特别推荐应用(提供实验报告作为参考) Microcon®超滤管: Microcon®PCR 级超滤管: • 法医鉴定分析的DNA样品制备 • 生物大分子样品浓缩、脱盐及缓冲液置换 • 体外合成mRNA的纯化 • 以人mRNA或总RNA制备荧光DNA探针 • 游离标记物的去除 • 纳克级核酸的定量回收及大片段DNA完整性研究 • 替代乙醇沉淀,离心法高效浓缩基因组DNA 应用指南 典型应用 肽及生长因子浓缩 蛋白浓缩与脱盐 电泳等操作前的蛋白样品浓缩 HPLC前去除蛋白 组织培养抽提物和细胞裂解液中大分子成分的纯化 生物样本浓缩(抗原,抗体,酶等) 从含有SDS(或无SDS)的缓冲液中浓缩gDNA 核酸浓缩与脱盐(单链或双链核酸) 去除标记核苷酸 去除标记氨基酸 从扩增的DNA产物中去除引物 克隆前去除连接序列(linker)益启生物公司的超滤浓缩管种类繁多。常州默克2ml超滤浓缩管参数
这是一种用一步温和的离心完成渗滤而很大程度保持蛋白活性的好方法。 为了与下游应用兼容,常常需要用透析或渗滤方法对蛋白样品进行缓冲液置换。传统透析方法需要时间很长,多步透析容易造成样品丢失、损耗和失活,而且***还需要一步浓缩。新产品 Amicon® Pro 带来了突破性的革新,需一步温和的渗滤操作即可达到同时对样品进行换液和浓缩的目的。 Amicon® Pro建立小量蛋白样品纯化-换液/ 脱盐-浓缩流程 新标准 操作步骤的优化与简化往往带来更好的结果,数据的稳定性、可比性和高通量化随之得以改 善,默克密理博新上市的Amicon® Pro纯化超滤管创造性地将纯化、换液、脱盐和浓缩操作融为一体,减少样品转移损失和人为操作的繁琐和误差,使蛋白样品的处理更加标准化,数据结果便于评估和比较。宝贵的小量样本从此有了比较好的操作工具。崇明区Millipore超滤浓缩管订购上海超滤浓缩管供应商。
用于搅拌式超滤杯的Ultracel®预切超滤膜片 Ultracel® 再生纤维素膜可以用来对较为稀释的溶液进行脱盐或浓缩。Ultracel® 膜是亲水性的,微观结构紧密,确保对蛋白、核酸等大分子吸附比较低而回收率比较高。 *膜的常规截留分子量分为1, 3, 5, 10, 30及 100 kDa等。 *膜片直径分为25, 44.5, 47, 63.5, 76, 90及150 mm。 对于大体积、高浓度(如蛋白浓度大于 1.0 mg/mL)的样品进行脱盐和浓缩,Biomax®聚苯醚砜(PES)超滤膜是很好的选择。血清、血浆或条件组织培养基等,都是 Biomax®超滤膜适合处理的样品。 *膜的常规截留分子量为5,10,30, 50, 100, 300和500kDa等。 *膜直径分为25,44.5,47,63.5和76mm。
无血清样品选择 3kDa 孔径是为了尽可能提高外泌体的回收率。 有血清样品选择100kDa/500kDa孔径是为了尽可能去除细胞分泌蛋白以及血清成分中小于外泌体的白蛋白造成的影响。 研究者可根据样品的粘稠程度,以及需要制备的目标外泌体 / 囊泡 / 颗粒的大小分布来选择和优化超滤孔径(3kDa/10kDa/30kDa/50kDa/100kDa),以便达到更好的得率和操作体验。 样品体积大于 30mL 时可以考虑用超滤杯或 Centricon-70 超滤管,请注意搅拌式超滤杯在200mL 以内时吸附损耗可能较离心式超滤管略偏高。如需进一步提高特定外泌体的纯度,可选用包被相应抗体的磁珠进行亲和纯化精制。超滤浓缩管的系列有很多种。
外泌体的精制磁珠法富集精制外泌体:300μg样品(相当于300μg总蛋白)用含有5μg anti-CD63抗体的溶液稀释,与protein A/G磁珠共孵育1hr,漂洗后用0.2M glycine洗脱。如果要先将抗体偶联在磁珠上(以避免抗体洗脱下来对外泌体的干扰),请参考默克磁珠操作说明书。(Protocol C - Antibody Crosslinking Using Bis(sulfosuccinimidyl) suberate (BS3))。推荐使用试剂目录号信息:cat# CBL553t 和cat# OP171以及LSKMAGAG02。 默克已经建立了基于“微滤+超滤”的外泌体制备操作标准,相较于需要昂贵的设备及繁琐操作的超速密度梯度离心,用实验室常见的工具解决外泌体制备的高大上问题,真是惠而不费,不亦乐乎?超滤浓缩管哪家比较靠谱?徐汇区浓缩管代理价
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默克密理博 Amicon® Ultra 离心式超滤管因其完美的设计 一经推出即成为生物样品操作的行业头牌产品。不论是蛋白、 核酸、***或颗粒物,抑或低浓度样品或宝贵的活性样品, Amicon® Ultra 都能兼顾高回收率和操作的方便性及标准 化,并满足下游各种应用的要求,使研究者处理样品时倍感轻 松。 Amicon® Ultra 超滤管的独特优点: 有效浓缩同时保证比较高的蛋白回收率 合理的死体积设计 •避免样品离干而降低回收率 •便于估计和控制样品浓缩倍数 •重复性好,便于样品数据相互比较常州默克2ml超滤浓缩管参数
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