改良巴尔斯氏培养基基础(不含硫酸亚铁铵)是专为趋磁细菌Magnetospirillum gryphiswaldense等设计的高纯度液体平台。经典巴尔斯配方中,硫酸亚铁铵既作铁源又兼还原剂,却易氧化沉淀,导致批次差异大、磁小体晶型不均。改良版本彻底剔除该盐,把铁供给与氧化还原控制拆成两步:基础培养基只含乳酸钠、琥珀酸钠双碳源,酵母粉0.05 %,K₂HPO₄ 5 mmol,MgSO₄、CaCl₂及微量元素各1 mL L⁻¹,pH 6.8±0.1,经0.22 μm过滤除菌,保证无色透明、无沉淀,4 ℃可保存3个月。使用时,先在基础液中通N₂/CO₂(80:20)除氧,再按实验目标由无菌厌氧瓶补加可溶Fe(Ⅲ)-柠檬酸或FeCl₂溶液,终浓度10–100 μmol,铁形态与剂量可精确到0.1 μmol,避免传统配方一次性投铁产生的氧化应激。与此同时,通过微氧发酵系统把溶解氧稳定在0.5 %空气饱和度,氧化还原电位降至–50 mV,磁小体合成效率提升2.4倍,Cmag值达1.2以上,而细胞干重仍保持2 g L⁻¹。改良基础还兼容同位素标记与金属掺杂:只需把⁵⁷Fe-柠檬酸或CoCl₂按1 at.%比例加入,即可制备高纯度⁵⁷Fe或Co掺杂磁小体,为Mössbauer谱、磁热疗研究提供批次可重复的生物纳米磁源。随后,细菌释放信号,诱导根部细胞分裂,三天鼓出乳白根瘤,像给根系挂上微型氮肥厂。巨孢毛霉
MY培养基(Malt-Yeast Extract Medium)是“麦芽-酵母”双营养的经典富集培养基,配方简洁却营养爆棚:麦芽浸粉20 g、酵母粉4 g、葡萄糖10 g,补水至1 L,pH自然5.6±0.2,无需调节即可释放麦芽淀粉酶持续供糖,形成“缓释碳源”效应。其低pH与高还原糖组合,既能抑制多数细菌蔓延,又为酵母、丝状菌及嗜酸微藻提供“即食”氮碳,是实验室摇瓶、工业菌种活化与次级代谢研究的“第一步”。在酿酒酵母中,30℃、200 r/min培养16 h,OD₆₀₀轻松破1.5,细胞活性>95%,直接转接乙醇发酵罐可缩短延滞期6 h;若用于产赤霉素藤仓镰刀菌,只需将葡萄糖降至5 g,并补加0.5 g NH₄NO₃,28℃静置5天,赤霉素GA₃产量可达320 mg L⁻¹,比PDB提高40%。MY培养基的另一优势是“可视化”:含2%琼脂即成MYA平板,菌落形态饱满、色素鲜艳,青霉呈蓝绿,红酵母显玫瑰红,常被用作教学示范板。质量控制亦轻松:高压后若颜色加深,说明美拉德反应过度,可改用115℃灭菌20 min;室温存放1个月仍澄清,即可继续使用。凭借其组分明确、成本低廉、配制快速,MY培养基已从传统酿酒实验室走向合成生物学、次级代谢与益生菌高密度发酵,成为微生物学家手中“养菌如泡茶”的经典底牌。Arthrobacter woluwensis其适生长温度55–65 ℃,芽孢可耐100 ℃沸水2小时、紫外线辐照8小时仍存活,被广用于检验高压灭菌效果。

潘诺尼亚锁霉(Itersonilia pannonica)是一株担子菌门、锁霉属的低温丝状菌,原产中国,常见于草地、腐叶及冷藏蔬菜表面。菌丝白色至淡黄,扩展呈绒毯状,更适生长17℃,pH6,需氧,对盐浓度变化敏感,4℃保存即可。一、科研价值耐冷特性使其成为冷链食品研究的模式菌;与毡状金孢霉近缘,基因组含多种细胞壁降解酶基因,可用于低温酶筛选及担子菌系统发育分析。二、生物防治潜力培养滤液对灰霉、菌核等植物病原菌抑制圈达15–20 mm,并能分泌几丁质酶,分解线虫卵壳,盆栽试验使番茄根结线虫侵染率下降40 %,为开发低温生剂提供候选。三、低温酶应用菌株在10℃仍产较高活性纤维素酶和β-葡萄糖苷酶,可用于低温洗涤、纸浆漂白或冷链废弃物降解,节能20 %,降低高温处理成本。四、教学与质控生物危害四类,培养简易,国内多所高校将其列入“冷链微生物”教学实验,学生可通过梯度平板直观观察低温生长曲线,并用于冷藏食品监测的阳性对照。未来,借助合成生物学,把潘诺尼亚锁霉的冷活性酶基因导入工业酵母,有望构建“冷链-降解”一体化细胞工厂,为冷链物流、低温环保和绿色防控提供新工具。小小锁霉,用一把“冷钥匙”开启低温生物技术的广阔天地。
