HE染色脱蜡不净的原因及验证方法:1)二甲苯使用过久,含蜡成分太高或脱蜡效果差:可更换二甲苯验证。2)切片经烤片,冷却后放入二甲苯脱蜡或室温太低;延长拖拉时间或用热的切片脱蜡验证。3)脱蜡时间太短或振荡太少,幅度太小;可延长脱蜡时间或以多振荡来验证。4)洗涤二甲苯用的乙醇使用时间过久,导致乙醇中二甲苯含量过高,二甲苯残留在切片上(由于二甲苯与水不相溶,切片上有二甲苯的地方,苏木精就没有办法渗透进去,在切片染色完成后留下了点状的不着**域):更换各道乙醇验证。5)二甲苯、乙醇质量不佳(偶有试剂瓶内装的试剂与试剂名不相符):换批号验证。6)更换脱蜡液体时试剂拿错:需重新配置验证。7)更换脱蜡液体时试剂次序放错:需重新配置验证。8)烤片时间短,切片上水分没有烤干,也会导致着色不匀,出现点状发白区域。HE染色,南京英瀚斯,专业的实验外包公司。结果客观的HE染色分析
HE染色:在组织病理学中,苏木素-伊红染色是一种日常使用比较普遍的常规染色方法。常规苏木素染色的对比染色是用伊红,也有采用焰红,因为焰红比伊红色泽更鲜明,还有采用橘黄G,比布里希猩红,波尔多红等作为对比染色。伊红是比较常用的胞质染料,本身溶于醇而不溶于水,为砖红色粉末状或酱红色结晶。配方:伊红Y(水溶)0.5-1g,蒸馏水99ml。如果取用伊红Y(醇溶性)应当溶于99ml 75%或95%的乙醇中。如果在伊红液中加入0.5ml冰醋酸,可以加速其染色过程,使得胞质的色泽更加艳丽。结果是细胞核呈蓝色,胞质、肌肉、结缔组织、红细胞和嗜伊红颗粒呈不同程度的红色。钙盐和各种微生物也可染成蓝色或紫蓝色。新疆病理HE染色多少钱HE染色中固定液如何配置。
HE染色攻略:HE染色又称为苏木精-伊红染色,染色后组织或细胞可以借助普通光学显微镜观察与鉴别细胞凋亡与细胞坏死的一种染色方法。这种方法适用范围***,对组织细胞的各种成分都可着色,便于***观察组织构造,而且适用于各种固定液固定的材料,染色后不易褪色可长期保存。经过HE染色,细胞核被苏木素染成蓝紫色,细胞质被伊红染色呈粉红色。可以观察细胞结构、组织层次等等。首先切片组织是否完整,组织有无损伤;然后看切片有无刀痕;***细胞核是否清晰可见,胞核与包浆要对比鲜明。
HE染色原理:易于被碱性或酸性染料着色的性质称为嗜碱性(basophilia)和嗜酸性(acidophilia);而对碱性染料和酸性染料亲和力都比较弱的现象称为中性(neutrophilia)。构成组织内蛋白质的氨基酸的种类很多,它们有不同的等电点。在普通染色法中,染色液的酸碱度为pH6左右,细胞内的酸性物质如细胞核的染色质、腺细胞和神经细胞内的粗面内质网及透明软骨基质等均被碱性染料染色,这些物质称为嗜碱性。而细胞质中的其它蛋白质如红细胞中的血红蛋白、嗜酸粒细胞的颗粒及胶原纤维和肌纤维等被酸性染料染色,这些物质称为嗜酸型。如果改变染色液的酸碱度,pH值升高时,则原来被酸性染料染色的物质可变为嗜碱性;pH值降低时,原来被碱性染料染色的物质则可变为嗜酸性。所以说染色液的pH值可以影响染色的反应。脱氧核糖核酸(DNA)两条链上的磷酸基向外,带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键结合而被染色。苏木精在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。比较基础的病理染色HE染色。
HE染色常见问题:切片染色不均匀,有片状的弱着**存在答:(1)取材时组织太厚,固定过久,导致深部组织固定不佳,而表浅组织过度固定,而透明、脱水、浸蜡均是如此,这样在后期染色时就会出现染色不均匀。应该将厚的组织剖开固定。(2)制片过程有问题,切片厚薄不一,或者有刀痕,或组织与玻片间存在气泡。同一张切片厚薄不一,一般都是在制片时,刀片固定不佳或刀片钝或刀片与组织角度不佳(一般比较好角度为5°)(3)脱蜡前未烘烤,脱蜡时间过短或脱蜡液使用过久,导致脱蜡不彻底。(4)染色液过少,着色不均匀;或染色时部分组织干涸而另一部分湿润,这样会导致组织吸附染料的能力不一。(5)分化不当。南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。HE染色切片知识以及如何做出漂亮的切片。江苏值得信赖的HE染色报告
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HE染色细胞核灰蓝原因:(1)组织处理温度过高、过热,在石蜡停留的时间过长;(2)固定时间太短,接下来就直接在高浓度的乙醇中行脱水处理。对策:理论上来说,加热处理*在组织浸蜡步骤才使用,组织不能在热的蜡液中停留过长时间。如果由于某些原因不能进行下步包埋处理,完成浸蜡处理后的组织,可将组织连同塑料包埋盒一并放置在室温空气中,冷却凝固,以备包埋。待需要包埋时再重新加温直至石蜡融化即可。组织在处理前必须确保固定良好,脱水比较好能从低浓度的乙醇开始。结果客观的HE染色分析