ExoIII(ExonucleaseIII)和Lambda核酸外切酶(λExonuclease)在DNA末端处理上的主要不同点如下:1.**作用方向**:-**ExoIII**:具有3'→5'外切脱氧核糖核酸酶活性,它从DNA链的3'-OH末端逐步切去单核苷酸。-**Lambda核酸外切酶**:是一种5'→3'核酸外切酶,能选择性地沿5'→3'方向消化5'端磷酸化的双链DNA。2.**底物特异性**:-**ExoIII**:适底物是平末端或5'末端突出的DNA,但也可以作用于双链DNA切刻位点产生单链缺口。由于对单链DNA无活性,因此难以切割3'突出末端。-**Lambda核酸外切酶**:适底物是5'磷酸化的双链DNA,对单链DNA和5'端未磷酸化修饰的DNA的酶切活性较低,不能从DNA的切刻或缺口处起始消化。3.**活性差异**:-**ExoIII**:对具有3'-突出末端(至少有4个碱基,且具有3'-末端C残基)的DNA、单链DNA、硫代磷酸酯连接的核苷酸无活性。-**Lambda核酸外切酶**:对5'-OH端的切割速度比5'-P端慢约20倍;对单链DNA的酶切速度比双链DNA慢约100倍。4.**应用场景**:-**ExoIII**:可以用于生产特定方向的单链DNA,将线性化DNA设计成为一端为不切割末端(3'突出端),另一端则设计为易切割末端(平端或5'突出端)。

在分子生物学和细胞生物学研究中,核酸染料是不可或缺的工具,用于检测和分析DNA和RNA。RcView吖啶橙核酸染料是一种新型的荧光染料,以其性能和安全性,逐渐成为实验室中理想的核酸染色选择。一、产品特点高灵敏度与特异性RcView吖啶橙核酸染料能够与核酸结合后产生强烈的荧光信号,其灵敏度与传统的溴化乙锭(EB)相当,但安全性更高。在紫外透射光下,双链DNA呈现绿色荧光,而单链DNA和RNA则呈现红色荧光,这种独特的双色特性使其能够区分不同形式的核酸。安全性传统的EB染料具有强致病性,而RcView吖啶橙核酸染料通过多项致突变性试验(如Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验等),结果均为阴性,是一种安全的替代品。操作简便RcView的使用方法与EB完全相同,适用于琼脂糖凝胶电泳中的核酸染色。用户只需在融化的琼脂糖凝胶溶液中加入RcView,轻轻摇匀后倒胶即可。Recombinant Biotinylated Human BTLA Protein,His-Avi TagPfu酶的扩增速度较Taq酶稍慢。经过基因改造的Pfu酶扩增速度可达4 kb/min,是普通Pfu酶的8倍。

DNA片段大小对磁珠法DNA凝胶回收试剂盒的回收率有影响。根据搜索结果,我们可以得出以下结论:1.**小片段DNA(小于200bp)**:对于小于200bp的DNA片段,回收率会下降。这是因为小片段的DNA与固相基质的结合力相对较弱,因此相对损失较大,导致回收率降低。在某些情况下,小于100bp的DNA片段的回收率可能只有30-60%。2.**中等大小片段DNA(200bp-4kb)**:在这个范围内的DNA片段,通常回收率较高,可以达到80-95%。这是因为这些片段大小适中,既不会因太小而损失,也不会因太大而难以洗脱。3.**大片段DNA(大于4kb)**:对于大于4kb的DNA片段,回收率也会下降,通常在30-50%之间。这是因为大片段的DNA与固相基质的结合力更强,因此更难洗脱。4.**片段大小与回收率的关系**:DNA片段越大,和固相基质的结合力越强,就越难洗脱,回收率就越低。相反,DNA的量越少,相对损失越大,回收率也越低。5.**操作技巧**:为了提高回收率,可以采取一些操作技巧,比如减少切胶体积、确保溶胶彻底、使用合适的洗脱液体积和pH值等。
BloodGenomicDNAIsolationKitwithMagneticBeads是一种利用磁珠技术从血液中提取基因组DNA的试剂盒。以下是一些关键特点和应用:1.**高效提取**:该试剂盒采用特殊的磁珠和缓冲体系,能够快速且高效地从100μl至1ml的血液中分离和纯化高质量的基因组DNA。2.**磁珠特性**:独特的磁珠具有很强的核酸亲和力,在特定条件下可以快速分离和纯化核酸。这些磁珠对磁场响应迅速,使得提取过程既安全又便捷。3.**提取过程**:血液样本在裂解液和蛋白酶K的作用下迅速裂解,释放出的基因组DNA与磁珠特异性结合。通过磁分离架的作用,磁珠与溶液快速分离,经过洗涤去除杂质,用洗脱液将基因组DNA从磁珠上洗脱下来。4.**应用广**:提取的基因组DNA可用于多种分子生物学实验,如PCR扩增、酶切、基因分型、Southern杂交、高通量测序、基因组DNA文库构建等。5.**操作简便**:整个抽提过程大约需要50分钟,操作简便,无需使用有毒有害的有机试剂,如酚或氯仿,提高了实验的安全性。6.**高纯度和高回收率**:提取的DNA纯度高,A260/A280通常在1.7-1.9之间,表明蛋白和RNA的污染低。回收率通常超过80%。

