Amicon® stirred cells 搅拌式超滤装置对于高浓度(百分之十的)大分子溶液快速浓缩和脱盐提供了的可行方法。做蛋白浓缩时,向超滤装置中导入气压,大于超滤膜截留分子量的溶质将被截留在容器内,水及小于超滤膜截留分子量的溶质(如盐分)会被过滤并排出。加压搅拌式设计防止浓缩的样品发生沉淀,比离心超滤温和,对于高浓度、易沉淀样品的进一步浓缩同时脱盐等应用是较佳选择。配套选择的超滤膜可以灭菌并经处理后反复使用,更为经济。Millipore密理博聚四氟乙烯滤膜。安徽混合纤维素滤膜Millipore密理博批发
Amicon® Pro 纯化超滤系统目前的蛋白纯化常常包括很多步骤,用到多种器具,却又因此带来蛋白降解和损失的问题。为了避免因样品转移带来的各种风险,减少您在样品孵育、漂洗、洗脱、浓缩及换液各步上耗费的时间,默克密理博的研发团队创新地推出了Amicon®Pro一体化纯化超滤系统。Amicon®Pro提供了对小量蛋白样品的标准化操作,使纯化浓缩蛋白变得简便高效,数据稳定易得。高产:没有样品转移,损失更少温和:特别的渗滤设计使换液过程更温和快速:从细胞裂解到纯化、优化一共需要5次低速离心灵活:一种离心方法,多方面支持各种样品制备所需广东滤膜Millipore密理博批发上海登宁Millipore滤膜。
温度:通常增加操作时的温度可以提高超滤效率。每增加 1℃蛋白扩散率增加 3-3.5%,同时溶液粘度降低。实践中一般是以样品和设备能耐受的较高温度来操作。pH:改换溶液和 / 或 pH 常常改变分子结构,蛋白尤其如此。在蛋白的pI 值蛋白会沉淀,产生堵塞和得率损失。污垢:溶液中除了目的分子造成的浓差极化,还有其它小颗粒和分子会在膜上富集和沉淀,逐渐堆积在膜孔上或膜孔结构中,形成结晶和沉淀。
Amicon® Pro能做到一步离心完成脱盐换液蛋白缓冲液置换、脱盐和透析样品的特点和制备要求 Amicon® Pro 系统 Amicon® Ultra 超滤管 D-Tube™ 透析管快速操作 ~20 分钟 <1 小时 5 小时敏感样品,在高浓度时容易出现沉淀 适合使用 不适合使用 适合使用透析后浓缩 适合使用 适合使用 不适合使用置换的缓冲液量比较有限 适合使用 适合使用 不适合使用
如何使用Amicon® Ultra-15离心过滤器
1. 向Amicon® Ultra超过滤装置加入不超过15 mL的样本(如果使用定角转子则为12 mL)。
2. 将盖好盖子的过滤装置放入离心转子中,用一个类似的装置抵住。
3. 当使用摆桶转子时,以较大4,000 × g旋转约15–40分钟。
当使用定角转子时,装置的方向要使滤膜面板朝上,以较大5,000 × g旋转约15–40分钟。
说明: 关于典型旋转时间,请参见图1和表1。
4. 如要回收浓缩后的溶质,在过滤装置底部插入一个移液管,然后左右摇摆着吸取样本,以确保完全回收。 超滤液可以保存在离心管中。
说明: 要想达到理想回收,离心后请立即取走浓缩后样本。
Millipore聚碳酸酯膜用途。
切向流过滤技术
切向流超滤技术是目前普遍采用的一种膜分离技术,属于分子量水平的切向流过滤,通常截流分子量范围:1-1000 kD。超滤 (Ultrafiltration, UF) 是对溶液中的极小颗粒及可溶性分子进行分离的方法。这种分离主要基于分子的大小,但滤膜介质的通透性也会受样品的化学、分子及电荷特性的影响。超滤通常只能分离那些大小相差 3-5 倍以上的分子,而不适合分离大小相似的分子。
应用范围:
澄清 , 如:分离细胞 / 细胞碎片 ( 细胞收集细胞去除 )
浓缩 , 如:蛋白浓缩,去除水 / 缓冲溶液
脱盐
缓冲溶液的置换 , 如:层析前后缓冲液体系的改变
除热原 , 如:中药注射剂的热原去除
分离 / 纯化 , 如:蛋白、多肽、多糖、病毒、内病毒颗粒、
核酸、抗体
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非连续渗滤是换液的一种操作方法,即先浓缩到一定浓度再稀释到起始的体积,并多次重复这个操作,直到溶液中的盐或溶剂被去除或降到需要的浓度。而连续渗滤(保持恒定体积)是将超滤杯经转换装置(目录号6003)与补液杯(目录号6028)连接,使供气压和液体流转。连接有转换装置时,不必停下系统的运转就可以即时进行浓缩和渗滤之间的切换,将两种操作模式的优点集中在一起,有利于敏感的(蛋白)样品在较恒定、温和的条件下高效换液。安徽混合纤维素滤膜Millipore密理博批发
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