牛纤维蛋白原不仅在血液凝固和伤口愈合中发挥着重要作用,而且在生物医学研究中具有广泛的应用前景。深入研究其分子特性和生物学功能,有助于开发新的策略,以应对与血液凝固相关的疾病。未来方向未来的研究可以集中在以下几个方面:牛纤维蛋白原与凝血级联反应中其他组分的相互作用。牛纤维蛋白原在不同疾病状态下的功能变化。基于牛纤维蛋白原的新型生物材料的开发。本综述总结了牛纤维蛋白原的分子特性和生物医学应用,为未来的研究提供了方向,并强调了其在疾病和生物材料开发中的潜力。α-凝血酶,是血液凝固途径中的关键酶。它负责将纤维蛋白原转化为纤维蛋白,形成血凝块的基础。Recombinant Human FOLR3Protein,His Tag
大肠杆菌系统通常是小分子细胞质蛋白或结构域表达的宿主。用大肠杆菌生产蛋白质,由于只需要简单的培养基和条件,因此费用低且方便。此外,除了无细胞表达,它是速度的系统,大肠杆菌倍增时间(约20min)比酵母(2h)、昆虫细胞和哺乳动物细胞都快。一般来说,在大肠杆菌中表达重组蛋白包括:1.将一个编码目标蛋白的质粒导入宿主菌;2.培养细胞至对数生长期;3.诱导蛋白表达。选择合适的表达载体合适的宿主选定后,相应的有许多工程化克隆位点和用于驱动蛋白表达的非编码序列的载体可用。启动子通常是可诱导的,以在细胞生长到合适的密度前阻止目标蛋白表达。大部分载体还提供目标蛋白与一系列蛋白标签构建融合蛋白的选择。常用的大肠杆菌表达载体分为以下两大类:E.coliRNA聚合酶转录的载体NLS-Cas9 Nuclease透明质酸及其衍生物由于其生物相容性和生物降解性,被用作药物的控释载体。
3C蛋白酶是切割小RNA病毒科非结构蛋白的关键酶,在病毒复制过程中发挥着重要作用。鼻病毒属于小RNA病毒科,其中的人鼻病毒3C蛋白酶基因编码区全长552bp,编码的蛋白质相对分子质量约为22000Da。人鼻病毒3C蛋白酶具有高度的酶切特异性,能特异切割位于Gln-Gly之间的肽键,识别位点为Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln↓Gly-Pro。本公司将人鼻病毒3C蛋白酶的编码区基因,在大肠杆菌中进行重组表达,纯化后获得了高纯度的重组3C蛋白酶,该蛋白酶能特异切割含有3C酶切位点的融合蛋白,具有良好的生物学活性。同时,本公司生产的3C蛋白酶带有GST和MAT标签蛋白,有利于后期将其从酶切体系中去除。产品性质:中文别名(Chinesesynonym):3C蛋白酶英文别名(Englishsynonym):3CProtease来源(Source):大肠杆菌表达标签(label):GST-3CProtease-MAT纯度(Purity):经SDS-PAGE及HPLC分析,纯度>95%分子量(Molecularweight):47.38kDa比活性(Specificactivity):500U/ml缓冲液组分(Buffer):50mMTris-HCl,150mMNaCl,1mMEDTA,1mMDTT,pH7.0酶活定义(UnitDefinition):在缓冲液中切割100μg被检测的融合蛋白,反应条件为4℃16小时,切割率≥90%运输和保存方法:干冰运输;保存于-20℃。
抑肽酶(Aprotinin),一种丝氨酸蛋白酶抑制剂,广泛应用于生物技术领域。本研究探讨了利用大肠杆菌(E. coli)表达系统生产重组抑肽酶的方法,及其在科研和工业生产中的优势。引言抑肽酶,又称胰蛋白酶抑制剂,是一种小分子蛋白,能有效抑制胰蛋白酶、糜蛋白酶等丝氨酸蛋白酶的活性。在生物制药、细胞培养和分子生物学研究中,抑肽酶的使用对于防止非特异性蛋白水解至关重要。传统的抑肽酶主要来源于动物,如牛肺,但存在外源病毒污染的风险。因此,利用大肠杆菌表达系统进行重组抑肽酶的生产,可以提供一种无动物源、高纯度、质量稳定的替代品。材料与方法基因克隆与表达载体构建:人源Ⅲ型胶原蛋白基因被克隆并构建到适合大肠杆菌表达的质粒载体中。大肠杆菌表达菌株的构建:通过转化,将构建好的质粒导入大肠杆菌宿主菌中,构建表达菌株。发酵培养:利用发酵罐进行大肠杆菌的扩大培养,以提升重组抑肽酶的产量。蛋白纯化:通过多次柱纯化获得高纯度的重组抑肽酶。人α-凝血酶,一种丝氨酸蛋白酶,是凝血级联反应中的中心酶,对止血和其他多种生理过程至关重要。
