磁珠法PCR/DNA纯化试剂盒与传统纯化方法相比具有以下优势:1.**操作简便快捷**:磁珠法纯化过程通常可以在15分钟内完成,包括结合、洗涤和洗脱步骤,无需复杂的离心或抽滤操作。2.**高纯度和高回收率**:磁珠法纯化得到的DNA纯度高,通常回收率可以达到90%以上,适用于100bp以上的DNA片段的纯化,对达到10kb片段DNA的纯化也能保持较好的效果。3.**适用性广**:磁珠法PCR/DNA纯化试剂盒适用于多种样本类型,包括PCR产物、酶切产物、连接产物等,也适用于低浓度样品的浓缩。4.**安全性高**:操作过程中不涉及酚/氯仿等有毒试剂,更加环保和安全。5.**灵活性**:可以根据实际状况灵活调节磁珠用量,适应不同体积和浓度的样品处理。6.**自动化和高通量**:磁珠法纯化试剂盒适合手工操作,也可用于自动化工作站或核酸自动提取仪,实现高通量操作。7.**温和的条件**:磁珠法条件温和,对DNA的损伤小,适合后续的多种分子生物学实验,如酶切、连接、转化细菌、测序、PCR、杂交等。8.DNA片段适应性**:适用于从150bp到50kb的DNA片段的纯化,能够满足大多数分子生物学实验的需求。
耐高盐全能核酸酶(SaltActiveUltraNuclease)是一种重组非特异性核酸内切酶,具有以下特点和应用:1.**来源与表达**:耐高盐全能核酸酶来源于海洋微生物,通过基因工程改造在大肠杆菌(_Escherichiacoli_)中表达纯化。2.**活性条件**:在0.5MNaCl条件下具有比较好活性,这使得它在高盐环境下也能保持高效。3.**应用领域**:-**病毒纯化、疫苗生产**:作为宿主残留核酸去除试剂,将宿主残留核酸降至皮克(pg)级别,提高生物制品功效和安全性。-**蛋白和多糖类制药工业**:用于去除核酸污染,降低细胞上清和细胞裂解液的粘度,提高蛋白纯化效率及功能研究。-**防止细胞结团**:有效防止细胞和疫苗研究中外周血单核细胞(PBMC)的结团。4.**产品性质**:-分子量:24.7kDa。-等电点:9.61。-纯度:≥99%。-酶活:250-300U/μL。-适温度:37℃(工作范围0-42℃)。-辅助因子:1-10mMMg2+。5.**储存条件**:以无菌液体酶的形式提供,储存于缓冲液(25mMTris-HCl,5mMMgCl2,500mMNaCl,50%Glycerol,pH7.5)中,无色透明液体。干冰运输,-15℃~-25℃保存,有效期2年。Recombinant Mouse NCAM-1/CD56 Protein,His Tag激发的泛素被转移到泛素结合酶E2的活性位点半胱氨酸残基上,形成E2-泛素硫酯中间体。
蛋白A-微球菌核酸酶(pA-MNase)是一种特殊的融合蛋白,它结合了蛋白A和微球菌核酸酶(MNase,MicrococcalNuclease)的特性。以下是pA-MNase的一些关键特点和应用:1.**融合表达产物**:pA-MNase是蛋白A与微球菌核酸酶MNase的融合表达产物,因此它同时具有ProteinA的抗体结合活性和MNase的核酸内切酶活性。2.**双重功能**:由于其双重功能,pA-MNase常用于蛋白质-DNA相互作用研究,特别是在ChIC(ChromatinImmunocleavage)和CUT&RUN(CleavageUnderTargetsandReleaseUsingNuclease)技术中。3.**ProteinA的特性**:ProteinA是一种发现于金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)的细胞壁表面蛋白,分子量为42kDa,能特异性地与哺乳动物免疫球蛋白(Immunoglobulin,Ig)结合,通常结合部位为免疫球蛋白的Fc区。4.**微球菌核酸酶(MNase)的特性**:MNase是一种核酸内切酶,能够降解核酸,常用于降解蛋白质制备中存在的核酸,减少细胞裂解液的粘度,以及用于染色质结构分析和快速RNA测序。5.**反应条件**:MNase的反应条件包括1XMicrococcalNucleaseReactionBuffer,需要补充100µg/ml重组白蛋白,分子生物学级,并在37°C下孵化。
