Littman琼脂是一种常用于菌分离培养的培养基。其基本成分包括蛋白胨、牛胆粉、葡萄糖、结晶紫和琼脂,以及具有中性pH值7.0±0.2。蛋白胨提供氮源和生长因子,牛胆粉提供维生素和其他营养物质,葡萄糖提供碳源,结晶紫作为抑制革兰氏阳性菌的生长抑制剂,琼脂作为凝固剂。**配制方法**:1.称取50克Littman琼脂干粉。2.加入1升蒸馏水或去离子水。3.搅拌加热煮沸至完全溶解。4.进行121℃高压灭菌15分钟。5.冷却至50℃左右时,加入过滤除菌的链霉素水溶液(3mg/ml)10ml。6.混匀后倾入无菌平皿。**质量控制**:-对于黑曲霉CMCC(B)98003和酿酒酵母菌ATCC9763,其生长率(PR)应≥0.7。-对于金黄色葡萄球菌ATCC6538和大肠埃希氏菌ATCC25922,其生长应≤1(G≤1)。**储存条件**:应贮存于避光、干燥处,未开封的保质期为三年。Littman琼脂对于菌的分离培养具有良好的效果,同时通过添加链霉素可以增强对细菌生长的抑制作用,从而更有利于菌的选择性生长。尿素琼脂基础(pH7.2)是一种用于微生物学检验的培养基,主要用于检测和鉴别细菌是否能够产生尿素酶。改良Hartley氏消化肉汤/改良Hartley培养基
GAM肉汤(GlycerolAlanineMeatbroth)是一种常用于微生物学实验室中的培养基,它具有以下特点:1.**成分**:GAM肉汤的主要成分包括大豆胨、口胨、消化血清粉、酵母浸膏、牛肉膏、牛肝膏(粉)、葡萄糖、KH2PO4、可溶性淀粉、L-半胱氨酸盐、硫乙醇酸钠和肉汤(牛心汤)等。2.**pH值**:培养基的pH值通常调节在7.2至7.4之间,并在10磅高压下灭菌15分钟。3.**用途**:GAM肉汤用于厌氧菌的培养,是一般培养基的基础。它营养丰富,使用时无需加血,适用于各类厌氧菌的增菌。4.**制备方法**:按照标准配方混合各组分,经过适当处理和消毒制备成GAM肉汤培养基。5.**应用**:GAM肉汤培养基广泛应用于菌种的生长、保存和实验操作。它支持多种微生物的生长,并在菌种冷冻保存中表现出良好的效果。6.**贮藏方法**:室温下保存并需要防潮,使用期限为3年。7.**厌氧性细菌培养**:GAM肉汤是为厌氧性细菌设计的液体培养基,适合用于微量液体培养基稀释法来测定药剂的敏感性。8.**高压灭菌**:在使用前,GAM肉汤需要在115℃下进行15分钟的高压蒸汽杀菌后再进行急剧冷却,注意在过程中严禁振动培养基。心浸液琼脂(强化配方)HIA培养基这种培养基具备较高的透明度,便于观察微生物的生长状态和特征。
SSM琼脂是一种强选择性培养基,其成分包括胨、牛肉膏等氮、碳源,以及其他选择性抑制剂和缓冲剂。这种培养基的设计旨在分离致病的沙门氏菌和志贺氏菌。以下是SSM琼脂的一些关键特点和制备方法:1.**成分**:SSM琼脂的基础成分包括牛肉膏、蛋白胨、酵母膏粉等,这些提供碳源、氮源、维生素和矿物质。此外,还含有乳糖、三号胆盐、枸橼酸钠、硫代硫酸钠、枸橼酸铁铵、中性红和煌绿等特殊成分,这些成分有助于抑制其他微生物的生长,同时促进目标菌的生长。2.**pH值**:SSM琼脂的pH值通常控制在6.9-7.1之间,以保证微生物的生长环境。3.**制备方法**:首先,称取培养基粉末,加入到适量的蒸馏水中,加热煮沸并不断搅拌直至完全溶解。然后,冷却至50℃左右,倾入无菌平皿中备用。通常不需要高压灭菌,因为培养基中的某些成分可能在高压灭菌过程中失去活性。4.**应用**:SSM琼脂主要用于沙门氏菌的分离培养,也适用于志贺氏菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌等肠道致病菌的分离培养。在这种培养基上,多数沙门氏菌不发酵乳糖,并产硫化氢,菌落表现为无色透明并有黑色中心。
