Tris-HCl缓冲液缺点:1、温度效应大,如4℃时pH=8.4,37℃时pH=7.42、pH值受溶液浓度影响较大,稀释十倍,pH值的变化大于0.1;3、对某些pH电极发生一定的干扰作用,所以要使用与Tris溶液具有兼容性的电极。4、易吸收空气中的CO2,所以配制的缓冲液要盖严密封。HEPES缓冲液HEPES是一种非离子两性缓冲液,其在pH7.2~7.4范围内具有较好的缓冲能力,常用在生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒及PCR诊断试剂盒里。HEPES缓冲液优点:pKa值介于6.0和8.0之间;在水中具有高溶解度;具有膜不透性,不易穿透生物膜;对生化反应影响有限,可耐化学和酶解作用,且不与金属离子生成复合物或沉淀;有极低的可见光和紫外光吸收;离子浓度、溶液组成和温度对解离的影响小;HEPES缓冲液缺点:如果将HEPES水溶液暴露于环境光下三小时,会产生细胞毒性的H2O2;HEPES水溶液必须远离光线以免影响实验结果;而配置成溶剂后,要在4℃下保存,建议在短期内使用效果更佳;HEPES粉末放置的时候一般放于干燥的室内,不能直接长时间照射阳光。艾伟拓长期稳定供应注射级海藻糖、蔗糖、TRIS/TRIS-HCl、HEPES等生物保护剂与缓冲盐!江西辅料HEPES使用注意事项
各种配制方法总结如下:一、500ml1MHEPES,pH=7.0Stocksolution的配制119.15gHEPES溶解在400ml蒸馏水中,加0.5~1M的NaOH水溶液调节至少所需pH(HEPES的有效pH范围是6.8~8.2),然后用蒸馏水定容至500ml,于4摄氏度保存。二、加少量盐的HEPESBuffer配方(500ml)HEPES6.5g、NaCl8.0g、Na2HPO4.7H2O0.198g、用0.5MNaOH水溶液调节pH值,***定容。三、2×HEPES缓冲盐溶液的配制将1.6gNaCl、0.074gKCl、0.027gNa2HPO4.2H2O、0.2g葡聚糖(glucanordextran)和1gHEPES溶解在90ml的蒸馏水,用0.5MNaOH调节至所需pH值,再用蒸馏水定容至100ml即可。北京大批量HEPES市场价格GMP条件下生产AVT稳定供货注射级HEPES!
缓冲溶液是许多生化反应、生产、实验过程中的重要溶液,对稳定溶液的酸碱度有重要的影响。本文以**常见的几种缓冲体系——磷酸盐缓冲溶液、硼酸盐缓冲溶液、三羟甲基氨基甲烷(简称Tris)-HCl缓冲溶液、羟乙基哌嗪乙磺酸(供注射用)(简称HEPES)缓冲溶液为例,介绍缓冲溶液的组成、缓冲原理及其在生物化学方面的应用。HEPES缓冲溶液具有对细胞无毒性、不易穿过生物膜、不参与细胞内生化过程等特点,所以在生化实验中具有***的应用,如可用于开放式细胞生长、细胞的长期观察、RNA或DNA提取试剂盒中。其次,相关研究表明以HEPES溶液做缓冲液有利于多肽在金纳米粒子表面的偶联反应。另外,HEPES缓冲溶液对镁生物降解影响的相关实验表明,HEPES能提高镁的生物降解性以及抑制镁不溶盐层的形成。
关于HEPES缓冲溶液的配制,不同的文献资料有不同的说法。根据用途,一种是单纯的HEPES+NaOH,另一种是HEPES+盐。各种配制方法总结如下:一、500ml1MHEPES,pH=7.0Stocksolution的配制119.15gHEPES溶解在400ml蒸馏水中,加0.5~1M的NaOH水溶液调节至少所需pH(HEPES的有效pH范围是6.8~8.2),然后用蒸馏水定容至500ml,于4摄氏度保存。二、加少量盐的HEPESBuffer配方(500ml)HEPES6.5g、NaCl8.0g、Na2HPO4.7H2O0.198g、用0.5MNaOH水溶液调节pH值,***定容。三、2×HEPES缓冲盐溶液的配制将1.6gNaCl、0.074gKCl、0.027gNa2HPO4.2H2O、0.2g葡聚糖(glucanordextran)和1gHEPES溶解在90ml的蒸馏水,用0.5MNaOH调节至所需pH值,再用蒸馏水定容至100ml即可。注射级,低内***、国产化稳定供应、高性价比注射级HEPES找AVT!
外源基因导入真核细胞的方法有很多种,如磷酸钙转染法、DEAE-葡聚糖转染法、脂质体法、电穿孔法、显微注射法等。2×HEPES缓冲盐溶液主要用于磷酸钙转染,其主要成分为HEPES,HEPES是一种非离子两性缓冲剂,能有效控制pH在范围,尤其在pH具有较好的缓冲能力,终浓度一般为mmol/L,培养液内含mmol/LHEPES 即可达到较好的缓冲能力。Leagene HEPES缓冲盐溶液(2×HeBS)是一种常用的细胞转染溶液,主要由HEPES、氯化钠、磷酸盐等组成,其**适pH值为,经过滤除菌处理。影响磷酸钙转染效率的因素主要有沉淀中DNA含量、DNA 在细胞上停留的时间、休克时间。Leagene 2xHeBS要求DNA浓度在为宜,Hela、BALB等细胞沉淀放置,CHO、DUKX、BⅡ等细胞可以通过甘油、DMSO进行热休克处理以提高转染效率。国内艾伟拓稳定供货HEPES!黑龙江药用辅料HEPES实验室采购
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制剂研发、医学检测,药物生产与保存以及分析实验等,几乎都需要缓冲溶液的参与才能正常进行,同时所需要的缓冲液又各有不同。因此对于制剂研发人员来说,只有掌握缓冲溶液的相关知识及用途,才能正确地根据实际需要选择一定浓度和pH值的缓冲溶液来使用。在选择缓冲溶液时,既要考虑它的毒性、稳定性、有效的缓冲范围,还要考虑所选缓冲溶液是否与主体物质反应、对主体物质的干扰性以及是否与主药发生配伍禁忌等。经过上述分析,在四种常见缓冲体系中,Tris-HCl缓冲溶液和HEPES缓冲液是较为理想的生物缓冲剂,在抗体药物,mRNA疫苗,脂质体药物等生物制剂中均有所应用,但都有一定的限制,制剂开发时需进行充分考量及比对。江西辅料HEPES使用注意事项
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