一、产品特点(一)高灵敏度Probe qPCR Mix (2×) 采用了先进的酶制剂配方,成分为经过优化的热启动Taq酶。这种酶在常温下处于抑制状态,只有在高温条件下才被激发,从而有效避免了非特异性扩增的发生。其灵敏度极高,能够准确检测到低至单个拷贝的核酸靶标,即使在样本中目标基因含量极低的情况下,也能轻松实现定量。例如,在对稀有细胞类型中的特定基因表达进行分析时,该试剂能够快速且准确地检测到目标基因的表达水平,为研究人员提供了可靠的实验数据。(二)高特异性该qPCR Mix的特异性主要得益于其独特的探针设计和优化的反应体系。它与荧光探针配合使用,通过探针与目标核酸序列的特异性结合来实现信号的检测。这种探针检测方式具有极高的特异性,能够有效区分单个碱基的差异,从而避免了非特异性产物的干扰。在复杂的基因组背景下,即使存在高度同源的序列,该试剂也能准确地识别并扩增目标基因,确保实验结果的准确性和可靠性。例如,在对病毒核酸进行检测时,即使病毒基因与宿主基因存在部分序列相似性,该试剂仍能准确地检测到病毒核酸,为病原体的快速诊断提供有力支持。在50 μL的反应体系中,建议使用1.5 μL的5× PCR Enhancer(如果需要)和0.5 μL的Phusion DNA Polymerase。Recombinant Human ULBP-4 Protein,hFc Tag

ExoIII(ExonucleaseIII)和Lambda核酸外切酶(λExonuclease)在DNA末端处理上的主要不同点如下:1.**作用方向**:-**ExoIII**:具有3'→5'外切脱氧核糖核酸酶活性,它从DNA链的3'-OH末端逐步切去单核苷酸。-**Lambda核酸外切酶**:是一种5'→3'核酸外切酶,能选择性地沿5'→3'方向消化5'端磷酸化的双链DNA。2.**底物特异性**:-**ExoIII**:适底物是平末端或5'末端突出的DNA,但也可以作用于双链DNA切刻位点产生单链缺口。由于对单链DNA无活性,因此难以切割3'突出末端。-**Lambda核酸外切酶**:适底物是5'磷酸化的双链DNA,对单链DNA和5'端未磷酸化修饰的DNA的酶切活性较低,不能从DNA的切刻或缺口处起始消化。3.**活性差异**:-**ExoIII**:对具有3'-突出末端(至少有4个碱基,且具有3'-末端C残基)的DNA、单链DNA、硫代磷酸酯连接的核苷酸无活性。-**Lambda核酸外切酶**:对5'-OH端的切割速度比5'-P端慢约20倍;对单链DNA的酶切速度比双链DNA慢约100倍。4.**应用场景**:-**ExoIII**:可以用于生产特定方向的单链DNA,将线性化DNA设计成为一端为不切割末端(3'突出端),另一端则设计为易切割末端(平端或5'突出端)。

在分子生物学研究中,RNA的完整性分析是评估RNA质量和功能的重要环节。10×RNALoadingBuffer作为一种高效、便捷的上样缓冲液,在RNA电泳实验中发挥着不可或缺的作用。本文将详细介绍10×RNALoadingBuffer的产品特点和性能。一、产品特点高浓度设计10×RNALoadingBuffer是一种10倍浓缩的上样缓冲液,使用时需稀释至1×。这种高浓度设计减少了试剂的使用量,同时保证了样品在电泳过程中的稳定性和均匀性。示踪染料的双重指示该缓冲液含有溴酚蓝(BromophenolBlue)和二甲苯青(XyleneCyanolFF)两种示踪染料。溴酚蓝在1.2%甲醛变性琼脂糖凝胶电泳中与约500个碱基的RNA迁移速率相当,而二甲苯青则与约5000个碱基的RNA迁移速率相当。这种双重示踪设计能够直观地反映电泳的进程,帮助实验人员准确判断RNA的迁移情况。无RNase污染RNA分子对RNase极为敏感,因此在RNA实验中,避免RNase污染是关键。10×RNALoadingBuffer经过严格的质量控制,确保无RNase杂质污染,从而保证RNA样品的完整性。适用性该缓冲液适用于多种类型的RNA样品,包括总RNA、小RNA以及特定RNA的片段的电泳分析。它不仅可用于甲醛变性的琼脂糖凝胶电泳,也适用于非变性电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳。
在比较BstDNA聚合酶和TaqDNA聚合酶对于复杂DNA片段扩增的适用性时,以下是一些关键点:1.**TaqDNA聚合酶**:-TaqDNA聚合酶因其高热稳定性和扩增效率而被应用于常规PCR。它扩增速度为30-60秒/kb,缺乏3'→5'核酸外切酶活性,无校正功能,易产生错配碱基。-对于结构复杂的模板,如GC含量高、有二级结构等,TaqPlus可以用于扩增,能有效地扩增10kb以下的片段。-有产品如TitaniumTaqDNA聚合酶,它是通过基因工程改造的Taq酶,缺失了5'-3'外切酶活性,具备更强大的扩增性能,适合扩增高度复杂的DNA混合物。2.**BstDNA聚合酶**:-BstDNA聚合酶具有高适温度,能够适应更加苛刻的扩增条件,同时消除DNA二级结构,因而能够准确并且均匀地扩增全基因组序列。-BstDNA聚合酶大片段能够优先扩增短片段的DNA,并且能够确保扩增得到的DNA覆盖了整个基因组,连贯并且无偏地扩增所有的遗传位点。-翌圣生物HieffCanace®PlusHigh-FidelityDNAPolymerase基于PfuDNA聚合酶改造而成,其保真性是Taq酶的83倍,Pfu酶的9倍,扩增速度高达10秒/kb,扩增目的片段长达13kb,具有极强的扩增效率的模板适应性,非常适合复杂模板的高保真扩增。

