ExoIII(ExonucleaseIII)和Lambda核酸外切酶(λExonuclease)在DNA末端处理上的主要不同点如下:1.**作用方向**:-**ExoIII**:具有3'→5'外切脱氧核糖核酸酶活性,它从DNA链的3'-OH末端逐步切去单核苷酸。-**Lambda核酸外切酶**:是一种5'→3'核酸外切酶,能选择性地沿5'→3'方向消化5'端磷酸化的双链DNA。2.**底物特异性**:-**ExoIII**:适底物是平末端或5'末端突出的DNA,但也可以作用于双链DNA切刻位点产生单链缺口。由于对单链DNA无活性,因此难以切割3'突出末端。-**Lambda核酸外切酶**:适底物是5'磷酸化的双链DNA,对单链DNA和5'端未磷酸化修饰的DNA的酶切活性较低,不能从DNA的切刻或缺口处起始消化。3.**活性差异**:-**ExoIII**:对具有3'-突出末端(至少有4个碱基,且具有3'-末端C残基)的DNA、单链DNA、硫代磷酸酯连接的核苷酸无活性。-**Lambda核酸外切酶**:对5'-OH端的切割速度比5'-P端慢约20倍;对单链DNA的酶切速度比双链DNA慢约100倍。4.**应用场景**:-**ExoIII**:可以用于生产特定方向的单链DNA,将线性化DNA设计成为一端为不切割末端(3'突出端),另一端则设计为易切割末端(平端或5'突出端)。

一、产品特点高纯度与稳定性dNTPSetSolution中的每种核苷酸(dATP、dCTP、dGTP、dTTP)浓度均为100mM,纯度超过99%,经HPLC验证,无DNase和RNase污染。这种高纯度的dNTP溶液能够有效减少实验中的非特异性扩增,确保实验结果的准确性和重复性。独立包装与灵活使用该套装将四种dNTP分别独立包装,便于用户根据实验需求精确调整每种dNTP的浓度,从而优化反应条件。这种灵活性对于复杂的分子生物学实验尤为重要,例如多重PCR和高保真PCR。适用性dNTPSetSolution适用于多种分子生物学应用,包括但不限于PCR、实时荧光定量PCR、RT-PCR、cDNA合成和DNA标记。其超纯的成分和稳定的性能使其能够兼容各种DNA聚合酶,包括高保真酶和热启动酶。二、性能优势高效扩增在PCR反应中,dNTP的纯度和浓度直接影响扩增效率。dNTPSetSolution能够支持长达20kb的DNA片段扩增,表现出色的扩增能力和稳定性。此外,其高纯度特性可以减少非特异性产物的生成,提高实验的特异性和灵敏度。Recombinant Mouse PDGF R alpha/PDGFRA Protein,His TagCRISPR/Cas12a 是一种单一的RNA引导的核酸内切酶,通过CRISPR/Cas9系统为靶向基因组工程提供了新的机会。

T5核酸外切酶在基因编辑中确实有应用,并且具有一些优势:1.**提高编辑效率**:根据一篇研究文章,T5核酸外切酶可以与CRISPR/Cas系统共表达或融合,以提高基因编辑的效率。这种共表达或融合可以增加indel(插入和缺失)频率,尽管增加的幅度可能不大。2.**增强基因编辑效果**:在另一项研究中,通过使用螺旋-螺旋二聚体肽(coiled-coilpeptides)将T5核酸外切酶招募到Cas9或Cas12a蛋白上,可以提高基因编辑的效率,这种方法被称为CCExo(CRISPR-Coiled-coil-Exonuclease)。这种招募方式优于共表达和直接融合,其中强的亲和力CC对显示出高的突变频率和删除长度。3.**应用于多种细胞类型**:CCExo系统在多种细胞系和原代细胞中都能有效地提高基因失活效率,并且在慢性髓性白血病(CML)患者的原代细胞以及异种移植动物模型中展示了其应用潜力,这表明CCExo方法可能成为CML和其他遗传性疾病的潜在选择。T5核酸外切酶与CRISPR核酸酶蛋白进行融合,并引入了核定位信号(NLS)序列以构建表达载体,用于基因编辑。综上所述,T5核酸外切酶在基因编辑中的应用可以增强编辑效率和效果,尤其是在与CRISPR/Cas系统结合使用时。
在现代分子生物学研究中,实时荧光定量PCR(qPCR)技术已成为基因表达分析、病原体检测、基因拷贝数变异研究等领域的工具。而One Step RT-qPCR Probe Kit凭借其产品特点和性能,为科研工作者提供了一种高效、可靠的解决方案,极大地推动了相关研究的进展。一、产品特点(一)一步法操作One Step RT-qPCR Probe Kit采用独特的一步法反应体系,将逆转录(RT)和qPCR反应集成在一个反应体系中。这种设计极大地简化了实验操作流程,减少了人为操作误差和样本污染的风险。相比传统的两步法,一步法节省了时间和人力成本,还提高了实验的重复性和稳定性,尤其适合高通量样本的检测。(二)高灵敏度与特异性该试剂盒采用了先进的探针技术,结合优化的酶体系和反应缓冲液,能够实现对低丰度靶标基因的高灵敏度检测。其特异性探针设计确保了与目标序列结合,避免了非特异性扩增的干扰,从而为定量分析提供了准确可靠的数据支持。无论是对微量样本中的基因表达进行定量,还是对低浓度病原体进行检测,One Step RT-qPCR Probe Kit都能表现出性能。在50 μL的反应体系中,建议使用1.5 μL的5× PCR Enhancer(如果需要)和0.5 μL的Phusion DNA Polymerase。

