非特异性条带 抗体（一抗或二抗）浓度过高 降低抗体浓度。
SDS可能引起对固定蛋白条带的非特 转膜后，振荡洗涤
异性结合 在操作过程中不使用SDS。
条带扩散 抗体（一抗或二抗）浓度过高 降低抗体浓度。
在凝胶上载入过多蛋白 减少蛋白上样量。
黑色印迹，白色条带， 抗体（一抗或二抗）浓度过高 减少抗体浓度，特别是HRP偶联的二抗。
或信号快速减少
免疫沉淀
采用抗体-抗原沉淀(又叫免疫沉淀(IP))的方法将特异性蛋白从细胞或组织裂解液中分离出来。
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ChHPAb+trimethy-istione H3Lys917625）∶使用免gG 或AntrimethyHhistone H3Lys9抗体，与Magna ChIP 试剂盒17-610）一起将超声处理后的NH3T3 L1组胞染色质进行染色质免疫沉淀反应。对获取的trimethy-histone H3ILys9DNA精合片段进行qPCR确认，使用的引物为屋p16启动子附近序列。
染色质免疫共沉淀∶相关产品
磁珠
**与ChIP实验的A，G，或A/G蛋白Magna ChIP磁珠经过严格优化，用于ChIP实验中收集沉淀复合物，具有速度快，重复性好，效率高的优点。与常规琼脂糖微珠不同，在反应中，Magna ChIP 磁珠可在磁场作用下快速移动至反应器边缘，***降低免疫沉淀复合物的滞留时间和机械压力。 静安区Sigma抗体抗体哪家优惠正规科研抗体品牌零售代理商家。
对每种细胞类型或组织焚型单壮优化表解，使用l化试管或低吸附试管。确保所有试剂都是新鲜配制的，且没有污染物。增加洗涤次数。运行一次"无DNA"PCR反应，以确定您的样品是否被核酸污染。
使用PCR的**移液管;在设置PCR之前，使用紫外性照射移液管。采用**移液管，在三个不同的房间/区域进行ChIP、DNA纯化和PCR反应设置，或在遇风期内设置反应。 避免使用票装水或其它形式的预包装水。使用从含有紫外光源的Mll-QR系统中制造的水。使用防雾移液管吸头。
在将进行ChIP咳PCR实验的地点期近，不得打开含有扩增PCR产物约试幢。
确保您使用的抗体是在ChIP中给证过的抗体。关于ChIP抗体约完整选择过程，请参见默克官网表观遗传学。如果您正使用ChIP抗体，请增加抗体的解育时间。 一般1-10uq ChIP抗体是足够的。但是，所需抗体量可能取决于您的靶轮蛋白相对丰度和抗体与靶标的亲和力。 在交联前，单独准备一个平板，用于测定细胞数。重新评价每个反应的细您数。增加您的细晚数，特别是在尝试检测较任丰度的靶蛋白时。 WB抗体的报价具体是多少呢?
流式细鹿分析仪如Guava easyCyte" 8HT仪器采用单细胞的激光激发和荧光及折射光的后续检测，以提供多参数细胞分析。
检测方法
和其它免疫检测应用一样，有几种通过流式细胞术检测特异性细胞的抗体应用方法。主要有三种主要方法∶·直接检测法
直接检测法是指单独一个步骤的染色过程;它采用的荧光分子直标的一抗与目标蛋白特异性结合。
当检测位于细胞表面的抗原时，不推荐进行经奥园定，因为这个过程可能使抗体无法接触目标抗原。因此，必须进行高效工作，以保持未固定细胞存活，直至完成数据获取。这些直标抗体的应用加快了染色过程，因为目标抗原的结合和检测荧光基团标记在同一个步骤中完成。 Merck抗体上海授权代理商。标签抗体抗体
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利用多肽的不同物理特征，如分子量、电荷和形状，蛋白质复合物可用电泳法（即在凝胶基质上加样并通入电流）分离。以这种方式分离蛋白质的常规方法是SDS-PAGE（十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法）。通过“跑胶”，可以了解关于蛋白性质的大量信息；而通过把已
分离的蛋白样品从凝胶转移到固相载体膜上（印迹法）并采用特异性抗体进行检测，可以了解更多信息。在用Western blot检测蛋白时，运用高质量抗体对成功而言是至关重要的。 标签抗体抗体
