浓缩管基本参数
  • 产地
  • 美国
  • 品牌
  • Merck millipore
  • 型号
  • UFC901096
  • 是否定制
浓缩管企业商机

外泌体的精制磁珠法富集精制外泌体:300μg样品(相当于300μg总蛋白)用含有5μg anti-CD63抗体的溶液稀释,与protein A/G磁珠共孵育1hr,漂洗后用0.2M glycine洗脱。如果要先将抗体偶联在磁珠上(以避免抗体洗脱下来对外泌体的干扰),请参考默克磁珠操作说明书。(Protocol C - Antibody Crosslinking Using Bis(sulfosuccinimidyl) suberate (BS3))。推荐使用试剂目录号信息:cat# CBL553t 和cat# OP171以及LSKMAGAG02。

默克已经建立了基于“微滤+超滤”的外泌体制备操作标准,相较于需要昂贵的设备及繁琐操作的超速密度梯度离心,用实验室常见的工具解决外泌体制备的高大上问题,真是惠而不费,不亦乐乎? 对于不同的需求我们选择不同的 超滤浓缩管系列。长宁区默克2ml超滤浓缩管参数

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蛋白亲和纯化(无需换液和浓缩)

* 本操作受Amicon® Ultra-0.5 mL超滤管~1 mg蛋白的容量限制。体积较大而蛋白浓度较低的情况下也可以采用如上方法,但溶液体积和离心时间等需要略加优化。

3次低速离心,总耗时~75分钟(含60分钟孵育时间)

1. 在Amicon® Pro上样池中加入至多1000μL亲和纯化树脂(沉降的柱床体积)和至多9 mL漂洗缓冲液。1,000×g离心1 min平衡树脂。(柱床)树脂量≥ 500μL时采用2,000×g离心4 min。

2. 加入至多9 mL样品并与树脂吸打混匀。孵育1 h*,其间可温和搅动促进结合。 上海默克4ml超滤浓缩管代理价超滤浓缩管零售多少钱呢?

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浓度:当需要截留的样品浓度很低时,通量通常不受浓度影响。操作过

程中,随着溶质浓度的升高,增加的粘滞性和极化将导致通量降低。

温度:粗体,作为获得压力、浓度一样的词条通常增加操作时的温度可

以提高超滤效率。每增加 1℃蛋白扩散率增加 3-3.5%,同时溶液粘度降低。

实践中一般是以样品和设备能耐受的比较高温度来操作。

pH:改换溶液和 / 或 pH 常常改变分子结构,蛋白尤其如此。在蛋白的 pI

值蛋白会沉淀,产生堵塞和得率损失。

污垢:溶液中除了目的分子造成的浓差极化,还有其它小颗粒和分子会

在膜上富集和沉淀,逐渐堆积在膜孔上或膜孔结构中,形成结晶和沉淀。

近年来随着分离纯化技术的提高,关于外泌小体的研究成果颇丰;这进一步吸引了越来越多领域的课题将外泌体纳入研究对象。研究的前提是方便、高效、标准化地分离纯化外泌小体。经过近20年的探索,已经建立了超速离心法、沉淀法、色谱法、亲和纯化法等。在大量实践中大家逐渐认识到根据下游研究对样品的要求,以及起始样品的规模、数量,可以选择不同的外泌体制备策略。因不需要特殊的设备和试剂盒,对操作人员也没有特别的经验要求,超滤法后来居上,成为实验室中制备外泌体的通用方法。超滤浓缩管直销公司。

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Millipore超滤浓缩管设有反转离心回收设计使蛋白样品,特别是小体积样品回收,避免吸头吸取造成的样品丢失或操作错误;

其中0.5mL、2mL 和 70mL 超滤管设计为反转回收模式样品吸附损失小;

合理的死体积设计,避免样品离干而降低回收率;

能兼顾高回收率和操作的方便性及标准化,并满足下游各种应用的要求,使研究者处理样品时倍感轻松。

有效浓缩同时保证高的蛋白回收率

设计精巧、紧凑,一体化结构确保不会发生渗漏,即使是极为珍贵的样品也能非常放心地操作。






超滤浓缩管的系列有很多。松江区默克0.5ml超滤浓缩管批发

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Amicon® Ultra超滤管的膜材质为默克密理博特有的 Ultracel® 再生纤维素膜,生产工艺严格,截留分子量明确而精细,蛋白吸附损失基本上大概小。

如果要用超滤的方法分离两种蛋白,那么这两个蛋白的大小需要相差多少?

按照经验,建议两个蛋白的分子量要相差一个数量级(10倍)。

Amicon® Ultra与70%乙醇是兼容的,但是对灭菌处理的具体方法没有做相关的测试,所以无法提供更进一步的参考信息。

Amicon® Ultra都是采用热封设计,不可以用高压高温灭菌。

不保证超滤管不包含RNA酶,建议用0.1% DEPC在37度浸泡2小时,以完全灭活RNA酶;残留的DEPC可以用Milli-Q®超纯水洗涤除去。 长宁区默克2ml超滤浓缩管参数

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