Bushnell-Haas琼脂(Bushnell-Haas Agar,简称BH琼脂)是一种专为检测环境微生物降解烃类能力而设计的合成培养基。其配方精简而精细:以磷酸钾缓冲对维持pH 7.0±0.2,硫酸铵提供氮源,氯化钠、硫酸镁与微量金属盐构成基本离子环境,却不含任何有机碳源。正这份“刻意为之的贫瘠”,使BH琼脂成为筛选“吃油微生物”的黄金标准——只有当培养皿中额外滴加柴油、石蜡或多环芳烃时,能利用这些烃类作为碳与能源的细菌、酵母乃至菌才会长出可见菌落,降解能力越强,菌落周围出现透明晕圈的速度越快、直径越大。自1940年代问世以来,BH琼脂被广用于石油污染土壤、海洋表面膜及工业废水的微生物资源普查。研究人员只需将样品匀浆涂布于表面覆有薄层原油的BH平板,28℃培养3–7天,即可依据菌落形态与晕圈初步分离高效降解株;再结合GC-MS测定残余烃量,可在两周内完成从筛选到定量评价的完整流程。近年来,随着极端环境研究升温,BH配方被灵活调整:添加3% NaCl可分离耐海盐烃降解菌;降低pH至4.5、补充Cu²⁺则用于勘查酸性矿山废水中的耐重金属菌。这种芽孢杆菌能够分泌多种酶,如果胶酶、纤维素酶和木质素酶等。棒状双歧杆菌
潘诺尼亚锁霉(Itersonilia pannonica)是一株担子菌门、锁霉属的低温丝状菌,原产中国,常见于草地、腐叶及冷藏蔬菜表面。菌丝白色至淡黄,扩展呈绒毯状,更适生长17℃,pH6,需氧,对盐浓度变化敏感,4℃保存即可。一、科研价值耐冷特性使其成为冷链食品研究的模式菌;与毡状金孢霉近缘,基因组含多种细胞壁降解酶基因,可用于低温酶筛选及担子菌系统发育分析。二、生物防治潜力培养滤液对灰霉、菌核等植物病原菌抑制圈达15–20 mm,并能分泌几丁质酶,分解线虫卵壳,盆栽试验使番茄根结线虫侵染率下降40 %,为开发低温生剂提供候选。三、低温酶应用菌株在10℃仍产较高活性纤维素酶和β-葡萄糖苷酶,可用于低温洗涤、纸浆漂白或冷链废弃物降解,节能20 %,降低高温处理成本。四、教学与质控生物危害四类,培养简易,国内多所高校将其列入“冷链微生物”教学实验,学生可通过梯度平板直观观察低温生长曲线,并用于冷藏食品监测的阳性对照。未来,借助合成生物学,把潘诺尼亚锁霉的冷活性酶基因导入工业酵母,有望构建“冷链-降解”一体化细胞工厂,为冷链物流、低温环保和绿色防控提供新工具。小小锁霉,用一把“冷钥匙”开启低温生物技术的广阔天地。粉红木霉这种能力使其在微生物界中独树一帜,也为它在多个领域的应用提供了基础。

蔬菜芽孢杆菌(Bacillus oleronius)是芽孢杆菌属里“更懂蔬菜”的专性住客。更初从腐烂生菜叶脉中分离,菌体纤细、革兰氏阳性,具周生鞭毛,能形成椭圆芽孢,耐干燥、耐低氧,可在pH 5–9、温度15–40℃范围内生长,更适与蔬菜根际环境高度重叠,故得名“oleronius”(拉丁语“菜园的”)。它的首要武器是“蔬菜定制”抑菌谱。菌株QSI-1可分泌酰基高丝氨酸内酯酶(AHL-lactonase),切断软腐欧文氏菌、胡萝卜果胶杆菌的群体感应信号,使病原菌无法启动果胶酶基因,白菜软腐病斑减少70%;同时产生表面活性素与fengycin,对番茄叶霉、辣椒疫霉抑菌带宽达28 mm,且能形成生物膜覆盖伤口,阻止二次侵染。第二技能是“温和促生”。蔬菜芽孢杆菌合成IAA 20 mg/L,并溶出有机磷3.2 mg/L,诱导生菜、菠菜根系增30%,叶绿素提高1.5个SPAD单位,硝酸盐含量下降12%,明显提升蔬菜品质与安全。工厂化应用上,研究者将菌株QSI-1与褐藻寡糖复配,制成活菌数10⁸ CFU/mL的“蔬菜保鲜微乳”,采后喷施可抑制软腐、灰霉,使生菜货架期由7 d延至14 d,失重率<5%,已在上海崇明有机农场示范推广。
