营养肉汤(NutrientBroth,简称NB)是一种常用的细菌培养基,它的定义、应用和制备方法如下:1.**定义**:营养肉汤,也被称为普通肉汤,是一种用于细菌类疫苗检验的培养基,如作为疫苗杂菌计数的稀释液。2.**成分**:营养肉汤的主要成分包括蛋白胨、牛肉膏、氯化钠和水。蛋白胨和牛肉膏提供氮源、B族维生素、氨基酸和其他生长因子,同时也提供碳源;氯化钠用于维持培养基的渗透压。3.**pH值**:营养肉汤的pH值通常控制在7.2±0.2(25℃)。4.**制备方法**:-将蛋白胨10g、氯化钠5.0g和牛肉汤加入至1000ml,混合后微热溶解,然后调整pH值至7.4-7.6,滤清后分装并在116℃下灭菌30分钟。灭菌后的营养肉汤应该是淡黄色透明无沉淀的溶液,pH值应为7.2-7.4。-另一种配方是:蛋白胨10.0g、牛肉浸出粉3.0g、氯化钠5.0g和蒸馏水1000ml。将上述成分溶解在蒸馏水中,搅拌均匀后,使用NaOH或HCl调节pH至7.2±0.2,然后分装至三角瓶或试管中,121℃高压灭菌15分钟。5.**应用**:营养肉汤用于细菌的培养,尤其是那些需要丰富营养才能良好生长的细菌。它适合营养需求较高的细菌的生长,但不适用于苛养型微生物。Hμgh-Leifson培养基(也称为HL培养基或OF培养基)是一种用于细菌葡萄糖利用试验的生化培养基。EG肉汤培养基
Littman琼脂是一种常用于菌分离培养的培养基。其基本成分包括蛋白胨、牛胆粉、葡萄糖、结晶紫和琼脂,以及具有中性pH值7.0±0.2。蛋白胨提供氮源和生长因子,牛胆粉提供维生素和其他营养物质,葡萄糖提供碳源,结晶紫作为抑制革兰氏阳性菌的生长抑制剂,琼脂作为凝固剂。**配制方法**:1.称取50克Littman琼脂干粉。2.加入1升蒸馏水或去离子水。3.搅拌加热煮沸至完全溶解。4.进行121℃高压灭菌15分钟。5.冷却至50℃左右时,加入过滤除菌的链霉素水溶液(3mg/ml)10ml。6.混匀后倾入无菌平皿。**质量控制**:-对于黑曲霉CMCC(B)98003和酿酒酵母菌ATCC9763,其生长率(PR)应≥0.7。-对于金黄色葡萄球菌ATCC6538和大肠埃希氏菌ATCC25922,其生长应≤1(G≤1)。**储存条件**:应贮存于避光、干燥处,未开封的保质期为三年。Littman琼脂对于菌的分离培养具有良好的效果,同时通过添加链霉素可以增强对细菌生长的抑制作用,从而更有利于菌的选择性生长。厌氧菌肉汤MICLB琼脂(Miller)是一种用于细菌培养的培养基,特别适合于大肠杆菌(E. coli)等革兰氏阴性菌的培养。
牛心汤肉汤培养基(HeartInfusionBroth)是一种营养丰富的微生物培养基,主要用于培养和增菌各种苛养微生物,特别是链球菌和肠球菌。以下是它的一些特点:1.**营养成分**:牛心汤肉汤培养基含有牛心浸粉、蛋白胨、葡萄糖、碳酸氢钠、氯化钠和无水磷酸氢二钠等成分,为微生物提供碳源、氮源以及必需的无机盐和维生素。2.**pH值**:培养基的pH值通常控制在7.4±0.2(25℃),为微生物提供适宜的生长环境。3.**应用范围**:它适用于多种苛养性微生物的培养,如链球菌属(Streptococcus)和肠球菌属(Enterococcus)等,也可用于致病细菌的分离和增菌,包括弧菌科、霍乱弧菌、牛奶中的溶血链球菌、脑膜炎球菌、肺炎球菌等。4.**制备方法**:将培养基粉末溶解在蒸馏水中,加热煮沸至完全溶解,然后进行高压灭菌,通常在115℃下灭菌20分钟。5.**储存条件**:牛心汤肉汤培养基通常需要在阴凉干燥的条件下储存,以保持其稳定性和有效性。6.**质量控制**:使用标准菌株进行质量控制,确保培养基能够支持目标微生物的生长。牛心汤肉汤培养基因其全的营养成分和广的适用性,成为微生物实验室中的常用培养基之一。