异常嗜冷芽孢杆菌(Bacillus psychrodurans)是芽孢杆菌家族里的“极地居民”。它可在−2 ℃缓慢生长,更适温度只15 ℃,比较高不超过30 ℃,却能在南极冻土、深海沉积物中形成椭圆芽孢,耐−20 ℃冷冻和反复冻融,被视作研究低温适应的模式菌之一。其“耐寒密码”有三重:细胞膜富含支链和短链脂肪酸,保持流动性;冷休克蛋白Csp与RNA伴侣协同,防止核酸二级结构冻结;兼产低温活性酶,在4 ℃仍具80 %活力,为冬季生物过程提供催化可能。在农业上,菌株L-4分泌IAA 18 mg·L⁻¹并溶磷2.3 mg·L⁻¹,4 ℃下仍使冬小麦根长增25 %,返青期提前5天,分蘖数提高一成,相当于给作物“穿”上生物羽绒服。工业端,它的耐冷蛋白酶已在洗涤剂中试用,10 ℃洗衣去污力提升30 %,节能20 %;低温淀粉酶可将糖化温度由60 ℃降至35 ℃,为冬季酒精发酵省蒸汽、减碳排。环境修复方面,菌株ANT-1在−5 ℃、10 %盐度下60天降解柴油60 %,为极地溢油、寒区输油管泄漏提供原位生物修复方案。未来,借助合成生物学,把异常嗜冷芽孢杆菌的“冷酶+冷激”模块植入生产菌,有望实现“零加热”生物制造,让微生物在冰水里也能为人类催化价值反应。小小嗜冷芽孢杆菌,用极端低温下的生存智慧,把寒冷转化为绿色科技的新动能。耐热芽孢芽孢杆菌可耐受55 ℃、高盐环境,利用原油为碳源,产生生物表面活性剂,提高采收率5–8%。

拟近缘鞘孢菌(Chalara pseudoaffinis)是子囊菌门、盘菌亚纲、囊菌目下的丝状菌,更早在中国内蒙古阿尔山杜鹃湖湖水中被分离得到 。菌落灰白色,基质菌丝发达,可形成瓶梗式分生孢子器,产椭圆形分生孢子,需氧、耐低温,4 ℃仍可缓慢生长,适合作为冷链环境研究模型 。生态功能方面,该菌能分泌一系列细胞壁降解酶,可分解落叶与植物残体中的纤维素和半纤维素,促进有机质矿化,为水体微生物提供碳源 。初步试验表明,其培养滤液对灰霉、菌核等植物病原菌具有拮抗活性,抑菌圈直径15–20 mm,同时可产生几丁质酶,破坏线虫卵壳,盆栽试验使番茄根结线虫侵染率下降40 %,显示出开发低温生防制剂的潜力 。工业应用上,拟近缘鞘孢菌的低温酶系活性突出,10 ℃条件下纤维素酶和β-葡萄糖苷酶仍保持70 %以上活力,可用于冷链废弃物降解、低温洗涤或纸浆漂白,节能20 %并减少高温处理成本 。此外,其耐冷特性使其成为教学与科研中常用的“冷链模式菌”,高校常利用其进行低温生长、酶学及系统发育实验,安全等级为四类,操作简便 。其分泌的耐有机溶剂蛋白酶、褐藻胶裂解酶在洗涤、纺织及海藻转化中展现高活性,为生物制造提供新工具。Arthrobacter woluwensis
组蛋白样蛋白紧紧包裹DNA,防止高温断裂;同时拥有一套高效热休克蛋白(Hsp)系统,可快速修复变性蛋白。巨孢毛霉
德氏乳杆菌德氏亚种(Lactobacillus delbrueckii subsp. delbrueckii)是乳酸菌家族中更早被分离命名的“元老”之一,1901年即进入科学视野。菌体短杆、无芽孢、不运动,专性发酵葡萄糖产乳酸,更适生长温度42~45℃,可在pH 3.5的酸环境中存活,耐高温却畏冷,4℃即停止繁殖。基因组只1.8 Mb,代谢途径精简,却拥有完整的乳酸脱氢酶与寡肽转运系统,使其在蛋白质丰富的基质中快速产酸,抑制菌。工业上,它是酸奶、瑞士奶酪与保加利亚传统发酵乳的关键菌种,与嗜热链球菌协同可将牛乳在3小时内酸化至pH 4.2,形成细腻凝乳与特征性乙醛风味;同时分泌胞外多糖,赋予产品顺滑口感并延缓后酸化。近年研究还发现,其表面蛋白SlpA能黏附肠道上皮,诱导IL-10分泌,缓解小鼠结肠炎;热灭活菌体亦可通过启动树突细胞TLR2信号,增强肠道IgA应答,兼具益生与免疫调节潜力。随着合成生物学兴起,德氏乳杆菌德氏亚种被工程化改造为“活药工厂”,可在肠道内持续释放胰岛素样肽或白细胞介素,为糖尿病与炎症性肠病提供新型微生态治疗方案。巨孢毛霉