月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LaurylSulfateTryptoseBroth,简称LST)是一种选择性液体培养基,主要用于检测食品、水、奶制品中的大肠菌群和大肠埃希氏菌。它的原理和使用方法如下:1.**试验原理**:LST培养基中的胰蛋白胨提供碳源和氮源,满足细菌生长需求;氯化钠维持渗透压;乳糖作为可发酵的糖类;磷酸二氢钾和磷酸氢二钾作为pH缓冲剂;月桂基硫酸钠抑制非大肠菌群细菌的生长。2.**培养基配方**:每升培养基包含胰蛋白胨20.0g、氯化钠5.0g、乳糖5.0g、磷酸二氢钾2.75g、磷酸氢二钾2.75g、月桂基硫酸钠0.1g,pH值调节至6.8±0.2(25℃)。3.**试验方法**:称取35.6克LST培养基,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装到带有倒立发酵管的试管中,每管10ml,121℃高压灭菌15分钟,备用。4.**质量控制和典型特征**:在36±1℃培养48±2小时,大肠菌群、大肠杆菌和发酵乳糖的革兰氏阴性细菌产生气体,在小倒管内有气泡;其他细菌无气泡。5.**微生物灵敏度试验**:接种特定的质控菌株,如鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028、弗氏柠檬酸杆菌ATCC43864、阴沟肠杆菌ATCC23355、大肠埃希氏菌ATCC8739、粪肠球菌ATCC29212和金黄色葡萄球菌ATCC25923,放置36±1℃需氧培养24-48小时,观察结果。改良Letheen琼脂培养基的配方根据具体的应用需求可能会有所不同。SDALP平板
叶酸测定培养基是一种专门用于测定食品中叶酸含量的微生物培养基,具有以下特点:1.**营养成分**:该培养基包含酪蛋白氨基酸和葡萄糖作为氮源和碳源,乙酸钠作为选择剂和能量物质,以及氯化钠、硫酸锰等盐离子和多种维生素成分,为鼠李糖乳杆菌(Lactobacillusrhamnosus)等微生物提供所需的生长因子。2.**pH值**:培养基的pH值调节至6.8±0.2,以适应特定微生物的生长需求。3.**用途**:主要用于食品中叶酸的微生物测定,如GB5009.211-2022《食品安全国家标准食品中叶酸的测定》中所述。4.**制备方法**:通常将干粉培养基与蒸馏水或去离子水混合,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装试管中,每管5ml,加入标准品或测试样品,用无菌蒸馏水或去离子水调整体积至10ml,121℃高压灭菌5分钟。5.**质量控制**:使用特定的质控菌株(如鼠李糖乳杆菌ATCC7469)接种待测试培养基,在36±1℃下培养20-40小时,观察生长情况,如肉汤混浊和试管呈梯度浑浊。6.**储存条件**:应在避光、干燥处储存,未开封保质期通常为三年。7.**注意事项**:在配制和使用过程中,应遵循无菌操作,避免污染,确保水的洁净程度,因为水中的叶酸残留或容器的污染直接影响试验结果。亚硫酸钠琼脂预装培养皿大肠杆菌在DC培养基上产生典型的反应,表现为产生黑色素沉淀。
LB琼脂(Miller)是一种用于实验室的微生物培养基,特别适合于大肠杆菌(E.coli)的培养。这种培养基的配方包括蛋白胨、酵母提取物和氯化钠,以及作为凝固剂的琼脂。Miller配方的特点是含有较高的氯化钠浓度,这有助于选择性地培养某些细菌。**成分**:-蛋白胨(Tryptone):10.0g-酵母提取物(YeastExtract):5.0g-氯化钠(NaCl):10.0g-琼脂(Agar):15.0g**制备方法**:1.将40克LB琼脂粉末加入到1升蒸馏水中。2.加热至沸腾,同时搅拌以确保粉末完全溶解。3.在121°C下高压灭菌15分钟。4.灭菌后,冷却至50°C,然后分装到无菌培养皿中。**应用**:-适用于非选择性培养大肠杆菌菌株,用于克隆、质粒DNA制备和重组蛋白生产。-当加入适当的抗生物质时,也适合选择性培养。**特点**:-无需复杂配置,快速溶解,方便使用。-经济实惠,适合大量培养基的制备。**储存条件**:-通常建议在常温(10-30℃)下储存。LB琼脂(Miller)因其营养丰富、制备简单的应用,成为分子生物学和微生物学实验室中的标准培养基之一。在实际使用时,应严格按照产品说明书或相关标准进行操作,以确保培养效果。
