生物指示剂是一种含有特定微生物（如芽孢）的标准化产品，用于验证灭菌过程的效力，其原理是通过监测灭菌后微生物的存活情况，评估灭菌设备或工艺是否达到无菌保证水平。生物指示剂的生产和使用需符合以下国际及国内标准：（1）ISO11138系列：规定生物指示剂的菌种选择、芽孢含量、抗力性能等要求。（2）GB18281（中国标准）：对应ISO11138，明确湿热、干热、环氧乙烷等灭菌方式对应的生物指示剂技术规范。（3）GMP/GLP：要求制药企业和实验室使用标准化生物指示剂，确保灭菌验证的可追溯性和数据可靠性。（4）USP/EP/JP：各国药典对生物指示剂的保存条件、培养方法和结果判定提出具体要求。通过合理选择生物指示剂并严格遵循操作规范，可确保灭菌工艺的科学性和可靠性，满足法规要求并保障产品无菌性。泰林生物供应的生物指示剂满足法规标准要求，适用于解决不同灭菌场景的验证。 泰林生物指示剂（BI）采用高纯度芽孢，确保灭菌验证的准确性。上海无菌隔离器生物指示剂
环氧乙烷灭菌生物指示剂的芽孢计数方法。（1）芽孢洗脱。在生物安全柜中，取4片（支）生物指示剂打开，取出载体，分别放置于含有3-4颗玻璃珠（直径6mm）的无菌试管中，向无菌试管中加入3mL的含，置于涡旋混匀仪上充分振荡，将试管中载体打散成纤维装后，再中加入7mL含，震荡30s，制成均一的菌悬液，将该试管记为10-1。（2）热激活。将水浴锅加热至80℃-85℃，取上述试管，放置于水浴锅中热激活10min，热激完成后，立即将芽孢悬液转移至0-4℃的冰水浴中冷却至室温。（3）梯度稀释。将该试管转移至生物安全柜中，于旋涡混匀仪上旋涡30s，用移液枪吸取1mL芽孢悬液，加入到另一根含有9mL含，记为10-2，按照该方法依次稀释至10-3、10-4（稀释级别按制造商提供的芽孢数量而定）。（4）制备计数平皿。取芽孢数在30cfu/mL-300cfu/mL的稀释级别的试管（10-4）震荡30s，每支稀释管平行制备2个平皿，每皿加1mL菌悬液，注入15mL-20mL温度不超过45℃融化的胰酪大豆胨琼脂培养基（TSA）。等待琼脂凝固后，倒置于30℃-35℃培养箱中培养48h-72h后计数。 上海无菌隔离器生物指示剂假阳性率是生物指示剂性能的关键指标，需提高操作规范性，严格挑选产品，设置准确的环境控制条件来降低。
目前医疗器械常采用环氧乙烷（EO）来灭菌。环氧乙烷不损害灭菌的物品且穿透力很强，故多数不宜用一般方法灭菌的物品均可用环氧乙烷消毒和灭菌。例如，电子仪器、光学仪器、医疗器械、皮毛、棉、化纤、塑料制品、内镜、透析器和一次性使用的诊疗用品等。环氧乙烷是目前主要的低温灭菌方法之一。环氧乙烷灭菌生物指示剂是专门用于环氧乙烷灭菌器的验证及灭菌效果的监控的产品。美国药典第21版规范了多种灭菌因子的生物指示剂，其中就包括了用于环氧乙烷灭菌效果监测的枯草杆菌黑色变种芽胞ATCC9372株，我国原卫生部2017年版《消毒技术规范》中也作了明确规定。泰林生物提供片式和自含式两种环氧乙烷灭菌生物指示剂，严选萎缩芽孢杆菌ATCC9372，48h可以快速获得验证结果。
生物指示剂的实验室管理。生物指示剂（BI）作为一种特殊的物料，为了安全、合理地使用，一般应对生物指示剂进行控制管理。购买的生物指示剂应附有相应的质量报告，内容包括微生物种类、含量、D值、有效期等。泰林生物指示剂符合各项标准法规要求，使用的芽孢可以追溯至专业菌种保藏中心，检验报告包含芽孢浓度，D值等相关数据。实验室在使用前要对BI进行质量复核，进行微生物数量的确认，进行登记并按说明存放。进行微生物数量确认时，将原BI的所有含有微生物的部分转移到生理盐水中，稀释后进行计数，与质量报告中的数量进行比较。常用的生物指示剂以纸条、不锈钢片等作为载体。典型的微生物数量复核报告包含以下内容：NI含菌确认、生产商、菌名、批号、标示含菌量、D值、效期、稀释过程、稀释倍数、计数结果、每个BI含菌量、是否合格等。可用将BI的产品质量报告或其复印件与上述文件一起存放。检验合格的BI要经过批准和发放后才可使用。领用时要登记领用人、日期、数量等。 泰林建议企业可以建立假阳性事件追溯系统，持续改进灭菌流程，降低假阳性率。
泰林生物指示剂使用中常见问题及解决方案如下：（1）培养后培养基颜色变化不明显时，可能因灭菌彻底（真阴性）或培养基失效（如蒸发过多、储存不当），需同步培养未灭菌的阳性对照（应变黄）以确认培养基有效性；（2）若培养后变浑浊但未变黄，多为杂菌污染（操作不当）或培养液成分不稳定，应重复实验并严格执行无菌操作；（3）自含式生物指示剂按压后无液体释放，可能是产品损坏或设计缺陷，需更换新批次产品并联系供应商处理。这些措施可有效提升灭菌验证的准确性与可靠性。 生物培养总遇假阴性？耐热芽孢菌种稳定性提升80%。上海无菌隔离器生物指示剂
湿热灭菌参数达标≠成功！泰林生物验证才是关键保障。上海无菌隔离器生物指示剂
湿热灭菌生物指示剂的选型中的常见问题。（1）问题：某灭菌程序的灭菌条件为121℃，12min，能否选择FBio≥12min的生物指示剂？回答：能否选择FBio≥12min的生物指示剂，需知晓该灭菌程序的FPhy值，即使是相同的灭菌参数，不同设备的FPhy的也可能存在较大差异，如脉动真空灭菌器和水浴灭菌器。建议根据《欧洲药典》的要求，选择物理杀灭时间FPhy将指示剂杀灭到10-1～10-3。（2）问题：灭菌程序1参数为：121℃，8min，FPhy值为13min，选择生物指示剂的D值为，芽孢数量为×106cfu/支，可以将指示剂完全杀灭。灭菌程序2参数为：121℃，10min，FPhy值=15min，能否使用同一批生物指示剂？回答：本批生物指示剂的FBio经计算为，推荐应用于FPhy值在。灭菌程序FPhy为13min经实验证实可杀灭该批次生物指示剂；灭菌程序2的参数为121℃10min的杀灭程序符合将指示剂杀灭到10-1～10-3的要求，可以共同使用该批次生物指示剂。 上海无菌隔离器生物指示剂
浙江泰林生物技术股份有限公司(泰林生物:300813)成立于2002年，是一家聚焦于生命科学系统解决方案相关产业的企业集团。公司深耕行业三十余年，形成了覆盖生物安全、制药工程、医学工程等领域的多元化业务布局，为生命科学研究和产业化提供一站式系列成套装备、精密仪器、配套耗材等产品与服务，累计服务国内外客户超5,000家，业务覆盖40余个国家和地区。泰林生物以“服务人类健康，造福天下苍生”为使命，注重技术创新与标准化建设，主导或参与20余项国家标准及行业规范的制定，并多次获得行业认可，以创新能力和产品质量铸就企业核心竞争力，取得客户的信赖。
