核酸提取试剂盒(磁珠法):性能:1.可完美适配常规病du采样管,常温裂解即可实现高回收效率、高灵敏度、稳定无PCR克制。2.高回收率:RNA回收率高于90%,DNA回收率高于60%,多次重复试验回收率保持一致。3.高灵敏度:灵敏度比常规提取检测试剂提升6-10倍。可达到10拷贝以下的灵敏度。4.稳定无PCR克制:对核酸稳定高效提取,无PCR克制。优点:1.无需加入蛋白酶K、Carrier RNA等进口原材料。2常温贮存,便于运输及使用。3.病duDNA&RNA共提,核酸回收率高。4.安全无毒。5.操作简便,对仪器设备要求不高。6.适用于高通量自动化提取。7.磁珠捕获核酸的能力强,更适用于微量病du核酸提取。注意事项:严禁用手或其他物品触及拭子采样冠、棉签的前端,以免造成污染,影像检测结果。青岛自动核算提取试剂盒供应商
核酸提取方法的选择:本研究发现手工过柱提取的方法漏检率较低,而且敏感性比其他方法更高,但该方法耗时较长,尤其样本量大时,频繁的离心过柱使得时间成本很大增加,所以并不推荐用于大批量样本的筛查;而磁珠法由于能配合使用自动核酸提取仪,所以能有效节约时间和人工成本,非常适合对大批量样本的核酸提取,但本研究中所使用的两种磁珠提取方法,进口试剂的提取效果明显高于国产试剂,这提示国内的生产商要不断提高产品质量与技术含量,从而降低国内检测机构对国外试剂的依赖性。对于一步检测法来说,由于该法光光将10 μl的样本加入至反应体系中,降低了病毒在反应体系中的存在概率。由于该法漏检率高且敏感度较低,所以并不推荐使用。武汉全血核算提取试剂盒销售公司高活性的表面活性基团与核酸分子特异性识别和高效结合。
核酸提取原理:1.采用离心柱法的仪器离心柱法核酸提取仪主要采用离心机和自动移液装置相结合的方法,通量一般在1-12个样本,操作时间和手工提取差不多,并不能提高实际工作效率,且价格昂贵,不同型号仪器的耗材也不能通用,*适合经费充足的大型实验室使用。2.采用磁珠法的仪器以磁珠为载体,利用磁珠在高盐低PH值下吸附核酸,在低盐高PH值下与核酸分离的原理,再通过移动磁珠或转移液体来实现核酸的整个提取纯化过程。由于其原理的独特性,所以可设计成很多种通量,既可以单管提取,也可以提取8-96个样本,且其操作简单快捷,一批次上机提取时间为9~40min(不同样本不同厂家时间不同),较大提高了实验效率,且成本低廉,因而可以在不同实验室使用,是目前市场上的主流仪器。
核酸提取过程中,哪些因素会影响:1.固定剂对DNA的影响固定剂的类型直接影响提取DNA的质量.2.固定时间对DNA的影响固定过程中所发生的组织反应至今尚未被完全理解,虽然理论上讲室温下福尔马林与DNA几乎不发生的,但已发现碱基与组蛋白之间的甲基交联.3.固定温度等其他因素对DNA的影响核酸与固定剂的反应由反应成分、浓度、酸硷度以及温度等因素的调节,其中温度效应显得特别重要.4.组织处理过程对DNA的影响我们发现,从常规组织处理的蜡块中提取的DNA,其大部分分子量晨100bp-10000bp之间,主要分布于100-1500bp,光约1/3的组织所提取DNA>20kb。利用特殊的核酸释放剂,在常温下快速裂解病原体释放核酸。
详解磁珠法核酸提取过程中的常见误区:磁珠使用的越多,提取效果越好:有很多老师喜欢在提取效果不佳的时候,增加磁珠的用量,认为磁珠多加一点,就能吸上更多的核酸,不得不说这种想法是不可取的。磁珠的主要特点是既可以分散于液体中,也可以在外加磁场作用下以固态方式和液相分离,任何试剂体系,磁珠和液体的比例都应该是有一定阈值的,超过一定的比例,过多的磁珠将因为无法均匀分散于液体中,而丧失其分散的特性,也使得洗涤过程中无法充分增加核酸磁珠和液体接触的效率。而过量的磁珠也会吸附更多的杂质,对于除杂的效果影响非常大。甚至有些时候,过多的磁珠会吸附蛋白酶、溶菌酶等在液体体系中起主要作用的功能成分,导致整个试剂盒效率低下。有很多时候,在提取效果不佳的时候,减少磁珠使用量,反而是提升提取效果的较优途径。核酸提取在有机相中主要是脂类物质,蛋白质位于两相之间。天津自动核算提取试剂盒直销厂家
注意事项:较好不要服用抗病毒的药物和,以免影响检测的结果。青岛自动核算提取试剂盒供应商
提取方法: 1.表面活性剂快速制备法 使用Triton X-100A或NP40表面活性剂对细胞破碎,然后使用蛋白酶K或酚将蛋白去除,使用乙醇沉淀或透析。 2.加热法快速制备 温度96℃-100℃加热5min,之后离心后取上清,能够在PCR反应时使用。 3.碱变性快速制备 首先使用NaOH作用20min,再将HCI加入中和,离心后取上清,含有少量DNA。 4.玻璃棒缠绕法 使用盐酸胍对细胞进行裂解,在乙醇上铺上裂解物,然后在界面使用带钩或U型玻璃棒轻搅,在玻棒绕DNA沉淀液,使得80kbDNA生成。 青岛自动核算提取试剂盒供应商