3C样蛋白酶(3CLpro)或主要蛋白酶(Mpro),正式名称为C30内肽酶或3-胰凝乳蛋白酶样蛋白酶,[2]是在冠状病毒中发现的主要蛋白酶。它在11个保守位点切割冠状病毒多蛋白。它是一种半胱氨酸蛋白酶,是蛋白酶PA家族的成员。它在其活性位点具有半胱氨酸-组氨酸催化二联体并裂解Gln–(Ser/Ala/Gly)肽键。酶委员会将这个家族称为SARS冠状病毒主要蛋白酶(Mpro;EC3.4.22.69)。3CL蛋白酶对应于冠状病毒非结构蛋白5(nsp5)。通用名中的“3C”指的是3C蛋白酶(3Cpro),是一种在小核糖核酸病毒中发现的同源蛋白酶。3C样蛋白酶能够催化裂解P1位谷氨酰胺和P1'位小氨基酸(丝氨酸、丙氨酸或甘氨酸)之间的肽键。例如,SARS冠状病毒3CLpro可以自我切割以下肽:[3][4][5]TSAVLQ-SGFRK-NH2和SGVTFQ-GKFKK是对应于SARS3C样蛋白酶的两个自切割位点的两个肽该蛋白酶在冠状病毒复制酶多蛋白(P0C6U8)的加工过程中很重要。它是冠状病毒中的主要蛋白酶,对应于非结构蛋白5(nsp5)。[6]它在11个保守位点切割冠状病毒多蛋白。3CL蛋白酶在其活性位点具有半胱氨酸-组氨酸催化二元组。[4]半胱氨酸的硫作为亲核试剂,组氨酸的咪唑环作为一般碱基。在药物筛选中,全长CB1受体可用于高通量筛选实验,以发现和优化潜在的药物候选物。Recombinant Human FOLR3Protein,His Tag
透明质酸以其独特的分子结构和理化性质在机体内发挥多种重要的生理功能,如润滑关节、调节血管壁的通透性。Recombinant Human FOLR3Protein,His Tag
RecombinantBiotinylatedHumanAFP(HLA-A*02:03)Protein,His-AviTag性能参数表达区间及表达系统(Source)RecombinantBiotinylatedHumanAFP(HLA-A*02:03)ProteinisexpressedfromHEK293withHistagandAvitagattheC-terminal..ItcontainsGly25-Thr305(HLA-A*02:03),Ile21-Met119(B2M)andFMNKFIYEIpeptide.[Accession|AAA03604.1(HLA-A*02:03)&P61769(B2M)&FMNKFIYEI]分子量大小(MolecularWeight)TheproteinhasapredictedMWof50.70kDa.Duetoglycosylation,theproteinmigratesto53-60kDabasedonTris-BisPAGEresult.(Endotoxin)Lessthan1EUperμgbytheLALmethod.纯度(Purity)>95%asdeterminedby>95%asdeterminedbyHPLC制剂(Formulation)Lyophilizedfrom0.22μmfilteredsolutioninPBS(pH7.4).Normally8%trehaloseisaddedasprotectantbeforelyophilization.重构方法(Reconstitution)Centrifugetubesbeforeopening.Reconstitutingtoaconcentrationmorethan100μg/mlisrecommended.Dissolvethelyophilizedproteinindistilledwater.Recombinant Human FOLR3Protein,His Tag
T7EndonucleaseI(T7EI)在CRISPR/Cas9基因编辑中的应用主要体现在突变体检测和基因编辑效率评估上。以下是T7EI在CRISPR/Cas9中的具体应用步骤和特点:1.**基因编辑效率评估**:-T7EI用于评估CRISPR-Cas9在给定的导向RNA靶位点上对细胞群体进行基因编辑的效率。-通过PCR扩增围绕CRISPR导向RNA靶位点的基因组DNA,如果CRISPR-Cas9介导的非同源末端连接(NHEJ)修复事件引入了突变,变性和退火将形成突变型和野生型PCR扩增子的异源双链DNA。2.**突变体检测**:-如果CRISPR/Cas9编辑成功在DNA上引入突变,则可与...