往胞内导入抗体或核酸染料,然而不会对细胞骨架的完整性产生影响。并且需要对有关抗原与相应抗体的结合力和核酸与染料的结合不会受到固定和透膜的步骤的影响进行保证。一些对胞内染色适用的试剂可能对表面标记分析不适用。如果不使用EMA的方法,那么通常不能够同时进行细胞活性的检测与胞内染色,对于某些核酸染料(如DAPI、TO、AO等)为活细胞染料,固定或透膜都不需要。细胞表面染色为大多数免疫表型分析所采用的方法。由于在细胞里同时存在着很多抗原,所以,在检测细胞表面抗原时,必须对保持细胞膜的完整十分留意。细胞分析仪的智能化识别技术和精细的分析结果,使其成为科学家研究细胞领域的先进技术。杭州实时无标记活细胞3D成像系统生产商家
流式细胞仪的光学检测系统:流式细胞仪通常以激光作为发光源。经过聚焦整形后的光束,垂直照射在样品流上,被荧光染料染色的细胞在激光束的照射下产生散射光和激发荧光。这两种信号同时被前向光电二极管和90°方向的光电倍增管接收。光散射信号在前向小角度进行检测,这种信号基本上反映了细胞体积的大小;荧光信号的接收方向与激光束垂直,经过一系列双色性反射镜和带通滤光片的分离,形成多个不同波长的荧光信号。光电倍增管接收的信号被积分放大反转换为电子信号输入电子信息接收器,传输给与流式细胞仪相连的计算机。常州实时无标记活细胞3D成像系统供应价格细胞分析仪通过分类、测量、统计和分析,得到准确的细胞数据,极大地帮助科研工作者优化实验方案。
染色体分析,流式细胞仪要求:360nm或488nm光源,450nm、580nm滤光片。BrdUrd标记追踪细胞分化,流式细胞仪要求:488nm光源,525nm、575nm滤光片。淋巴细胞亚群分析,流式细胞仪要求:488nm光源,525nm、575nm滤光片,液量计数系统。白血病免疫分型,流式细胞仪要求:488nm光源,525nm、575nm、675nm滤光片。Z少三色荧光,参数越多检测越为灵敏。血小板分析,流式细胞仪要求:488nm光源,525nm、575nm、675nm滤光片,液量计数系统。白血病、淋巴瘤微小残留病灶检测:①T系白血病微小残留病灶检测,流式细胞仪要求:488nm光源,525nm、575nm、675nm滤光片,液量计数系统。②B系白血病微小残留病灶检测,液量计数系统,流式细胞仪要求:488nm光源,525nm、575nm、675nm滤光片。Z少三色荧光,参数越多检测越为灵敏。③髓系白血病微小残留病灶检测,液量计数系统
细胞分析仪性能的技术指标:细胞分析仪性能的技术指标主要有荧光分辨率、荧光灵敏度、分析参数多少及分析、分选速度及纯度等。荧光分辨率是指分辨两个相邻峰的Z小距离,通常用变异系数(CV值)来表示。现在市场上主流型号的荧光分辨率小于2.0%,有的甚至在1%之内。荧光灵敏度反映了仪器探测Z小荧光光强的能力,一般用荧光微球上可测出的荧光(FITC)的Z小分子数来表示。目前细胞分析仪可以达到100以内。一般分析速度为500-10000个细胞/s,分选速度控制在1000个细胞/s以下,分选纯度>98%,有的细胞分析仪分析速度可达100000个细胞/s,分选速度可达70000个细胞/s,分选纯度>98%。细胞分析仪的多种光学通道及多种光源使它具有多种光谱扩展功能,可自由配置不同的光谱组合。
流式细胞仪的维护保养:选择正确的荧光染料,一般原则是:低表达抗原标记高S/N(信噪比)荧光素,高表达抗原标记低S/N(信噪比)荧光素。当样品用2种以上荧光染料时,为消除干扰,需要做荧光补偿。在应用流式细胞仪软件作荧光补偿时,补偿只应用在同一个激光激发的不同荧光素之间,应避免补偿不足和过度补偿。溶液使用前,所用溶液都要进行过滤处理,以免出现沉淀物而堵塞喷嘴。流式细胞仪状态稳定后,要先排除进样针内的气泡以保证喷嘴畅通,之后再对样本进行检测。细胞分析仪常常和细胞培养箱、显微镜等其他装置一起使用。南京外泌体分离分析系统供货公司
细胞分析仪可提供多轴或多屏幕操作,并可同时、实时地看到不同样品的结果。杭州实时无标记活细胞3D成像系统生产商家
应用方向不同,分析参数的多少差异较大,少的可以分析3个荧光参数和1个散射信号,多的可以分析13个荧光参数和3个散射信号。细胞分析仪的用途:在临床上的用途:细胞病变过程中伴随细胞DNA含量的改变,DNA非整倍体细胞是恶性疾病的特异性标志。细胞分析仪的FSC能够给出这些信息,在疾病的早期诊断和鉴别诊断中有着很重要的作用;早在80年代人们发现特定T细胞亚群可以反映AIDS患者的临床状态,而细胞分析仪可以对这些T细胞亚群进行检测,为AIDS的诊断、ZL提供有用信息。杭州实时无标记活细胞3D成像系统生产商家