乳糖蛋白胨培养液(LactosePeptoneBroth)是一种用于微生物学检验的培养基,主要用于水中大肠菌群的测定,符合GB(中国国家标准)的要求。以下是其主要特点和相关信息:1.**成分**:通常包含蛋白胨、牛肉膏粉、乳糖、氯化钠和溴甲酚紫等。蛋白胨和牛肉膏粉提供碳氮源及矿物质;乳糖作为可发酵的糖类;氯化钠维持均衡的渗透压;溴甲酚紫作为pH指示剂,酸性时呈黄色,碱性时呈紫色。2.**检验原理**:乳糖蛋白胨培养液中的乳糖是大肠菌群可发酵的糖类,发酵后产生酸性物质,导致溴甲酚紫颜色变化,从而可以观察到产酸现象。同时,某些菌种如大肠杆菌还能产生气体。3.**使用方法**:称取适量的培养基粉末,加入蒸馏水或去离子水,加热煮沸至完全溶解,分装后进行高压灭菌。然后,将处理好的水样接种到培养基中,进行培养并观察结果。4.**质量控制**:通过接种特定的质控菌株,如大肠埃希氏菌ATCC25922和鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028,进行培养并观察结果。大肠埃希氏菌应表现出良好的生长,产酸产气;而鼠伤寒沙门氏菌则不产酸不产气。5.**储存条件**:应贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期通常为三年。VRBA(Violet Red Bile Agar)是一种培养基,通常用于选择性分离和鉴定肠道细菌。
溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基(CetrimideAgarMedium)是一种专门用于分离和培养铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa)的选择性培养基,具有以下特点:1.**选择性培养原理**:培养基中的溴化十六烷基三甲铵(Cetrimide)作为一种季铵盐阳离子表面活性剂,对多种革兰氏阳性菌和部分革兰氏阴性菌具有抑制作用,而铜绿假单胞菌对其具有一定耐受性,因此能够在这种培养基中生长。2.**营养成分**:明胶胰酶水解物和甘油为铜绿假单胞菌的生长提供所需的碳、氮源、维生素和生长因子。3.**无机盐作用**:氯化镁和硫酸钾的添加可以促进绿脓菌素的产生,并帮助维持培养基的渗透压。4.**色素生成**:铜绿假单胞菌在该培养基中生长时,会产生两种水溶性色素——黄色的荧光素和绿色的绿脓菌素,使菌落呈现特征性的黄绿色。5.**应用范围**:广泛应用于药品、化妆品、食品、饮用水和医院环境样品中铜绿假单胞菌的检测和分离。6.**使用方法**:通常按照培养基包装上的说明进行配制,121℃高压灭菌后,冷却至适当温度倒平板使用。7.**质量控制**:使用标准菌株进行灵敏度测试,确保培养基的选择性和培养效果,如铜绿假单胞菌ATCC9027在培养基上应表现为灰白色,扁平,湿润菌落。胰蛋白胨琼脂培养皿也被广泛应用于环境监测领域,如水质、空气、食品等样品的微生物检测。ECIA平板
结晶紫中性红胆盐琼脂培养皿是一种培养基,通常用于选择性分离和鉴定革兰氏阴性肠道细菌。SDALP平板
曙红亚甲蓝琼脂培养基(EMB)是一种用于微生物培养的弱选择性培养基,特别适用于分离肠道致病菌,尤其是大肠杆菌。以下是EMB培养基的几个关键特点:1.**产品用途**:用于分离肠道致病菌,特别是大肠杆菌。2.**实验原理**:蛋白胨和牛肉浸粉提供细菌生长所需的氮源和其他营养元素;乳糖作为可发酵的碳源;氯化钠维持渗透压;曙红钠和亚甲基蓝作为抑制剂和指示剂,在酸性条件下结合形成黑色沉淀。3.**成分**:包含蛋白胨、牛肉浸粉、氯化钠、乳糖、亚甲基蓝、曙红钠和琼脂,pH值控制在7.2±0.2(25℃)。4.**试验方法**:将培养基粉末溶解在纯化水中,121℃高压灭菌15分钟后备用。5.**微生物灵敏度试验**:通过接种质控菌株,如大肠埃希氏菌、乙型副伤寒沙门菌和金黄色葡萄球菌,观察其生长情况和特征性反应。6.**菌落特征**:大肠埃希氏菌在EMB上生长时,菌落通常呈紫黑色,有金属光泽;而沙门氏菌等则为无色或琥珀色半透明菌落。7.**配置方法**:将成分溶解、过滤、灭菌后,加入乳糖并加热溶化琼脂,冷至50~55℃后加入曙红和亚甲基蓝溶液,倾注平板。这些特点使得EMB培养基在微生物学研究和临床诊断中具有重要应用。SDALP平板