如果目标蛋白的种属不包括在已检测的种属中,您可以通过蛋白数据库快速检查特异性蛋白序列。
抗体种属来源
一抗的种属来源在选择二抗时有很大的作用。二抗应尽量与您的样本物种相隔较远。
在说明书或供应商网站上查询已验证的数据:
1、查看说明书或供应商网站上的验证数据并检查数据质量,及验证实验方法。
2、查看检测的样本为何种类型(细胞裂解液、组织匀浆=等)。
3、*使用纯化重组蛋白得到的结果可能无法作为细胞或组织样本的比较好参考! 上海益启生物抗体订购方便。徐汇区MYC抗体抗体报价
IHC 是从根词immuno"(与在操作中所用的抗体有关)和"histo"(意思是"组织")而得其名称。与之不同,免疫细胞化学(ICC)的根词是"cyto"(意思是"细胞"),是以培养或分离的细胞代替组织进行的。IHC和ICC广泛应用于基础研究,目的是了解生物标记物的分布和定位以及在生物组织或细胞中差异表达的蛋白。
在IHC/ICC中的主要步骤如下∶·样本制备·抗原修复· 抗体染色·抗体检测
成功的IHC实验取决于高质量抗体选择和合遇的实验浓度。每一种抗体都要根据实际的实验情况进行优化。即使是同一反应体系,针对不同的抗体适合的稀释浓度也是不同的。实验者可以以说明书上推荐的稀释倍数作为参考。
SNAPi.d.⑧2.0IHC加速器带来的主要改进·直观的设计,将封闭、洗涤、抗体孵育及标记等步骤结合起来· 不需要使用石蜡笔·抗体可以收集后继续使用
·切片操作时间大幅减少,洗涤步骤耗时大幅减少,可同时操作多达24涨切片
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流式细鹿分析仪如Guava easyCyte" 8HT仪器采用单细胞的激光激发和荧光及折射光的后续检测,以提供多参数细胞分析。
检测方法
和其它免疫检测应用一样,有几种通过流式细胞术检测特异性细胞的抗体应用方法。主要有三种主要方法∶·直接检测法
直接检测法是指单独一个步骤的染色过程;它采用的荧光分子直标的一抗与目标蛋白特异性结合。
当检测位于细胞表面的抗原时,不推荐进行经奥园定,因为这个过程可能使抗体无法接触目标抗原。因此,必须进行高效工作,以保持未固定细胞存活,直至完成数据获取。这些直标抗体的应用加快了染色过程,因为目标抗原的结合和检测荧光基团标记在同一个步骤中完成。
ChIlP检测用磁力架
我们拥有多种用于Magna ChIP检测的磁力架供您选择∶常规Magna GrlP磁力架,,加强型PureProteome磁力架和高通量ChIP的理想之选——***推出的Magna GrlPHT96磁力架。PureProteome 磁力架
微珠捕获效率高∶**度的梯形磁体可捕获 多达300微升磁珠
***效率高∶可移动磁体和独特的涡旋内表 面设计使微珠混合更加充分
操作性强∶符合人体工程学设计的磁力架可安全插放1.5mL和2mL反应管
Protein A/G beads 背景更低,富集倍数更高
Troubleshooting
问题 可能的原因 建议的处理步骤 买组蛋白抗体哪家专业?
模塞*器生产厂家说明书,校准Luminex仪器,至少每周一次或在温度变化3℃时校准。
一些Luminex仪器要求与试剂盒方案中所述不同的门)设置。使用仪器默认设置。
检查试剂盒说明书中正确的微珠区域或分析物选择。
含有机溶剂的样品,或如果样品为高粘性,应根据需要进行稀释或透析。PMimeLuminex*器4次,以除去气泡;如果有任何残留酒精或消毒液,用**或水洗涤4次
在所有解育步理中,保持微孔板和微珠混合物用果盖或铝培覆盖。加入适当的检测执体并继线t。 上海H3抗体哪家靠谱?闵行区CST抗体抗体商家
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通过改变参数(见第5.3节)和评估他们对梁色质回收率的影响来优化这些步骤。使用机械力,如杜恩斯匀浆器或坡璃珠改善细脆溶辉。优化裂解步要和避免起泡。 在甲醛中培养时间过长可能掩盖经ChIP抗体识别所需要的表位。如果您使用的是单克隆抗体,此问题可能更加严重。过度交联也可能导致超声处理时复合物难以形成。优化交联步骤∶甲醛的**终液度应为1%;您应确定***的交联时间,然后再继绩进行实验。在研究方案的后续步骤中,交联不足可能引起靶蛋白从DNA解离。
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