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鼠尾胶原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事项：三维胶原的制备鼠尾胶原蛋白型在浓度1mg/ml以上，pH左右时可形成具有一定强度三维胶,建议成胶浓度1-2mg/ml。胶原蛋白溶解于0.006mol/L乙酸中，在成胶过程中需要加入0.06体积的0.1mol/LNaOH来中和。需要的溶液（均需要无菌、预冷）10mg/L酚红用于pH指示）0.1mol/LNaOH，0.1mol/L乙酸(一般不用)，双蒸水200ul鼠尾胶原蛋白型(5mg/ml)加到置于冰浴的离心管中，加入690ulH2O12ul0.1mol/LNaOH12ul0.1mol/LNaOH加到胶原溶液中，会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结）立即混匀。再加入100ul10PBS10培养液，混匀后立即加到培养器皿中(混匀后pH左右，如果PBS或培养液中没有加酚红，初次使用时需要用pH试纸测试)。制备鼠尾胶原（两个同学一组操作）。南京正规鼠尾胶原厂家直销

鼠尾胶原蛋白Ⅰ型使用说明：不含细胞的三维胶原的制备（以配制1毫升，1mg/ml三维胶为例）：将200ul鼠尾胶原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的离心管中，加入690ulH2O。然后加到12ul0.1mol/LNaOH中（如果反过来把12ul0.1mol/LNaOH加到胶原溶液中，会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结），立即混匀。再加入100ul10×PBS或10×培养液，混匀后立即加到培养器皿中(混匀后pH为7左右，如果PBS或培养液中没有加酚红，初次使用时需要用pH试纸测试)。将培养器皿在室温(25度左右)下放置20分钟待胶凝固后，转移到培养箱内。如果配制中使用的是10×PBS，使用前需要加入适当体积的细胞培养液预平衡。长沙鼠尾胶原厂家现货I型胶原蛋白（Collagen, Type I）结构上是由2个α1链和1个α2链组成的异源多聚体。

鼠尾胶原简介：鼠尾I型胶原蛋白（Collagenfromrattail,TypeI）系采用Birkedal-Hansen方法在无菌下制备，纯度达到95%以上，可溶于0.006mol/L乙酸。本品可用于细胞培养皿的包被，特别适合普通细胞培养器皿不易贴壁细胞的培养；也可用于制备三维胶原凝胶，使细胞在模拟的三维环境中生长。质量标准：1、SDS-PAGE分析纯度大于95%。2、无菌检验结果为阴性。3、本品2μg/cm2包被细胞培养皿后培养PC-12细胞，贴壁及生长正常。4、本品浓度1mg/mL，pH7.0时形成具有一定强度的三维胶原凝胶，NIH-3T3细胞在三维凝胶内生长正常、PC-12细胞在三维凝胶表面生长正常。

鼠尾Ⅰ型胶原：组装液的配置：1.50mmol/L甘氨酸+200mmol/L氯化钾100mL，用1mol/L氢氧化钠调节酸碱度至9.2。2.胶原纤维的重构吸取胶原10μL至小培养皿中，倒入0.5mL自组装液，室温放置20min。予自组装液自组装24h。吸取0.05%戊二醛2mL至小培养皿中，将自组装24h的胶原浸泡在戊二醛中。然后将胶原经去离子水、50%乙醇、100%乙醇依次漂洗后进行TEM观察。3.生物矿化形成仿生骨材料静滴配置钙磷矿化液将25mL钙液(10mmol/L二水氯化钙+150mmol/L氯化钠+50mmol/L三羟甲基氨基甲烷+0.02%三氮化钠)倒入烧杯中，滴入聚丙烯(PAA)至浓度350μg/mL；滴加1mol/L的氯化氢，调节酸碱度至7.4，然后缓慢滴入25mL磷液(6mmol/L磷酸氢二钠)，约16滴/min。论鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁，涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录，并且制作简便，成本低廉。鼠尾型胶原构建与人类自体骨组织化学成分和分子结构相近的仿生骨材料。

鼠尾胶原的生物矿化和TEM观察：果冻样Ⅰ型胶原蛋白胶体初始浸泡在矿化液中时呈微白色；矿化2d后，胶体的颜色逐渐加深至乳白色；矿化6d后，随着羟基磷灰石晶体矿化长入胶原纤维内部，胶体颜色加深至纯白色，并在胶体表面沉积了一层薄薄的羟基磷灰石钙晶体，予镊子夹起，其表层羟基磷灰石钙晶体破碎散落。TEM表征显示：矿化2d后，Ⅰ型胶原纤维的明暗相隔周期性条纹结构逐渐模糊，羟基磷灰石钙前体渗入胶原纤维内部，胶原纤维部分矿化，沿着胶原纤维生长，忖度变深；矿化6d后，Ⅰ型胶原纤维的明暗相隔D-Band结构完全消失，胶原纤维内部可以看到黑色羟基磷灰石晶体，嵌入胶原纤维纵向生长。当鼠尾Ⅰ型胶原纤维完全矿化时，由于整条胶原纤维都被羟基磷灰石钙晶体占据，胶原纤维呈现黑色，选区衍射斑图符合羟基磷灰石表征。整个操作请在无菌环境下无菌操作，避免污染以影响细胞生长。徐州鼠尾胶原厂家批发价

成纤维细胞胶原凝胶复合物有着良好的生物学特性。南京正规鼠尾胶原厂家直销

鼠尾胶原蛋白的提取方法：1.一种生物医用鼠尾胶原蛋白的提取方法，其特征在于，包括以下步骤:(1)将无组织纤维、脂肪和多糖残留的鼠尾腱，真空冷冻干燥备用；(2)冻干鼠尾腱经低温冻干粉碎至200〜400目；(3)在冰水浴中将粉碎的鼠尾腱在醋酸溶液中溶胀，鼠尾腱与醋酸的固液比为I克:10mL〜I克:120mL，期间不断搅拌，防止冻结成块，得到胶原溶胀液；(4)称取胃蛋白酶加入到胶原溶胀液中，鼠尾腱与蛋白酶质量比为50:I〜100:1，在4°C，48〜74小时酶解，期间间歇性搅拌。南京正规鼠尾胶原厂家直销