CoIP-Mass和CoIP-WB优劣势：优势：高通量获得目的蛋白的专属蛋白互作库。劣势：CoIP的蛋白库鱼龙混杂，包含目的蛋白的直接/间接互作蛋白，非特异结合，残留蛋白。常规理想IP-Mass项目可鉴定到1000-2000个蛋白，其中绝大部分是非特异性结合及清洗残留的背景蛋白，导致CoIP-Mass假阳性高，CoIP-WB验证成功率低，导致研发进展反复跌宕，时间和经费成本占用较大，严重影响士气。其次，项目受限于蛋白表达量和IP抗体有效性，达到理想状态的CoIP-Mass较难，同时分析门槛较高。因此，该项目成功实施，比较依赖成熟和有分析经验的团队。建议整包交给专业的服务商开展检测。免疫共沉淀实验需注意样品准备、抗体选择、裂解条件、共沉淀验证及实验重复性。上海免疫沉淀检测CoIP Western Blot检测
免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation，Co-IP）是一种经典的生物学技术，主要用于研究蛋白质之间的相互作用。它以其独特的优势在蛋白质组学、生物化学和细胞生物学等领域中得到了大范围应用。Co-IP的主要优点包括。直接性：Co-IP能够直接检测蛋白质之间的相互作用，从而提供关于蛋白质功能和调控机制的直接证据。特异性：通过使用特异性抗体，Co-IP能够精确地捕获目标蛋白及其相互作用伙伴，减少非特异性干扰。灵敏度：Co-IP能够检测到低丰度的蛋白质相互作用，这对于研究微弱或瞬时的蛋白互作具有重要意义。适用性广：该技术适用于多种样本类型，包括细胞裂解液、组织提取物和纯化后的蛋白质复合物。兼容性强：Co-IP技术可以与其他技术相结合，如质谱分析，从而提供更详尽的互作网络信息。综上所述，Co-IP技术的优点在于其直接性、特异性、灵敏度、大范围的适用性和与其他技术的兼容性，这些优点使其成为研究蛋白质相互作用的有力工具。蛋白蛋白互作检测CoIP Western Blot检测IP-WB技术缺点：抗体特异性要求高，低丰度蛋白检测难，操作复杂，结果解读难，但可通过优化减少影响！
COIP技术优点如下：
相互作用的蛋白质都是经翻译后修饰的，处于天然状态；
蛋白的相互作用是在自然状态下进行的，可以避免人为的影响；
可以分离得到天然状态的相互作用蛋白复合物。
然而该技术也存在缺点，具体如下：
可能检测不到低亲和力和瞬间的蛋白质－蛋白质相互作用；
两蛋白质的结合可能不是直接结合，而可能有第三者在中间起桥梁作用；
须在实验前预测目的蛋白是什么，以选择后面检测的抗体，所以，若预测不正确，实验就得不到结果，方法本身具有冒险性。
Co-IP（免疫共沉淀）实验操作的要点。1.细胞裂解：确保采用温和的裂解条件，以保持细胞内存在的蛋白间相互作用。使用非变性裂解液进行裂解和洗涤。2.抗体固定：选择经过验证的抗体，以减少假阳性结果。注意抗体与缓冲液的比例，避免抗体稀释过度或过多。3.抗体结合：将抗体与样品混合，确保抗体与目标蛋白充分结合。4.磁珠或琼脂糖添加：将抗体固定的磁珠或琼脂糖加入混合物中，使其与抗体-蛋白复合物结合。5.沉淀：通过磁珠或琼脂糖的沉降，分离出蛋白复合物。6.洗脱：使用洗脱缓冲液将蛋白质复合物从磁珠或琼脂糖上洗脱下来。7.增加洗脱之前的洗涤次数或在免疫共沉淀缓冲液中加入Triton X-100，以降低非特异性结合。遵循这些操作要点，可以确保Co-IP实验的准确性和可靠性，从而得到准确的蛋白质相互作用结果。新手如何入门CoIP实验技术。
IP-WB（免疫沉淀-Western Blot）实验流程主要包括以下步骤：样品制备：收集细胞或组织样品，进行适当的裂解处理，以释放细胞内的蛋白质。免疫沉淀：将特异性抗体与目标蛋白结合，形成抗原-抗体复合物。随后，将复合物与固相载体（如磁珠）结合，通过洗涤去除非特异性结合的杂质。电泳分离：将免疫沉淀得到的蛋白质复合物进行SDS-PAGE凝胶电泳，根据分子量大小将蛋白质分离成不同的条带。转膜：将凝胶上的蛋白质转移到固相膜上，以便进行后续的Western Blot检测。Western Blot检测：利用特异性抗体检测目标蛋白或其相互作用伙伴的存在。通过显色反应可视化目标蛋白，观察并记录结果。以上步骤完成后，可以对Western Blot结果进行分析，从而验证蛋白质之间的相互作用情况。Co-IP实验检测：制备样品、裂解细胞、免疫沉淀、WB检测！新疆免疫沉淀检测CoIP WB检测
Co-IP技术直接、特异、灵敏，适用性广，兼容性强，是研究蛋白互作的利器！上海免疫沉淀检测CoIP Western Blot检测
免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）是一种基于抗原与抗体特异性结合用于研究蛋白质与蛋白质相互作用的方法。常用于候选目标蛋白质之间是否有相互作用，也用于确定与已知蛋白质互作的其它未知蛋白质相互作用。基本原理：当细胞在非变性条件下被裂解时，完整细胞内存在的许多蛋白质－蛋白质间的相互作用被保留了下来。用蛋白质A的抗体免疫沉淀A，那么与A互作的蛋白质也能沉淀下来，此时获得与A互作的蛋白复合物。若已知AB互作，则用蛋白复合物进行WB实验检测B；若鉴定蛋白复合物中有哪些蛋白，则对复合物进行质谱检测。免疫共沉淀实验流程：蛋白质样本收集-A抗体沉淀目的蛋白A-SDS-PAGE分离-WB检测B蛋白或者质谱鉴定互作蛋白。上海免疫沉淀检测CoIP Western Blot检测