BstDNA聚合酶在等温扩增中的优势主要包括以下几点:1.**高灵敏度和扩增效率**:BstDNA聚合酶具有链置换能力,能够在恒温条件下快速、高效、特异性地扩增模板。翌圣生物的BstPlusDNAPolymerase灵敏度超高,低至5copies目的基因可测,且始终能比竞品更快达到阈值,扩增速率更快。2.**高dUTP耐受性**:BstPlusDNAPolymerase具有较高的dUTP耐受性,在反应体系中添加dUTP对BstPlusDNAPolymerase的灵敏度及扩增效率无影响,这使得它在防污染系统中表现出色。3.**快速扩增**:使用BstDNA聚合酶的等温扩增技术,如LAMP,可以在15-60分钟内实现109-1010倍的扩增,显示出快速的扩增能力。4.**热稳定性**:BstDNA聚合酶具有较强的热稳定性,能在60-65℃的恒温条件下保持活性,这使得它非常适合于不需要温度循环的等温扩增技术。5.**简化的反应设置**:Bst3.0DNAPolymerase优化了Loop-MediatedIsothermalDNAAmplification(LAMP)反应,简化了反应设置,可以实现单酶RT-LAMP反应。6.**抗抑制剂能力强**:Bst3.0DNAPolymerase即使在高浓度的扩增抑制剂中,包括dUTP,也能展现出强大的性能。
嗜热脂肪芽孢杆菌DNA聚合酶I(BstDNAPolymeraseI)是一种热稳定的酶,它在高温下(55-65°C)仍然保持活性,这使得它在分子生物学实验中非常有用,尤其是在需要高温反应的实验中,如热循环扩增(PCR)。BstDNAPolymeraseI具有以下特性:1.**热稳定性**:BstDNAPolymeraseI在高温下具有较高的稳定性,适用于高温反应的实验,如PCR。2.**3'到5'外切酶活性**:这种酶具有3'到5'外切酶活性,能够切除DNA末端上的非特异性引物和杂交DNA,使其成为等温扩增应用的理想酶。3.**耐盐性**:BstDNAPolymeraseI在高盐条件下仍能保持稳定活性,这在一些特殊的PCR应用中非常有用。4.**等温扩增**:由于其3'到5'外切酶活性,BstDNAPolymeraseI用于等温扩增反应,如LAMP技术,这种技术能够在恒温下进行DNA扩增,无需繁琐的温度循环。5.**快速PCR**:由于其高温稳定性,BstDNAPolymeraseI也可用于快速PCR反应,缩短了实验时间。6.**高GC含量模板扩增**:BstDNAPolymeraseI对高GC含量模板的扩增效果较好,因此在一些难扩增的模板中表现出色。Cpf1是一种新发现的类2/型V CRISPR-Cas DNA内切酶,在不同系统中显示出一系列的活性。Recombinant Human IL-6 Protein
FnCas12a在完成特异性切割后,还能非特异性地切割其他单链DNA,这一特性被用于开发了多种核酸检测技术。Recombinant Cynomolgus BST2 Protein,His Tag
BstDNA聚合酶和TaqDNA聚合酶在分子生物学实验中都是常用的酶,但它们之间存在一些关键的不同点:1.**来源和热稳定性**:-**TaqDNA聚合酶**来源于嗜热菌Thermusaquaticus,具有很好的耐热性,能够承受PCR的热变性步骤。-**BstDNA聚合酶**来源于嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillusstearothermophilus),同样具有较高的热稳定性,适用于等温扩增,如LAMP技术,无需PCR热循环。2.**酶活性**:-**TaqDNA聚合酶**具有5'-3'聚合酶活性和5'-3'外切酶活性,但没有3'-5'外切酶活性。这意味着它在DNA合成过程中可以校正一些错误,但保真性相对较低。-**BstDNA聚合酶**具有5'-3'聚合酶活性和强链置换活性,但缺乏5'-3'外切酶活性。这使得它在等温扩增中更为有效,尤其是在需要高保真度和快速扩增的应用中。3.**应用领域**:-**TaqDNA聚合酶**主要用于PCR技术,适用于各种DNA片段的扩增,包括复杂模板和长片段的扩增。-**BstDNA聚合酶**特别适用于等温扩增技术,如LAMP,这些技术不需要温度循环,适用于快速、低成本的DNA扩增。4.**扩增速度和效率**:-**BstDNA聚合酶**在等温扩增中显示出比传统TaqDNA聚合酶更快的扩增速度和更高的产量,尤其是在优化的LAMP反应中。
在PCR实验中,确保引物与目标序列的完全特异性是至关重要的,这可以通过以下几个步骤实现:1.**基于已知序列设计引物**:根据目标DNA序列,使用计算机软件(如Primer3、Snapgene等)设计出两个互补的引物,以保证引物的特异性和准确性。2.**引物长度和Tm值**:通常选择引物长度为18-25个核苷酸,引物的Tm值(熔解温度)通常选择在50-60℃之间,以保证引物和目标DNA序列的稳定性。3.**避免与其他DNA序列的交叉反应**:使用BLAST等计算机软件进行引物特异性检查,确保引物只与目标序列互补,而不与其他非目标序列发生杂交。4.**避免引物自身结合**:设计引物时要避免引物之...