拟圆孢线黑粉菌(Filobasidium globisporum)隶属担子菌门、线黑粉目,是一类以冻干粉形式保存、生物危害四类的非模式菌,却在低温酶学与绿色技术领域展现巨大潜力。一、分类与培养特性菌株为乳白色、湿润的酵母状菌落,更适培养温度20℃,可在4–10℃长期冷藏存活2–25年;YPM培养基(甘露醇20g/L、酵母提取物、蛋白胨)即可满足生长,液体培养需避免长时间静置以保持活性。二、低温酶工厂在20℃条件下,该菌分泌高活性纤维素酶、β-葡萄糖苷酶和木质素降解酶,10℃时仍保留70%以上酶活,适合冷链废弃物处理、低温洗涤和纸浆漂白,可节省蒸汽能耗约20%。三、代谢产物多样发酵液中可检测抗生物质、色素及胞外多糖,对革兰氏阳性细菌具有明显抑制圈;其胞外多糖乳化力强,已作为天然增稠剂用于食品与化妆品小样试制。四、环境修复潜力菌丝体对苯酚、重金属Cd²⁺、Pb²⁺表现出吸附-降解双重作用,5d内可将50mg/L苯酚降至5mg/L以下,吸附铅量达45mg/g,为低温含酚废水、重金属污染水体提供生物修复候选。五、科研与安全作为四类危害微生物,操作只需BSL-1基础实验室;冻干粉复苏快、ITS序列清晰,是研究担子菌低温酶调控、孢子长期保存及冷链机制的理想模式菌。菌体还可吸附Au³⁺、Cd²⁺,吸附量分别达50mg/g与35mg/g,为矿区重金属修复提供低成本方案。

乳酸铁营养琼脂(Lactose Iron Nutrient Agar)是一种兼具选择性、鉴别性与营养性的复合培养基,常用于食品、水质及临床标本中革兰阴性肠道菌的快速分离与初步鉴定。其关键原理在于“双指示”设计:乳糖作为可发酵碳源,与铁盐共同构成判别系统——能发酵乳糖的菌株产酸,使酚红指示剂由红变黄;若同时产气,则可在培养基内形成气泡或裂缝。而铁离子的加入,让具备硫化氢(H₂S)生成酶的细菌(如某些变形杆菌、沙门氏菌)将硫代硫酸钠还原,与Fe²⁺结合生成黑色FeS沉淀,菌落中心呈现特征性黑心,实现“一眼辨菌”。配方上,乳酸铁营养琼脂在营养琼脂基础上添加1%乳糖、0.02%硫代硫酸钠与0.02%柠檬酸铁铵,pH调至7.4±0.2,既保证肠杆菌科的基本营养需求,又通过高糖与铁盐抑制部分非目标菌的过度生长。倾注平板后呈淡红色半透明,若室温存放出现泛黄,说明培养基已酸化,需弃用。接种时,多采用分区划线,35℃培养18–24小时即可读取结果:乳糖发酵阳性菌(如大肠埃希菌)形成黄色、边缘整齐的大菌落;乳糖阴性菌(如志贺菌)则保持红色;若菌落中心发黑,则提示H₂S阳性,需进一步做血清学或质谱确认。收获后根瘤脱落,矿化释氮,后茬玉米吸氮量提15%,土壤硝态淋失降四成,地下水不再喊“又咸又绿”。嗜热节革孢
它能够高效地分解硫胺素,生成多种有用的代谢产物,如核苷酸和氨基酸。棒状双歧杆菌
盐反硝化枝芽孢杆菌(Virgibacillus halodenitrificans)是芽孢杆菌科中兼具“嗜盐”与“反硝化”双重技能的稀有物种。模式菌株 ATCC 49067 分离自法国太阳能盐场,可在 2–23 % NaCl、10–45 °C 范围内生长,更适盐度 3–7 %、pH 7.4–7.5,细胞壁含 meso-DAP,肽聚糖厚且膜脂分支,赋予其耐高渗与碱胁迫的能力。一、盐中反硝化该菌携带完整的 narG/napA-nirK-nor-nosZ 基因簇,能在 3–12 % 盐度下将 NO₃⁻ 依次还原为 N₂,并同步积累四氢嘧啶作为相容溶质,既完成脱氮又抵御渗透冲击。实验室摇瓶试验显示,盐度 8 % 时其对 NO₃⁻-N 去除率仍达 90 % 以上,N₂O 释放量低于检测限,为高盐废水生物脱氮提供了“零碳源”方案。二、油田与暗管应用菌株 WH-6 被制成“热-盐双耐”菌剂,在 55–80 °C、0.5–3.5 % NaCl 的采出水体系中,通过优先利用 NO₃⁻ 作电子受体,抑制硫酸盐还原菌活性,使 H₂S 产量下降 70 %,延长注水井管柱寿命。同时,含该菌的清淤剂与多孔沸石复配,用于盐碱地暗管排盐,一年后盐水收集率提高 35 %,出口浑浊度降至 4.7 mg L⁻¹,明显缓解因泥沙堵塞造成的维护难题。三、农业与生态修复在 1 % 盐度盆栽中,接种 10⁷ CFU g⁻¹ 土壤,可使生菜根际钾提高 20 %,硝酸盐含量下降 15 %,产量增 12 %。