CUT&RUN和ChIC是两种用于研究蛋白质-DNA相互作用的技术,它们有一些关键的区别:1.**技术原理**:-**ChIC(ChromatinImmunocleavage)**:ChIC技术利用抗体将感兴趣的蛋白与ProteinA-MNase相结合来进行DNA切割。ChIC的优势在于使用TF特异性抗体系住MNase,并只在结合位点裂解。-**CUT&RUN(CleavageUnderTargetsandReleaseUsingNuclease)**:CUT&RUN技术则是在核的轻微MNase处理后释放单核小体和TF-DNA复合物,留下寡核小体。CUT&RUN通过在冰上进行简短的消化反应,在TF结合的MNase扩散到周边的基因组和裂解可接近的染色质之前在上清中恢复TF-DNA复合物。2.**操作步骤和简便性**:-**ChIC**:ChIC可能需要甲醛固定操作,这可能重新引入了ChIP-seq的一些问题,如交联导致的DNA和蛋白质的化学修饰。-**CUT&RUN**:CUT&RUN简化了操作步骤,使用磁珠固定细胞核,适用于新鲜和冷冻组织样本,缩短了生成DNA测序文库的时间(1-2天)。3.**背景信号和信噪比**:-**ChIC**:ChIC产生的背景信号可能较高,因为它可能涉及到非特异性的DNA切割。
Tn5 转座酶的 DNA 结合元件分布在几乎整个一级序列上,在与 DNA 结合时会使 DNA 发生弯曲。Recombinant Cynomolgus Neuropilin-1 Protein,His Tag
Uracil-DNA Glycosylase (Heat-labile, Cod),即热敏型鳕鱼尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG/UNG),是一种源自大西洋鳕鱼(Gadus morhua cod)的酶,具有独特的热敏感性和高效性。这种酶在分子生物学和诊断领域中具有广泛的应用,尤其是在需要严格控制污染的PCR和qPCR实验中。产品特点热敏感性:与普通UDG酶相比,热敏型UDG在50℃下加热10分钟即可完全且不可逆地失活。这种特性使其在PCR反应中表现出色,避免了常规UDG酶灭活后可能残留的活性对扩增产物的降解作用。高效性:该酶能够在25℃下迅速催化水解含有尿嘧啶的DNA链,释放游离尿嘧啶,对单链和双链DNA均有效。特异性:UDG酶对RNA无活性,作用于含有尿嘧啶的DNA,这使其在DNA处理和分析中具有高度的特异性。性能优势防止污染:热敏UDG酶能够有效去除含dU的PCR产物气溶胶污染,从而避免假阳性结果的出现。这对于需要高灵敏度和特异性的分子诊断实验至关重要。兼容性:该酶在多数PCR反应缓冲液中均具有活性,且在实验过程中无需添加额外的抑制剂或组分即可实现热失活。储存与运输:热敏UDG酶在-20℃下可稳定保存两年,运输过程中采用干冰保护,确保酶的活性Recombinant Cynomolgus Neuropilin-1 Protein,His Tag
在基因工程的微观世界中,限制性核酸内切酶是科学家们手中的重要工具,而ApaLI便是其中一位“精细刻刀”。它以其独特的识别序列和精细的切割能力,在基因克隆、基因分析以及分子生物学研究中发挥着关键作用。ApaLI的识别序列是“G^TGCAC”,这一序列在DNA中相对罕见,使得ApaLI能够在特定位置进行切割。它会在“^”标记的位置将DNA链切断,产生黏性末端。这种黏性末端的特性使得ApaLI在基因克隆和重组DNA构建中具有独特的优势。在基因工程中,ApaLI的应用极为广。科学家可以利用它将目标基因从复杂的基因组中精细地分离出来,再通过DNA连接酶将切割后的基因片段与载体DNA连接起来,构建出能够高...