牛痘DNA拓扑异构酶I(VacciniaVirusDNATopoisomeraseI)在实验室中的使用主要涉及以下几个步骤:1.**DNA载体连接**:-牛痘DNA拓扑异构酶I可以用于DNA载体连接,特别是在TOPO克隆载体制备中。它能够识别并切割双链DNA末端[5’C(T)CCTT],并与DNA形成共价连接形成稳定复合物,遇到DNA的5’-OH基团后,重新连接形成完整DNA链。2.**接头连接**:-在NGS建库中,牛痘DNA拓扑异构酶I可用于接头连接。这包括将含有特定序列的接头A和接头B与酶一起孵育,以实现DNA片段的连接。3.**操作步骤**:-**质粒解旋**:将超螺旋质粒DNA与牛痘DNA拓扑异构酶I混合,在37°C下孵育5-15分钟,以实现质粒的解旋。-**接头连接**:将接头A(含CCCTT序列)和接头B(含5’OH)与牛痘DNA拓扑异构酶I混合,在37°C下孵育5-15分钟,以实现接头的连接。4.**注意事项**:-双链接头A通常5’端做NH2封闭修饰,以防止自连接;接头A的CCCTT后通常包含5-12bp尾巴,再长的尾巴会导致连接效率大幅下降。-双链接头B的5’端必须包含-OH。-由于该酶应用广,在不同的实验中使用策略不同,需要灵活运用,并根据具体文献进行调整。
FnCas12a在完成特异性切割后,还能非特异性地切割其他单链DNA,这一特性被用于开发了多种核酸检测技术。Recombinant Cynomolgus B7-H6/NCR3LG1 Protein,His Tag
Phusion Master Mix对各种类型的DNA模板(如基因组DNA、质粒DNA和cDNA)均表现出良好的兼容性。Recombinant Human DLL3 (27-215) Protein,His-Flag Tag
Uracil-DNAGlycosylase(E.coli)(5U/µl):高效除PCR污染的关键酶在分子生物学研究中,PCR技术的应用极为广,但PCR产物的交叉污染问题一直是影响实验准确性和可靠性的关键因素之一。Uracil-DNAGlycosylase(E.coli)(UDG)作为一种高效的酶工具,凭借其独特的性能和广的应用,已成为解决这一问题的理想选择。一、产品特点高效水解尿嘧啶Uracil-DNAGlycosylase(UDG)能够特异性地催化DNA中尿嘧啶(dU)碱基与脱氧核糖之间的N-糖苷键水解,释放游离尿嘧啶。这种酶对单链和双链DNA均有效,但对RNA或长度不超过6个碱基的DNA寡核苷酸无活性。防止PCR产物污染UDG的主要应用之一是防止PCR产物的交叉污染。通过在PCR反应中使用dUTP替代dTTP,生成含有dU的PCR产物,UDG可以特异性地切割这些含有dU的DNA,从而防止其在后续反应中作为模板被扩增。反应条件兼容性UDG在pH8.0左右表现出活性,且不需要二价阳离子,可在较宽的pH范围内工作。它对高离子强度(>200mM)敏感,因此在使用时需注意反应体系的离子浓度。Recombinant Human DLL3 (27-215) Protein,His-Flag Tag
DL200DNAMarker:助力分子量分析的科研利器在分子生物学研究中,DNAMarker作为分子量标准,是琼脂糖凝胶电泳中不可或缺的工具。DL200DNAMarker凭借其的性能和独特的设计,为科研人员提供了高效、可靠的分子量分析解决方案。分子量标准DL200DNAMarker由特定分子量的双链DNA片段组成,条带大小准确,能够为DNA片段的大小测定提供可靠的参照。其条带清晰锐利,背景干净,即使在低浓度下也能保持高辨识度,确保实验结果的准确性。即用型设计,操作便捷该产品已预混1×LoadingBuffer,无需额外处理,可直接上样进行电泳。这种即用型设计简化了实验操作流程,节省了科研人员的...