pH7.4磷酸盐缓冲液(Phosphate-BufferedSaline,PBS)是一种广而使用的生物化学和分子生物学实验中的缓冲溶液,具有以下特点:1.**pH稳定性**:pH值稳定在7.4左右,接近人体血液的pH值,适合细胞和生物分子的生理条件。2.**成分**:主要由磷酸二氢钠(NaH2PO4)和磷酸氢二钠(Na2HPO4)组成,这两种盐在溶液中可以形成缓冲体系,维持pH值的稳定。3.**离子强度**:PBS具有一定的离子强度,可以模拟细胞外液的离子环境,有助于保持细胞和蛋白质的稳定性。4.**渗透压**:PBS的渗透压接近人体生理盐水的渗透压,适合用于细胞悬浮和洗涤,不会引起细胞的渗透压变化。5.**清洁性**:PBS通常使用去离子水或蒸馏水配制,减少杂质和离子对实验的干扰。6.**兼容性**:PBS与多种生物分子和细胞培养基兼容,常用于细胞培养、免疫学实验、蛋白质提取和分析等。7.**无菌性**:实验用的PBS通常需要经过高压灭菌或过滤除菌处理,以保证实验的无菌条件。8.**多功能性**:除了作为缓冲溶液外,PBS还可以用于稀释试剂、洗涤实验器材和样品等。9.**易于配制**:PBS的配制相对简单,可以根据需要调整磷酸盐的浓度来改变缓冲能力。改良Letheen琼脂培养基作为科研工具,有望在微生物学研究中取得更为明显的成果。TTC营养琼脂培养皿
营养肉汤(NB,NutrientBroth)是一种使用广的细菌培养基,具有以下特点:1.**成分**:主要由蛋白胨、牛肉浸粉(或牛肉膏粉)和氯化钠组成,为微生物提供氮源、碳源、B族维生素、氨基酸和其他生长因子,同时氯化钠维持培养基的渗透压。2.**pH值**:pH值通常控制在7.2-7.4,为细菌提供适宜的生长环境。3.**用途**:适用于细菌的传代、培养、转种、复壮和增菌等,用于食品、牛奶、奶制品的微生物检测以及其他需要一般细菌培养的实验中。4.**制备方法**:将适量的培养基粉末溶解在蒸馏水中,加热溶解后调整pH值至7.4-7.6,然后进行高压灭菌处理,备用。5.**安全性**:在制备和使用过程中,需要穿戴适当的防护设备,确保实验环境清洁,避免交叉污染,并按照实验室规章制度操作。6.**储存条件**:灭菌后的营养肉汤应储存在适当的条件下,通常是在冷藏环境中,并确保在有效期内使用。7.**外观**:制备好的营养肉汤应为淡黄色透明无沉淀的溶液。8.**微生物灵敏度**:可用于接种质控菌株,例如金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等,观察其生长情况,以确保培养基的适用性。9.**产品规格**:市面上有多种规格的营养肉汤产品,如250g包装,以及不同用途的培养基。
溴十六烷三甲铵琼脂基础(CetrimideAgar)是一种用于微生物学实验的培养基,具有以下特点:1.**用途**:主要用于铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa)的选择性分离和培养。2.**原理**:明胶胰酶水解物提供氮源;氯化镁和硫酸钾可刺激绿色的色素的产生;溴化十六烷三甲铵作为选择性抑菌剂,对多种革兰氏阳性菌和部分革兰氏阴性菌具有抑制作用,特别是对非铜绿假单胞菌的细菌;甘油作为碳源;琼脂作为凝固剂。3.**配方**:典型的配方包括明胶胰酶水解物、氯化镁、硫酸钾、溴化十六烷三甲铵和琼脂。pH值控制在7.4±0.2(25℃)。4.**实验方法**:将培养基干粉溶解于蒸馏水中,加入甘油,煮沸使混合均匀,分装三角瓶,进行高压灭菌,冷却至45-50℃时倾入无菌平皿。5.**结果观察**:铜绿假单胞菌在该培养基上通常形成具有绿色的色素的菌落,而其他非目标细菌则受到抑制。6.**注意事项**:本培养基为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验以确保鉴定结果的准确性。7.**储存条件**:通常在干燥、避光的条件下储存,以保持其有效性。
