密度梯度离心法:密度梯度离心也用于核酸的分离和分析。双链DNA、单链DNA、RNA 和蛋白质具有不同的密度,因而可经密度梯度离心形式形成不同密度的纯样品区带, 该法适用于大量核酸样本的制备,其中氯化铯2溴化乙锭梯度平衡离心法被认为是纯化大量质粒DNA 的选择方法。氯化铯是核酸密度梯度离心的标准介质,梯度液中的溴化乙锭与核酸结合,离心后形成的核酸区带经紫外灯照射,产生荧光而被检测,用注射针头穿刺回收后,通过透析或乙醇沉淀除去氯化铯而获得纯化的核酸。密度梯度离心法:密度梯度离心也用于核酸的分离和分析。济南全血核算提取设备推荐
核酸分离与纯化的步骤：酶作用:主要是通过加入溶菌酶或蛋白酶(蛋白酶K、植物蛋白酶或链酶蛋白酶) 以使细胞破裂,核酸释放。蛋白酶还能降解与核酸结合的蛋白质,促进核酸的分离。其中溶菌酶能催化细菌细胞壁的蛋白多糖N-乙酰葡糖胺和N-乙酰胞壁酸残基间的β-(1 ,4) 键水解。蛋白酶K能催化水解多种多肽键,其在65 ℃及有EDTA、尿素(1～4mol/ L) 和去污剂(0. 5 %SDS 或 1 %Triton X-100) 存在时仍保留酶活性,这有利于提高对高分子量核酸的提取效率。在实际工作中,酶作用、机械作用、化学作用经常联合使用。具体选择哪种或哪几种方法可根据细胞类型、待分离的核酸类型及后续实验目的来确定。济南全血核算提取设备推荐采用何种核酸提取方法和核酸检测试剂盒是影响病毒检出率的重要因素。
电泳区分核酸大小：核酸会根据pH不同带有不同电荷，在电场中受力大小不同，因此跑的速度不同，琼脂糖凝胶电泳即根据这个原理对核酸进行区分。核酸分子在pH高于其等电点的溶液中带负电荷，在电场中向正极移动。由于核酸的戊糖-磷酸骨架在结构上具有重复性，长度相同的核酸链几乎具有等量的净电荷，因此它们能以同样的速率向正极方向移动。此外，含有琼脂糖的凝胶具有网状结构，物质分子通过时会受到阻力，大分子物质在涌动时受到的阻力大，因此在琼脂糖凝胶电泳中，带电颗粒的分离不仅取决于净电荷的性质和数量，而且还取决于分子大小，这就较大提高了分辨能力。在同样电场的强度下，核酸分子的迁移速度取决于核酸分子本身的大小和构型以及琼脂糖凝胶的浓度，简而言之，分子量较大的核酸迁移速度较慢，分子量较小的核酸迁移速度较快，这就是应用凝胶电泳技术分离核酸片段的基本原理。
该方法结合高盐沉淀，可以实现简单的操作，但纯度及得率的稳定性可能会比用PC抽提的差一些。高浓度蛋白质变性剂(如GIT、GuHCl等)的裂解方法，是抽提RNA的选择。总RNA的抽提，重要的是快速裂解细胞膜，至于与基因组DNA相连接的蛋白质的裂解以及基因组与蛋白质"缠"住的问题，因为都不会对以后的纯化产生大的影响，可以不考虑。高浓度蛋白质变性剂能快速破坏细胞膜，进而迅速压抑住细胞内的RNA酶，从而确保了RNA的完整性。除了极少量不适用该方法的样品–主要是植物，其它绝大部分样品的RNA的抽提，都可以以高浓度的蛋白质变性剂为基础的。该方法也可用于基因组DNA抽提，非常快速简单，但纯度不是很高。磁珠法利用核酸自动提取仪进行核酸提取。
核酸提取纯化原则和要求1.保证核酸一级结构的完整性2.排除其它分子的污染（如提取DNA时排除RNA的干扰）3.核酸样品中不应存在对酶有压抑作用的有机溶剂和高浓度的金属离子4.尽可能降低蛋白质、多糖和脂类等大分子物质核酸提取纯化方法酚/氯仿抽提法1956年发明，通过酚/氯仿处理细胞破碎液或者组织匀浆后，在水相中主要溶解以DNA为主的核酸成分，在有机相中主要是脂类物质，蛋白质位于两相之间。醇沉淀法乙醇能够消除核酸的水化层，使带负电荷的磷酸基团暴露出来，NA﹢等带正电荷离子能与磷酸基团结合，形成沉淀。磁珠法核酸提取过程中的常见误区：洗涤次数越多，提取效果越好。天津全血核算提取试剂盒供应商
样本裂解是核酸提取过程中很关键的一步。济南全血核算提取设备推荐
核酸提取磁珠使用过程中的几种常见误区：误区：磁珠使用的越多，提取效果越好有很多实验人员喜欢在提取效果不佳的时候，增加磁珠的用量，认为磁珠多加一点，就能吸上更多的核酸，不得不说这种想法是不可取的。磁珠的主要特点是既可以分散于液体中，也可以在外加磁场作用下以固态方式和液相分离，任何试剂体系，磁珠和液体的比例都应该是有一定阈值的，超过一定的比例，过多的磁珠将因为无法均匀分散于液体中，而丧失其分散的特性，也使得洗涤过程中无法充分增加核酸磁珠和液体接触的效率。而过量的磁珠也会吸附更多的杂质，对于除杂的效果影响非常大。甚至有些时候，过多的磁珠会吸附蛋白酶、溶菌酶等在液体体系中起主要作用的功能成分，导致整个试剂盒效率低下。有很多时候，在提取效果不佳的时候，减少磁珠使用量，反而是提升提取效果的较优途径。济南全血核算提取设备推荐