支原体培养基基础(含精氨酸)是一种专门用于培养支原体的微生物培养基,其特点主要包括:1.**成分**:该培养基包含月示胨、蛋白胨、牛肉浸粉、牛心浸粉、氯化钠、葡萄糖、酵母浸粉、苯酚红和L-精氨酸等成分。这些成分为支原体提供氮源、维生素、矿物质,以及碳源和必要的生长因子。其中,L-精氨酸是可水解的氨基酸,苯酚红作为pH指示剂。2.**pH值**:培养基的pH值通常控制在7.6-7.8(25℃),以保证支原体的生长环境。3.**培养基配制**:使用时,需要称取培养基基础33克,溶解于1000mL蒸馏水中,经过121℃高压灭菌15分钟后冷却至室温。然后无菌操作加入马血清100mL、青霉素80万单位和1%醋酸铊10mL,混匀后分装无菌试管,放置-20℃保存。4.**应用**:适用于培养支原体的基础培养基,尤其适合于利用精氨酸的支原体,如口腔支原体等。支原体可以利用培养基中的精氨酸,使培养基pH值升高,遇指示剂酚红使培养基变红,从而可以判断支原体的生长情况。5.**灵敏度检查**:通过变色单位试验法(CCU)进行灵敏度检查,以确保培养基能够有效地检测到支原体的存在。LB琼脂可以通过将粉末成分溶解在去离子水中,加热煮沸以帮助琼脂溶解,然后用NaOH调节pH至适宜值。
CAS培养基,也称为ChromeAzurolS(CAS)检测培养基,主要用于检测微生物是否产生铁载体(siderophore)。铁载体是一类能特异性结合铁离子并供给微生物细胞的低分子量物质,对于微生物在缺铁环境中的生长至关重要。CAS培养基的特点主要包括:1.**成分**:CAS培养基包含铬天青S(CAS)、十六烷基三甲基溴化铵(HDTMA)、铁离子等成分,这些成分与微生物分泌的铁载体反应,产生颜色变化,从而可以判断微生物是否产生铁载体。此外,培养基中还包含葡萄糖、蛋白胨、硫酸镁、氯化钙等,提供微生物生长所需的碳源、氮源和其他生长因子。2.**颜色变化**:当微生物产生的铁载体与CAS培养基中的复合物结合后,会夺走铁离子,使培养基颜色由蓝色变为橘黄色,出现铁载体分泌圈,这有助于判断细菌是否产生铁载体。3.**pH值**:CAS培养基的pH值通常控制在6.8±0.1(25℃),以保证微生物的生长和铁载体的活性。4.**配制方法**:CAS培养基的配制方法相对复杂,但一些产品如Coolaber改良的CAS琼脂培养基已经进行了改良,减少了实验准备时间。该产品分为培养基基础、已灭菌的缓冲剂和已灭菌的CAS检测液三个部分,使用时只需将这些组分按说明混合即可。LIM培养基主要用于肠道菌科细菌,如沙门氏菌和志贺氏菌的鉴定 。霉菌液体培养基
BCPA 培养基针对特定微生物的筛选和培养具有高度的特异性,能有效分离目标微生物。EG肉汤培养基
DCR培养基是一种常用的植物组织培养基,其特点主要包括:1.**营养成分**:DCR培养基通常包含酵母浸膏、酪蛋白水解物、葡萄糖、无机盐等,这些成分为植物细胞提供碳源、氮源、维生素和生长因子。它是一种天然培养基,来源于动物体液或组织分离提取物,如血浆、血清、鸡胚浸出液等。2.**pH值**:培养基的pH值通常控制在5.7左右,以保证植物细胞的生长环境。3.**应用**:DCR培养基广泛应用于植物组织培养,特别是在针叶树属树种的组织培养中,如油松和马尾松等。它被用于诱导愈伤组织、悬浮细胞培养以及体细胞胚胎发生和植株再生。4.**素调节**:在DCR培养基中,添加不同的植物素,如2,4-D、6-BA、KT等,可以调节植物细胞的生长和分化。例如,通过调整这些素的浓度,可以有效地诱导油松合子胚产生愈伤组织。5.**制备方法**:DCR培养基的制备包括称量、溶化、调pH、过滤、分装、加塞、包扎、灭菌和无菌检查等步骤。在配制过程中,需要严格按照配方比例添加各种成分,并进行高压灭菌。6.**储存条件**:培养基应防潮、避光、阴凉处保存。对于需要严格灭菌的培养基,如组织培养基,较长时间的贮存必须放在3-6℃的冰箱内。EG肉汤培养基