这类填料具有更强的疏水性;大孔的聚合物填料对蛋白质等样品的分离非常有效。现在的聚合物填料的缺点是相对硅胶基质填料,色谱柱柱效较低。(3)其他无机填料其它HPLC的无机填料色谱柱也已经商品化。由于其特殊的性质,一般***于特殊的用途。如石墨化碳也用于正逐渐成为反相色谱填料。这种填料的分离不同与硅胶基质烷基键合相,石墨化碳的表面即是保留的基础,不再需其它的表面改性,该柱填料一般比烷基键合硅胶或多孔聚合物填料的保留能力更强,石墨化碳可用于分离某些几何导构体,又由于HPLC流动相中不会被溶解,这类柱可在任何PH与温度下使用。氧化铝也可用于HPLC,氧化铝微粒刚性强,可制成稳定的色谱柱柱床,其优点是可在PH高达12的流动相中使用。但由于氧化铝与碱性化合物作用也很强,应用范围受到一定的限制,所以未能广泛应用,新型氧化锆填料也可用于HPLC,商品化的*有聚合物涂层的多孔氧化锆微球色谱柱,应用PH范围1~14,温度可达100℃。由于氧化锆填料几年才开始研究,加之面临的实验难度,其重要用途与优势尚在进行中。二、怎样选择填料粒度目前,商品化的色谱料粒度从1um到超过30um均有销售,而目前分析分离主要用3um、5um和10um填料。上海高信化玻是德国merck专业代理商。山西上海默克代理商
1.化学性质:①乙腈为稳定的化合物,不易氧化或还原,但碳氮之间为叁键,易发生加成反应。例如:与卤化氢加成、与硫化氢加成、无机酸存在下与醇加成、与酸或酸酐加成、与羟胺加成。②在酸或碱存在下发生水解,生成酰胺,进一步水解生成酸。③还原生成乙胺。④与Grignard试剂反应,生成物经水解得到酮。⑤乙腈能与金属钠、醇钠或氨基钠发生反应。2.本品易燃,有毒。在空气中的范围为~16%(体积),工作场所乙腈比较高容许浓度为70mg/m3。在乙腈饱和的空气中,大鼠停留4小时以上不致死亡,但对小鼠15分钟即可致死。乙腈的经口LD50,对大鼠为,对小鼠为。吸入乙腈蒸气或经皮肤吸收后会引起中毒,呈现恶心、呕吐、呼吸困难、极度乏力和意识模糊,血中**物及硫**物浓度增高,并出现蛋白尿等症状。如乙腈溅及皮肤,应用大量水冲洗,溅及眼内应用清水冲洗15分钟以上。如吸入乙腈或**物蒸气中毒应立即将人移至新鲜空气处,请医生诊治。生产设备应密闭,防止跑、冒、滴、漏,操作人员应穿戴防护用品。湖北上海Merck默克色谱柱化学试剂只是指“化学分析和化学试验中为测定物质的组分或组成而使用的纯粹化学药品”。
正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica),以及其他具有极性官能团,如胺基团(NH2,APS)和氰基团(CN,CPS)的键合相填料。由于硅胶表面的硅羟基(SiOH)或其他团的极性较强,因此,分离的次序是依据样品中的各组份的极性大小,即极性强弱的组份较早被冲洗出色谱柱。正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低,如:正乙烷(Hexane),氯仿(Chloroform),二氯甲烷(MethyleneChloride)等。2、反相色谱反相色谱填料常是以硅胶为基础,表面键合有极性相对较弱的官能团的键合相。反相色谱所使用的流动相极性较强,通常为水,缓冲液与甲醇,已腈等混合物。样品流出色谱柱的顺序是极性较强组合较早被冲出,而极性弱的组份会在色谱柱上有更强的保留。常用的反相填料有C18(ODS)、C8(MOS)、C4(B)、C6H5(Phenyl)等。二、聚合物填料聚合物调料多为聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙酸酯等,其主要优点是在PH值为1~14均可使用。相对与硅胶基质的C18填料,这类填料具有更强的疏水性;大孔的聚合物填料对蛋白质等样品的分离非常有效。现在的聚合物填料的缺点是相对硅胶基质填料,色谱柱柱效较低。三、其他无机填料其它HPLC的无机填料色谱柱也已经商品化。由于其特殊的性质,一般***于特殊的用途。
具有优良的导电性、导热性及电磁屏蔽特性。更为难能可贵的是,多孔性碳材料以其结构的特点而具有很好的吸附性及选择性。正是碳材料的这些特性,使人们期待它在色谱领域中能有特殊的用途。2、贯流色谱填料贯流色谱是20世纪80年代末至90年代初发展起来的一种色谱分离新方法。在这种填料上,既有通常的微孔或大孔,例如50~150nm的微孔,又有贯穿整个颗粒的,孔径约600~800nm超大孔存在。这种贯穿的大孔,可以允许流动相直接进入填料颗粒的内部并贯穿而过。这样,就相当于极大地降低了填料颗粒的直径,即以贯穿孔将填料分割成了很多更细小的颗粒,在这种小颗粒上的微孔已经短到不对传质过程构成明显的阻力。因此,在这种贯流色谱填料上,传质阻力已经非常小。同时,贯穿孔内流动相的线速度正比于柱子中流动相的速度,即传质过程已由扩散传质变为对流传质。这就意味着,在一定范围内,及时提高流动相速度,也不会降低柱子的分离效率。由于填料上同时还存在有通常的多孔结构,其比表面积并未随贯穿孔的出现而大幅度降低。因此,在这种填料上的样品负载量也不随流速的增加而减少。再者,填料上600~800nm的贯穿孔,极大地增加了柱子的通透性,使得这种柱子即使工作于很高的流速下。使质量控制和过程效率更高。
组成缓冲溶液的两组分的比值不为1∶1时,缓冲作用减小,缓冲能力降低,当c(盐)/c(酸)为1∶1时△pH**小,缓冲能力大。不论对于酸或碱都有较大的缓冲作用。缓冲溶液的pH值可用下式计算:此时缓冲能力大。缓冲组分的比值离1∶1愈远,缓冲能力愈小,甚至不能起缓冲作用。对于任何缓冲体系,存在有效缓冲范围,这个范围大致在pKaφ(或pKbφ)两侧各一个pH单位之内。弱酸及其盐(弱酸及其共轭碱)体系pH=pKaφ±1弱碱及其盐(弱碱及其共轭酸)体系pOH=pKbφ±1例如HAc的pKaφ为4.76,所以用HAc和NaAc适宜于配制pH为3.76~5.76的缓冲溶液,在这个范围内有较大的缓冲作用。配制pH=4.76的缓冲溶液时缓冲能力比较大,此时(c(HAc)/c(NaAc)=1。色谱是一种分离分析手段,分离是**。湖南标准默克甲醇
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