核酸的分离纯化方法汇总：高盐沉淀法是通过加入各种蛋白酶，从而将蛋白杂质去除，将 DNA 分离出来。该方法有效的免除了试剂的污染，所提取的脱氧核糖核酸有着较大的产量和较高的纯度，但缺点是消解蛋白酶的过程费时较多。硅介质吸附是将 DNA 分子中的磷酸二酯骨架在离液盐作用下脱水后，使得磷酸基团暴露的同时与硅胶发生可逆性吸附。静电力和氢键在硅胶与核酸的吸附中起着关键作用。该方法在脱氧核糖核酸的链长上有一定限制，较小的 DNA段（<100 bp）不容易在介质上得到有效吸附。硅介质吸附纯化法可以通过离心以及真空加压的方法使裂解液穿过滤膜，可以有效的提取微量的 DNA。以上三种方法由于其过程繁琐、时间成本高，同时由于有害试剂的加入，对实验员个人操作能力有着比较严格的要求。这些都使得其不能做到对 DNA 的高纯度、高回报、自动化提取，尤其是针对大样本的提纯过程。以基因样本库的建立为例，其作业量较大、所需时间周期较长，项目经费预算较大。采用何种核酸提取方法和核酸检测试剂盒是影响病毒检出率的重要因素。青岛核酸提取报价
磁珠结合效率决定了有多少核酸可以吸附到磁珠上，即洗脱核酸的上限。影响结合效率的因素有磁珠的吸附能力以及结合缓冲液的结合能力。磁珠吸附能力：磁珠提取系列磁珠一般是硅羟基磁珠，磁珠吸附能力受到磁珠比表面积以及修饰基团的密度影响。一般选择修饰基团多，比表面积大的磁珠，一般磁珠粒径越小，比表面积越大。但也不是磁珠粒径越小越好，磁珠粒径小，吸附速度也会变慢，可根据实际样本情况自行选择。结合缓冲液一般用异丙醇或乙醇结合。通常可以通过提高醇的比例来增强结合能力，同时也要提高离液盐的浓度来促进核酸与磁珠的结合。上海全血核算提取试剂盒直销核酸提取仪需要注意的事项：远离带电电路。
离心柱技术是用于微量核酸分离纯化的较为简单的方法，属于硅吸附方法的一种，在原理上可分为三个部分：①利用裂解液促使细胞破碎，使细胞中的核酸释放出来。②把释放出来的核酸特异吸附在特定的硅载体上，这种载体只对核酸有较强的亲和力和吸附力，对其他生化成分如蛋白质、多糖、脂类则基本不吸附，因而离心时被甩出柱子。③把吸附在特异载体上的核酸用洗脱液洗脱下来，分离得到纯化的核酸。磁珠法：依据与硅胶膜离心柱相同的原理，运用纳米技术对超顺磁性纳米颗粒的表面进行改良和表面修饰后，制备成超顺磁性氧化硅纳米磁珠。该磁珠能在微观界面上与核酸分子特异性地识别和高效结合。
核酸提取方法的选择：本研究发现手工过柱提取的方法漏检率较低，而且敏感性比其他方法更高，但该方法耗时较长，尤其样本量大时，频繁的离心过柱使得时间成本很大增加，所以并不推荐用于大批量样本的筛查；而磁珠法由于能配合使用自动核酸提取仪，所以能有效节约时间和人工成本，非常适合对大批量样本的核酸提取，但本研究中所使用的两种磁珠提取方法，进口试剂的提取效果明显高于国产试剂，这提示国内的生产商要不断提高产品质量与技术含量，从而降低国内检测机构对国外试剂的依赖性。对于一步检测法来说，由于该法光光将10 μl的样本加入至反应体系中，降低了病毒在反应体系中的存在概率。由于该法漏检率高且敏感度较低，所以并不推荐使用。运用纳米技术对超顺磁性纳米颗粒的表面进行改良和表面修饰后，制备成超顺磁性氧化硅纳米磁珠。
磁珠法核酸提取，具有传统DNA提取方法无法比拟的优势，主要体现在：①能够实现自动化、大批量操作，目前已有96孔的核酸自动提取仪，用一个样品的提取时间即可实现对96个样品的处理，符合生物学高通量的操作要求，使得传染性疾病爆发时能够进行快速及时的应对，这一特点使得传统方法望尘莫及；②操作简单、用时短，整个提取流程只有四步，大多可以在36-40分钟内完成；③安全无毒，不使用传统方法中的苯、氯仿等有毒试剂，对实验操作人员的伤害减少到较少，完全符合现代环保理念；④磁珠与核酸的特异性结合使得提取的核酸纯度高、浓度大。磁珠法核酸提取过程中的常见误区：洗涤次数越多，提取效果越好。上海自动核酸提取推荐
用氧化锆珠纯化核酸是另一种类型的磁珠纯化方法。青岛核酸提取报价
核酸提取磁珠使用过程中的几种常见误区：误区：样本取用的越多，提取效果越好在样本不够新鲜或者核酸含量本身就很少的情况下，往往核酸提取效果不好，很多实验人员就会采用多取样本的方式增加核酸提取量。但简单地增加样本取样量，有时会引入过多的杂质，超出裂解液裂解能力，也会使提取效率降低，所以并不推荐通过简单的增加样本取样量的方式来达到增加提取量的目的。如果确实是由于样本量不足而引起的提取量过低，建议在前处理先经过富集或者浓缩步骤再开始提取。或者增加裂解的完全性，使更多的核酸暴露出来也是一种解决方法。青岛核酸提取报价