LB琼脂(Miller)是一种用于实验室的微生物培养基,特别适合于大肠杆菌(E.coli)的培养。这种培养基的配方包括蛋白胨、酵母提取物和氯化钠,以及作为凝固剂的琼脂。Miller配方的特点是含有较高的氯化钠浓度,这有助于选择性地培养某些细菌。**成分**:-蛋白胨(Tryptone):10.0g-酵母提取物(YeastExtract):5.0g-氯化钠(NaCl):10.0g-琼脂(Agar):15.0g**制备方法**:1.将40克LB琼脂粉末加入到1升蒸馏水中。2.加热至沸腾,同时搅拌以确保粉末完全溶解。3.在121°C下高压灭菌15分钟。4.灭菌后,冷却至50°C,然后分装到无菌培养皿中。**应用**:-适用于非选择性培养大肠杆菌菌株,用于克隆、质粒DNA制备和重组蛋白生产。-当加入适当的抗生物质时,也适合选择性培养。**特点**:-无需复杂配置,快速溶解,方便使用。-经济实惠,适合大量培养基的制备。**储存条件**:-通常建议在常温(10-30℃)下储存。LB琼脂(Miller)因其营养丰富、制备简单的应用,成为分子生物学和微生物学实验室中的标准培养基之一。在实际使用时,应严格按照产品说明书或相关标准进行操作,以确保培养效果。VRBA常用于从水样、食品样品等中检测肠道细菌,特别是大肠杆菌。
曙红亚甲蓝琼脂培养基(EMB)是一种用于微生物培养的弱选择性培养基,特别适用于分离肠道致病菌,尤其是大肠杆菌。以下是EMB培养基的几个关键特点:1.**产品用途**:用于分离肠道致病菌,特别是大肠杆菌。2.**实验原理**:蛋白胨和牛肉浸粉提供细菌生长所需的氮源和其他营养元素;乳糖作为可发酵的碳源;氯化钠维持渗透压;曙红钠和亚甲基蓝作为抑制剂和指示剂,在酸性条件下结合形成黑色沉淀。3.**成分**:包含蛋白胨、牛肉浸粉、氯化钠、乳糖、亚甲基蓝、曙红钠和琼脂,pH值控制在7.2±0.2(25℃)。4.**试验方法**:将培养基粉末溶解在纯化水中,121℃高压灭菌15分钟后备用。5.**微生物灵敏度试验**:通过接种质控菌株,如大肠埃希氏菌、乙型副伤寒沙门菌和金黄色葡萄球菌,观察其生长情况和特征性反应。6.**菌落特征**:大肠埃希氏菌在EMB上生长时,菌落通常呈紫黑色,有金属光泽;而沙门氏菌等则为无色或琥珀色半透明菌落。7.**配置方法**:将成分溶解、过滤、灭菌后,加入乳糖并加热溶化琼脂,冷至50~55℃后加入曙红和亚甲基蓝溶液,倾注平板。这些特点使得EMB培养基在微生物学研究和临床诊断中具有重要应用。EMB培养基的两种染料是:1.艾奥辛(Eosin);2.亚甲蓝(Methylene Blue)。SC琼脂预装培养皿
NAC琼脂培养皿在微生物学实验室中使用,其制备简单,操作方便,能够有效地抑制细菌的生长。TTC营养琼脂培养皿
叶酸测定培养基是一种专门用于测定食品中叶酸含量的微生物培养基,具有以下特点:1.**营养成分**:该培养基包含酪蛋白氨基酸和葡萄糖作为氮源和碳源,乙酸钠作为选择剂和能量物质,以及氯化钠、硫酸锰等盐离子和多种维生素成分,为鼠李糖乳杆菌(Lactobacillusrhamnosus)等微生物提供所需的生长因子。2.**pH值**:培养基的pH值调节至6.8±0.2,以适应特定微生物的生长需求。3.**用途**:主要用于食品中叶酸的微生物测定,如GB5009.211-2022《食品安全国家标准食品中叶酸的测定》中所述。4.**制备方法**:通常将干粉培养基与蒸馏水或去离子水混合,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装试管中,每管5ml,加入标准品或测试样品,用无菌蒸馏水或去离子水调整体积至10ml,121℃高压灭菌5分钟。5.**质量控制**:使用特定的质控菌株(如鼠李糖乳杆菌ATCC7469)接种待测试培养基,在36±1℃下培养20-40小时,观察生长情况,如肉汤混浊和试管呈梯度浑浊。6.**储存条件**:应在避光、干燥处储存,未开封保质期通常为三年。7.**注意事项**:在配制和使用过程中,应遵循无菌操作,避免污染,确保水的洁净程度,因为水中的叶酸残留或容器的污染直接影响试验结果。TTC营养琼脂培养皿