T7EndonucleaseI(T7EI)在CRISPR/Cas9基因编辑中的应用主要体现在突变体检测和基因编辑效率评估上。以下是T7EI在CRISPR/Cas9中的具体应用步骤和特点:1.**基因编辑效率评估**:-T7EI用于评估CRISPR-Cas9在给定的导向RNA靶位点上对细胞群体进行基因编辑的效率。-通过PCR扩增围绕CRISPR导向RNA靶位点的基因组DNA,如果CRISPR-Cas9介导的非同源末端连接(NHEJ)修复事件引入了突变,变性和退火将形成突变型和野生型PCR扩增子的异源双链DNA。2.**突变体检测**:-如果CRISPR/Cas9编辑成功在DNA上引入突变,则可与野生型DNA片段退火产生异质双链DNA。T7EI可以识别该DNA上的不完全配对的DNA位点然后进行双链切割,通过琼脂糖凝胶电泳即可显示酶切后的条带,从而半定量判定基因编辑效果。-T7EI能识别长度大于或等于2bp的插入、缺失或突变导致的错配DNA,不能识别1bp的插入、缺失或突变。3.**实验步骤**:-收集细胞并提取基因组DNA,然后使用PCR扩增期望编辑的基因组区域。扩增子的长度建议为0.5-1kb。-对扩增的DNA进行变性和退火复性,以产生异质双链DNA。-使用T7EI酶处理退火后的DNA产物,在37℃孵育15分钟。
该Master Mix不仅在长片段扩增表现出色,还具备保真性其保真性远高于普通Taq酶能够减少扩增过程中的错误率。Recombinant Human ULBP-4 Protein,hFc Tag
耐高盐全能核酸酶(SaltActiveUltraNuclease)是一种重组非特异性核酸内切酶,具有以下特点和应用:1.**来源与表达**:耐高盐全能核酸酶来源于海洋微生物,通过基因工程改造在大肠杆菌(_Escherichiacoli_)中表达纯化。2.**活性条件**:在0.5MNaCl条件下具有比较好活性,这使得它在高盐环境下也能保持高效。3.**应用领域**:-**病毒纯化、疫苗生产**:作为宿主残留核酸去除试剂,将宿主残留核酸降至皮克(pg)级别,提高生物制品功效和安全性。-**蛋白和多糖类制药工业**:用于去除核酸污染,降低细胞上清和细胞裂解液的粘度,提高蛋白纯化效率及功能研究。-**防止细胞结团**:有效防止细胞和疫苗研究中外周血单核细胞(PBMC)的结团。4.**产品性质**:-分子量:24.7kDa。-等电点:9.61。-纯度:≥99%。-酶活:250-300U/μL。-适温度:37℃(工作范围0-42℃)。-辅助因子:1-10mMMg2+。5.**储存条件**:以无菌液体酶的形式提供,储存于缓冲液(25mMTris-HCl,5mMMgCl2,500mMNaCl,50%Glycerol,pH7.5)中,无色透明液体。干冰运输,-15℃~-25℃保存,有效期2年。Recombinant Human ULBP-4 Protein,hFc Tag
DL200DNAMarker:助力分子量分析的科研利器在分子生物学研究中,DNAMarker作为分子量标准,是琼脂糖凝胶电泳中不可或缺的工具。DL200DNAMarker凭借其的性能和独特的设计,为科研人员提供了高效、可靠的分子量分析解决方案。分子量标准DL200DNAMarker由特定分子量的双链DNA片段组成,条带大小准确,能够为DNA片段的大小测定提供可靠的参照。其条带清晰锐利,背景干净,即使在低浓度下也能保持高辨识度,确保实验结果的准确性。即用型设计,操作便捷该产品已预混1×LoadingBuffer,无需额外处理,可直接上样进行电泳。这种即用型设计简化了实验操作流程,节省了科研人员的...