是一位备受瞩目的“明星”。它是一种能够特异性识别并切割DNA的酶,凭借其精细的切割能力,在基因工程领域扮演着不可或缺的角色。AccI的识别序列是“GT^AC”,这意味着它会在DNA双链上找到这一特定的核苷酸序列,并在“^”标记的位置将DNA链切断。这种切割方式非常独特,它会产生黏性末端,即切割后的DNA片段两端会暴露出一段互补的单链区域。这种黏性末端的特性使得AccI在基因克隆和重组DNA技术中大显身手。在基因工程中,科学家们常常需要将目标基因从复杂的基因组中分离出来,并将其插入到合适的载体中。AccI可以像一把“精细刻刀”一样,将目标基因和载体DNA在特定位置切割,暴露出的黏性末端能够通过碱基互补配对的方式相互结合,再利用DNA连接酶将它们连接起来,从而构建出重组DNA分子。AccI的应用不仅局限于基因克隆,它还在基因分析和诊断中发挥着重要作用。通过AccI对DNA的切割模式,科学家可以分析基因的多态性,帮助诊断某些遗传性疾病。此外,AccI还可以用于构建基因文库,为研究基因功能和进化提供了重要的工具。AccI的发现和应用是分子生物学发展的重要里程碑。Recombinant Human PLXNA1 Protein,His Tag
dNTP/dUTPMixture是一种特殊的核苷酸混合物,包含四种脱氧核苷三磷酸(dATP、dCTP、dTTP、dGTP)和脱氧尿苷三磷酸(dUTP),其中每种dNTP浓度为2.5mM,dUTP浓度为5mM。这种独特的配方使其在分子生物学实验中具有广泛的应用价值,尤其是在需要结合传统DNA合成与尿嘧啶标记的场景中。产品特点dNTP/dUTPMixture结合了传统dNTP和dUTP的优势,提供了一种多功能的DNA合成试剂。其配方中dNTP浓度为2.5mM,dUTP浓度为5mM,能够满足常规PCR、DNA标记、基因编辑等多种实验需求。这种混合物经过严格的质量控制,确保纯度和稳定性,能够为DNA合...