伊红美蓝琼脂(EMB)是一种常用的微生物学培养基,主要用于大肠杆菌和其他肠杆菌科细菌的分离和鉴别。以下是伊红美蓝琼脂的特点介绍:1.**成分**:伊红美蓝琼脂的主要成分包括蛋白胨、乳糖、磷酸氢二钾、琼脂、伊红Y溶液和美蓝溶液。蛋白胨提供氮源和碳源,乳糖作为可发酵的糖类,磷酸氢二钾作为缓冲剂,琼脂作为凝固剂,而伊红和美蓝则作为pH指示剂。2.**pH值**:伊红美蓝琼脂的pH值为7.1,适合多数肠道细菌的生长。3.**制法**:首先将蛋白胨、磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中,校正pH值后进行高压灭菌。使用前加入乳糖并加热溶化琼脂,冷却至50-55℃时加入伊红和美蓝溶液,摇匀后倾注平板。4.**用途**:主要用于大肠杆菌和产气肠杆菌的分离和鉴别。大肠杆菌在该培养基上分解乳糖产酸,菌落呈深紫色并带有金属光泽;而产气肠杆菌则可能呈现棕色,很少有金属光泽。5.**保存**:伊红美蓝琼脂应在4℃至8℃的条件下保存,避免冻结,以保持其有效性。6.**有效期**:在适当的贮存条件下,伊红美蓝琼脂的有效期通常为三个月。
强化梭菌培养基(ReinforcedClostridiumMedium,RCM)是一种专门用于培养梭菌属(Clostridium)细菌的培养基,具有以下特点:1.**营养成分**:RCM培养基包含蛋白胨、牛肉浸粉、酵母粉、葡萄糖、可溶性淀粉、氯化钠、醋酸钠和L-半胱氨酸盐酸盐等,这些成分为梭菌提供碳源、氮源、维生素和生长因子。2.**pH值**:培养基的pH值一般控制在6.8±0.1(25℃),为梭菌提供适宜的生长环境。3.**用途**:主要用于梭菌的增菌培养和计数,特别适用于厌氧条件下梭菌的培养。4.**抑制作用**:醋酸钠成分有助于抑制革兰氏阴性菌和一些非目标细菌的生长,使得RCM培养基更适合梭菌属细菌的选择性培养。5.**稳定性**:微量琼脂(0.5g/L)的添加增加了培养基还原环境的稳定性,有助于厌氧环境的形成,防止二氧化碳、氧气和还原产物的扩散。6.**生长表现**:无动力的细菌在RCM培养基中通常呈颗粒状或条状生长,便于计数;而有动力的细菌则可能呈现浑浊生长,一般不适合计数。7.**制备方法**:将RCM培养基粉末溶解于蒸馏水中,加热至完全溶解后分装,进行高压灭菌以备使用。8.**质控结果**:RCM培养基适用于生孢梭菌和产气荚膜梭菌等梭菌的生长,这些菌株在培养基中的生长情况良好。综合苏通琼脂结核杆菌的增菌培养培养皿胰蛋白胨提供了微生物生长所需的营养物质,琼脂则起到固体化培养基的作用。
玫瑰红钠琼脂培养基是一种专门用于霉菌和酵母菌计数、分离和培养的培养基,具有以下特点:1.**选择性抑制**:玫瑰红钠作为选择性抑菌剂,可以抑制细菌的生长,并减缓某些霉菌因生长过快而导致菌落漫延生长。2.**营养成分**:蛋白胨提供碳源和氮源,葡萄糖提供能源,磷酸二氢钾作为缓冲剂,硫酸镁提供必需的微量元素。3.**pH值**:培养基的pH值控制在6.0±0.2(25℃),为霉菌和酵母菌提供适宜的生长环境。4.**制备方法**:称取31.5g培养基粉末,加热溶解于1000ml蒸馏水中,然后在121℃高压下灭菌15分钟备用。5.**用途**:根据《中华人民共和国药典》2010年版,供药品和生物制品中霉菌和酵母菌的计数、分离和培养用。6.**微生物质控**:使用质控菌株进行微生物灵敏度试验,例如白色念珠菌、黑曲霉和酵母菌,观察其生长情况和特征。7.**产品性能**:培养基应为粉红色均匀混悬液,无肉眼可见杂质。8.**注意事项**:倾注培养基的温度不宜过高,一般要求在45℃左右,以免损伤或烫死样品中的微生物而影响计数。
溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基(CetrimideAgarMedium)是一种专门用于分离和培养铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa)的选择性培养基,具有以下特点:1.**选择性培养原理**:培养基中的溴化十六烷基三甲铵(Cetrimide)作为一种季铵盐阳离子表面活性剂,对多种革兰氏阳性菌和部分革兰氏阴性菌具有抑制作用,而铜绿假单胞菌对其具有一定耐受性,因此能够在这种培养基中生长。2.**营养成分**:明胶胰酶水解物和甘油为铜绿假单胞菌的生长提供所需的碳、氮源、维生素和生长因子。3.**无机盐作用**:氯化镁和硫酸钾的添加可以促进绿脓菌素的产生,并帮助维持培养基的渗透压。4.**色素生成**:铜绿假单胞菌在该培养基中生长时,会产生两种水溶性色素——黄色的荧光素和绿色的绿脓菌素,使菌落呈现特征性的黄绿色。5.**应用范围**:广泛应用于药品、化妆品、食品、饮用水和医院环境样品中铜绿假单胞菌的检测和分离。6.**使用方法**:通常按照培养基包装上的说明进行配制,121℃高压灭菌后,冷却至适当温度倒平板使用。7.**质量控制**:使用标准菌株进行灵敏度测试,确保培养基的选择性和培养效果,如铜绿假单胞菌ATCC9027在培养基上应表现为灰白色,扁平,湿润菌落。VRBA培养基含有一些选择性成分,使其对肠道细菌更为有利。
马铃薯葡萄糖琼脂(PotatoDextroseAgar,简称PDA)是一种使用的微生物学培养基,特别适合于菌的培养,尤其是酵母和霉菌。以下是PDA培养基的一些特点:1.**成分**:PDA主要由马铃薯浸出液、葡萄糖和琼脂组成。马铃薯提供了丰富的营养物质,葡萄糖作为碳源,琼脂则作为凝固剂。2.**pH值**:PDA的pH值通常调整至5.6±0.2(25℃),以优化菌的生长条件。3.**用途**:PDA被用于食品和乳制品中酵母和霉菌的平板计数,也适用于从临床样本中培养酵母和霉菌。它对于保存某些皮肤菌的菌种库也非常有用。4.**选择性**:PDA可以通过添加酸或抗生物质(如氯霉素、酒石酸和四环素)作为选择性抑制剂来抑制细菌生长,从而促进菌生长。5.**结果解读**:在PDA上,酵母菌通常形成乳白色至白色的菌落,而霉菌则长成各种颜色的丝状菌落。不同菌在PDA上展现出独特的菌落形态特征,如颜色、质地及结构,这对于初步识别菌种至关重要。6.**局限性**:虽然PDA能有效支持多种酵母和霉菌的生长,但为了获得菌种的完整鉴定,建议对纯培养菌落进行生化、免疫学、分子生物学或质谱分析等进一步的测试。7.**储存条件**:PDA应在干燥、避光的条件下储存,通常在室温下保存,以保持其有效性。未来研究将进一步探索改良Letheen琼脂培养基在研究领域的优越性能,以及在微生物学实验设计中的灵活性。ISP Medium 5培养皿
将纯培养的菌株涂布在TSA板上,培养至单一菌落后,将培养皿密封保存在4℃或-80℃的环境中。麦康凯琼脂(MacC)平板
四硫磺酸钠亮绿培养基(TTB)基础是一种用于微生物学检验的选择性培养基,特别适用于沙门氏菌的选择性增菌培养。它遵循中国药典(ChP)标准。**成分**:该培养基的主要成分包括蛋白胨、牛胆盐、碳酸钙和硫代硫酸钠。其中,蛋白胨提供碳源、氮源和维生素以满足细菌生长的需求;碳酸钙能中和细菌产酸及吸收有毒的代谢产物;硫代硫酸钠和四硫磺酸钠结合可抑制肠道共生菌,而具有四硫磺酸钠还原酶的细菌能在此培养基中繁殖;牛胆盐和煌绿可抑制大肠群菌和其他革兰氏阳性细菌。**pH值**:培养基的pH值通常调节至8.4±0.2(25℃)。**检验原理**:蛋白胨提供细菌生长所需的营养;碳酸钙中和细菌代谢产生的酸;硫代硫酸钠在培养基中与碘和碘化钾反应形成四硫磺酸钠,抑制非目标菌;牛胆盐和煌绿抑制革兰氏阳性菌。**用法**:称取培养基46.0g,加热溶解于1000ml纯化水中,121℃高压灭菌15分钟。临用前,每1000ml培养基中加入碘试液20ml和亮绿试液10ml,混匀后分装备用。**添加剂**:每瓶培养基需配套添加碘液和0.1%煌绿水溶液。碘试液由碘6g与碘化钾5g加水20ml溶解制成。亮绿试液由亮绿0.1g加水100ml溶解制成。麦康凯琼脂(MacC)平板