TGE肉汤(含TTC)是一种用于细菌总数测定的培养基,其特点和制备方法如下:1.**成分**:TGE肉汤的主要成分包括酵母浸粉、牛肉浸粉、葡萄糖和三苯基四氮唑氯化物(TTC)。其中,酵母浸粉和牛肉浸粉提供碳源、氮源、维生素和生长因子;葡萄糖作为可发酵的糖类提供能源;TTC作为指示剂,用于检测细菌的生长活性。2.**pH值**:TGE肉汤的pH值通常控制在7.0±0.2(25℃)。3.**制备方法**:-称取18g的TGE肉汤干粉,加入1L的蒸馏水或去离子水中。-加热搅拌直至完全溶解。-在121℃下高压灭菌15分钟。-待培养基冷却至室温后,即可使用。4.**应用**:TGE肉汤(含TTC)用于滤膜法细菌总数计数,特别适用于奶制品中细菌总数的测定。5.**质量控制**:按标签用法制备培养基,接种质控菌株,如大肠埃希氏菌ATCC25922、金黄色葡萄球菌ATCC25923等,放置35±2℃需氧培养18-24小时,以确保培养基的质量符合标准。6.**储存条件**:TGE肉汤(含TTC)应贮存于常温、避光、干燥处,用后立即旋紧瓶盖。7.**注意事项**:在称量和操作过程中应注意粉尘,佩戴口罩操作以避免引起呼吸道系统不适。使用后的干粉培养基应立即旋紧瓶盖,避免吸潮结块。TSI培养基用于检测细菌对三种糖类(葡萄糖、乳糖和蔗糖)的发酵能力以及是否产生硫化氢。
肠球菌肉汤(EnterococcusBroth)是一种专门用于增菌培养肠球菌的微生物培养基。它的特点和应用如下:1.**成分**:肠球菌肉汤的主要成分包括胰蛋白胨、牛肉浸粉、酵母浸粉、牛胆粉、氯化钠、柠檬酸钠、七叶苷、柠檬酸铁铵和叠氮化钠等。这些成分为肠球菌提供氮源、维生素和生长因子,同时维持适宜的渗透压和提供选择性抑制其他非目标菌种的环境。2.**选择性**:牛胆粉和叠氮化钠作为选择性抑菌剂,有助于抑制非链球菌的细菌生长,特别是对革兰氏阴性细菌有抑制作用。3.**应用**:该培养基主要用于食品和水中肠球菌的鉴别培养,如GB/T5750.12-2023生活饮用水标准中提到的应用。4.**制备方法**:通常将肠球菌肉汤的粉末配方溶解在蒸馏水中,加热煮沸至完全溶解,然后进行高压灭菌,以确保无菌。5.**质量控制**:在36±0.5℃培养24小时后,可以观察到特定菌株的生长情况。例如,粪链球菌(CMCC(B)32223)在肠球菌肉汤中生长良好,呈现棕黑色,并具有棕色晕轮,而金黄色葡萄球菌(ATCC6538)和大肠埃希氏菌(ATCC25922)则被抑制,不生长或生长很差。去氧胆酸钠的存在使得DC培养基对革兰氏阳性菌具有抑制作用,而对大肠菌群等革兰氏阴性菌则相对促进其生长。酵母氨基酸缺陷型合成液体培养基(色氨酸/尿嘧啶缺陷)
VRBA培养基的主要成分包括蛋白胨、酵母膏粉、乳糖、氯化钠、胆盐、结晶紫和中性红。改良Hartley氏消化肉汤/改良Hartley培养基
营养盐琼脂培养基(NSA)的pH值对微生物生长有影响。pH值是影响微生物生命活动的重要因素之一,因为它可以改变细胞膜的电荷状态,从而影响微生物对营养物质的吸收和代谢过程中酶的活性。不同的微生物对pH值的适应范围不同,大多数细菌适生长pH值为6.5~7.5,而酵母和霉菌则偏好pH值在4~6之间。营养盐琼脂培养基的pH值通常控制在6.0~6.5(25℃),这个pH值范围为许多微生物提供了适宜的生长环境。例如,黑曲霉在pH值为5.5±0.2时生长良好。如果pH值偏离这个范围,可能会抑制某些微生物的生长,而促进其他更适应该pH值的微生物种类的生长。此外,环境中的pH值还可能影响营养物质的离子化程度和可给性,以及某些化合物分子进入细胞的状态,从而促进或抑制微生物的生长。因此,了解和控制pH值对于微生物的分离和鉴定非常重要,尤其是在进行临床样本分析或食品工业中的微生物检测时。通过调整营养盐琼脂培养基的pH值,可以优化特定微生物的生长条件,也可以用于选择性地分离特定的微生物种类。改良Hartley氏消化肉汤/改良Hartley培养基