CUT&RUN和ChIC是两种用于研究蛋白质-DNA相互作用的技术,它们有一些关键的区别:1.**技术原理**:-**ChIC(ChromatinImmunocleavage)**:ChIC技术利用抗体将感兴趣的蛋白与ProteinA-MNase相结合来进行DNA切割。ChIC的优势在于使用TF特异性抗体系住MNase,并只在结合位点裂解。-**CUT&RUN(CleavageUnderTargetsandReleaseUsingNuclease)**:CUT&RUN技术则是在核的轻微MNase处理后释放单核小体和TF-DNA复合物,留下寡核小体。CUT&RUN通过在冰上进行简短的消化反应,在TF结合的MNase扩散到周边的基因组和裂解可接近的染色质之前在上清中恢复TF-DNA复合物。2.**操作步骤和简便性**:-**ChIC**:ChIC可能需要甲醛固定操作,这可能重新引入了ChIP-seq的一些问题,如交联导致的DNA和蛋白质的化学修饰。-**CUT&RUN**:CUT&RUN简化了操作步骤,使用磁珠固定细胞核,适用于新鲜和冷冻组织样本,缩短了生成DNA测序文库的时间(1-2天)。3.**背景信号和信噪比**:-**ChIC**:ChIC产生的背景信号可能较高,因为它可能涉及到非特异性的DNA切割。

BsuDNAPolymerase(LargeFragment,5U/μL)是一种来源于嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillussubtilis)的DNA聚合酶。这种酶保留了BsuDNAPolymeraseI的5'-3'聚合酶活性,但缺失了5'-3'核酸外切酶结构域,因此它具有链置换活性,可以用于重组酶聚合酶扩增(RPA)等恒温扩增技术。以下是BsuDNAPolymerase(LargeFragment,5U/μL)的一些关键特性和应用:1.**活性定义**:在37°C条件下,30分钟内将10nmol的dNTP掺入酸不溶性物质所需的酶量定义为1个活性单位(U)。2.**热失活条件**:75°C,20分钟。3.**酶保存液成分**:25mMTris-HCl,50mMNaCl,1mMDTT,0.1mMEDTA,50%Glycerol,pH7.4@25°C。4.**储存条件**:-25~-15°C保存,有效期2年。5.**注意事项**:-由于缺乏3'-5'核酸外切酶活性,BsuDNAPolymerase(LargeFragment)不能切除3'未配对的突出末端,因而不适用于生成平齐末端。-25°C时BsuDNAPolymerase(LargeFragment)保留50%的活性,是同温度下Klenow片段(3'-5'exo-)的两倍。6.**应用**:-随机引物法标记。-cDNA第二条链的合成。-单个dA的加尾。-链置换的DNA合成。Recombinant Human ANGPT2/Angiopoietin-2 (His-Avi Tag)Pfu DNA Polymerase的热稳定性和保真性使其在优化PCR条件时更为灵活,比如在GC含量较高的模板中。

磁珠法DNA凝胶回收试剂盒是一种用于从DNA琼脂糖凝胶中回收特定DNA片段的实验室工具。与传统的柱纯化方法相比,磁珠法具有多个优势:1.**操作简便快捷**:磁珠法DNA凝胶回收试剂盒的操作步骤通常包括凝胶的融化、DNA的结合、磁珠的洗涤和DNA的洗脱,整个过程可以在20分钟内完成。2.**高纯度和高回收率**:磁珠法能够稳定、高效地从凝胶中回收DNA,纯化所得的DNA可直接用于酶切、连接、转化细菌、测序、PCR、杂交等后续操作。通常回收率达到60-80%,对于200bp以下小片段和10kb以上大片段的回收率有所下降。3.**适用性广**:适用于100bp以上DNA片段的纯化,对达到10kb片段DNA的纯化也能保持较好的效果。4.**安全性高**:操作过程中不涉及酚/氯仿等有毒试剂,更加环保和安全。5.**灵活性**:可以根据实际状况灵活调节磁珠用量,适应不同体积和浓度的样品处理。6.**自动化和高通量**:磁珠法纯化试剂盒适合手工操作,也可用于自动化工作站或核酸自动提取仪,实现高通量操作。
质粒DNA提取后的储存条件对于保持其活性至关重要。以下是一些推荐的储存方法:1.**干燥保存**:质粒DNA以干粉状态保存是比较好的方法。如果总DNA以溶液形式保存,可以使用1×TE缓冲液稀释,且TE缓冲液的pH值应为8.0-8.5之间。2.**低温保存**:植物总DNA低温保存比较好在-80℃以下或液氮保存。如果没有条件,也可以在-20℃保存。总DNA应避免经常冻融,同时建议每份样品保存3-5个样本。总DNA提取后保存的时限通常较组织要长(>两年),但若长期保存,每隔两年应抽测,对不符合使用要求的DNA进行更新。3.**避免反复冻融**:反复冻融会破坏DNA的完整性和活性,因此应尽量避免。4.**使用保护剂**:化学添加剂如二甲基亚砜(DMSO)可以防止DNA单链断裂,但因其毒性和使用量的问题,并不是理想的保护剂。5.**封装技术**:通过封装技术保存DNA,可以隔绝外界水、氧气和光等可能影响DNA稳定的因素。例如,DNAshell®技术基于密封的不锈钢微型胶囊,在惰性气氛下,给予DNA干粉保护。6.**使用稳定剂**:一些天然的双糖,如海藻糖,被认为是一种多功能的保护剂,可以保护生物体免受冷冻、加热等不利条件的影响。与Taq DNA Polymerase不同,Pfu DNA Polymerase产生的PCR产物为平滑末端,无3'端"A"突出。

Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL) 是一种从嗜热脂肪芽孢杆菌(Thermophilic Geobacillus sp)DNA聚合酶I衍生的酶,缺乏5'-3'外切核酸酶活性。以下是关于Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL)的一些关键信息:来源和特性:Bst Plus DNA Polymerase 具有更强的5'-3' DNA聚合酶活性、链置换活性和dUTP耐受性,适合用于抗污染的等温扩增反应,如LAMP和CPA等。应用:主要应用于等温DNA扩增,包括环介导等温扩增(LAMP)和其他等温扩增技术。规格:活性定义:1 U指的是在65°C下30分钟内将10 nmol的dNTP整合到酸不溶物质中的酶的量。溶液成分:包含10 mmol/L Tris-HCl、50 mmol/L KCl、0.1 mmol/L EDTA、1 mmol/L DTT、0.1% Triton X-100、50% 甘油,pH 7.5 @ 25℃。产品形式:提供的产品包括Hieff® Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL),货号14402ES,以及冻干粉形式的产品,货号14405ES,不含甘油。灵敏度和稳定性:Bst Plus DNA Polymerase 具有高灵敏度,低至5copies目的基因可测,且在飞克(fg)级别的模板量下也能快速达到阈值。在37°C下,该酶可以保持相对稳定的效应长达5天,并且在-20℃下可以稳定保存2年。储存条件:建议在-25℃至-15℃下储存,以保持产品活性,并避免反复冻融。FnCas12a产品不含DNA内切酶和外切酶,也不含RNA酶,保证了实验的准确性和重复性。Recombinant Human SEZ6L2 Protein,His Tag
UBE2L3在调节NF-κB信号通路中的作用可能对免疫反应和炎症过程至关重要。Recombinant Mouse PD-L1/B7-H1(His Tag)
pA-MNase(蛋白A-微球菌核酸酶)在以下实验中特别有用:1.**ChIC(ChromatinImmunocleavage)**:这是一种用于研究蛋白质-DNA相互作用的技术,pA-MNase在此技术中用于在免疫沉淀后切割染色质DNA,以分析特定蛋白质与DNA的结合位点。2.**CUT&RUN(CleavageUnderTargetsandReleaseUsingNuclease)**:这是一种蛋白质-基因组互作研究技术,pA-MNase在此技术中用于在目标蛋白质被抗体识别后,通过核酸酶活性切割附近的DNA,从而释放与目标蛋白质相互作用的DNA片段。CUT&RUN技术相比传统的ChIP-Seq具有实验周期短、信噪比高、可重复性好以及细胞投入量低的优势,尤其适用于早期胚胎发育、干细胞、**以及表观遗传学等研究领域。3.**染色质免疫沉淀实验**:pA-MNase在染色质免疫沉淀实验中用于染色质片段化,它在核小体间DNAlinker上进行切割保持了核小体的完整性,并且由于其温和的酶解条件,消除了超声功率的可变性和超声过程中染色质乳化所带来的负面影响。4.**去除核酸污染**:pA-MNase也可用于去除细胞裂解液中的核酸,以减少样品的粘度,这对于后续的蛋白质分析实验尤为重要。
重组人Siglec-10(hFc-Avi Tag)——精细免疫研究的桥梁重组人Siglec-10(hFc-Avi Tag)是一种经哺乳动物细胞表达、C端融合hFc-Avi双标签的高活性唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素。其Fc段可便捷完成ELISA、SPR等结合实验;而Avi标签允许在体外被BirA酶定点生物素化,实现链霉亲和素系统的高灵敏度检测或微珠/芯片固定,极大提高实验通量与重复性。蛋白采用无血清、无动物源工艺制备,>95%纯度(SDS-PAGE & SEC-HPLC),低内素(<0.1 EU/μg),支持T细胞抑制、巨噬细胞极化等体外功能研究;结合Biotin-CD24后,可在流式细胞仪中快...