Co-IP（免疫共沉淀）和ChIP（染色质免疫沉淀）研究对象和应用方面的区别。研究对象：Co-IP主要研究的是蛋白质与蛋白质之间的相互作用，而ChIP则主要用于研究DNA（启动子）与蛋白质（如转录因子等）之间的相互作用。应用方面：Co-IP常用于验证两种蛋白质是否在体内存在相互作用，是确定蛋白质复合物组成的有效手段。而ChIP则更常用于研究转录因子与DNA的结合情况，揭示转录调控的机制，也是确定与特定蛋白结合的基因组区域或确定与特定基因组区域结合的蛋白质的一种很好的方法。总的来说，Co-IP和ChIP各有其独特的优点和应用价值，选择哪种方法取决于研究的具体问题和目标。IP-Mass实验流程：样品制备、免疫沉淀、洗脱、蛋白酶消化、质谱分析、数据分析，鉴定互作蛋白！四川免疫沉淀检测CoIP-WB
CoIP-Mass是一种检测细胞内蛋白互作组的套餐技术。该技术通过联合免疫共沉淀技术和质谱检测技术，对目的蛋白在特定细胞/组织内的互作蛋白，进行系统的检测和分析。该技术适用于目的蛋白在特定细胞/组织中的蛋白互作组数据检测，或用于不同遗传背景/实验条件下的互作组差异研究。因此，该技术是研究细胞内蛋白互作调控网络的常规前置技术。CoIP-WB是一种检测细胞内蛋白互作的验证技术。该技术通过联合免疫共沉淀技术和WesternBlot蛋白检测技术，对目的蛋白在特定细胞/组织内的互作关系进行探究，明确蛋白直接的相互作用关系。该技术适用于目的蛋白在特定细胞/组织中的蛋白互作检测验证，或用于不同遗传背景/实验条件下的互作差异研究。因此，该技术是研究细胞内蛋白互作调控网络的常规检测技术。
CoIP-Mass互作组验证，即在互作组分析筛选的基础上，进一步利用CoIP-WB技术对感兴趣分子进行靶向检测，更加精细，也是互作组验证的必由之路。验证成功上岸的基础是理想的互作组数据库和丰富的分析经验，方能事半功倍。广州基云生物，在IP互作组检测和关键机制分子筛选验证领域，具有丰富的经验，您的互作机制研究。 四川免疫沉淀检测CoIP-WB免疫共沉淀法证实蛋白互作，基于抗体专一性，揭示生理性相互作用。
免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation，Co-IP）是一种经典的用于研究蛋白质相互作用的方法，它基于抗体和抗原之间的专一性作用。该技术主要用于确定两种蛋白质在完整细胞内的生理性相互作用。基本原理：当细胞在非变性条件下被裂解时，细胞内蛋白质-蛋白质间的相互作用被保留下来。通过利用预先固化在agarose beads上的蛋白质A的抗体来免疫沉淀A蛋白，与A蛋白在体内结合的蛋白质B也能一起沉淀下来。随后，通过蛋白变性分离，可以对B蛋白进行检测，从而证明两者之间的相互作用。
Co-IP（免疫共沉淀）和ChIP（染色质免疫沉淀）是两种常用于研究蛋白质与DNA或蛋白质与蛋白质相互作用的实验方法。实验原理方面的区别：Co-IP利用抗体与抗原之间的特异性结合，将目标蛋白及其与之相互作用的蛋白一起拉下来，进而研究它们之间的相互作用。而ChIP则是在活细胞状态下固定蛋白质-DNA复合物，并通过超声或酶处理将其随机切断为一定长度范围内的染色质小片段，然后通过抗原抗体的特异性识别反应沉淀此复合体，特异性地富集目的蛋白结合的DNA片段。Co-IP研究蛋白间互作，ChIP研究蛋白与DNA互作，实验原理各具特色！
免疫共沉淀与免疫沉淀技术所使用的原理与方法大致相似，所不同的是，在免疫共沉淀中，对靶蛋白的结合与沉淀由另一个与之发生相互作用的蛋白替代。在免疫共沉淀或免疫沉淀的基础上，通过进一步与其它技术的结合，如聚丙烯酰胺凝胶电泳，还可进一步对靶蛋白的的分子量等特性进行鉴定。
免疫沉淀（Immunoprecipitation，IP）：利用抗原抗体特异性反应，对某个特定蛋白纯化富集的方法，主要过程包括捕获和固定。(2)免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation，CoIP）：CoIP是在IP实验的基础上进行的扩展，主要用于蛋白之间的互作研究，常被用于鉴定特定蛋白复合物的中已知或未知的蛋白组分。其原理是基于抗体与抗原（靶蛋白）之间的特异性结合，此时如果样品溶液中存在能与靶蛋白相互作用的目的蛋白，会一同被拉下来，随后利用SDS-PAGE，WesternBlot等方法对得到的目标蛋白进行分析，进而证明两者间的相互作用。
IP-Mass技术结合免疫沉淀与质谱分析，研究蛋白互作与差异分析，但需注意其局限性与验证！湖南互作机制CoIP-Mass
免疫共沉淀实验需注意样品准备、抗体选择、裂解条件、共沉淀验证及实验重复性。四川免疫沉淀检测CoIP-WB
CoIP实验细胞的收集及裂解方法：
收集2E7个细胞样品，加入PBS洗涤细胞，离心后弃上清收集细胞沉淀。
准备500μl预冷的CellLysisBuffer,分别加入5μlProteaseInhibitor、5μlPMSF，混匀后加进细胞沉淀中吹打均匀，冰上孵育30min，期间涡旋混匀几次。
4℃,12000rpm离心10min，取上清，进行蛋白浓度测定及后续实验。
CoIP实验免疫复合物的制备：
在离心管中，将每个样品的细胞裂解液与2-10μg免疫沉淀抗体结合。每个免疫沉淀反应推荐的总蛋白量为500-1000μg，由PierceBCAProteinAssay蛋白浓度检测试剂盒测定。
用免疫沉淀裂解/漂洗缓冲液将抗体/裂解液稀释至500μL。
在室温下孵育1-2h，或4℃过夜，以形成免疫复合物。 四川免疫沉淀检测CoIP-WB
