强化梭菌培养基(ReinforcedClostridiumMedium,RCM)是一种专为梭菌属(Clostridium)细菌设计的培养基,具有以下特点:1.**营养成分**:RCM培养基富含蛋白胨、牛肉浸粉、酵母粉、葡萄糖、可溶性淀粉、氯化钠、醋酸钠和L-半胱氨酸盐酸盐,这些成分提供碳源、氮源、维生素和生长因子,适合梭菌的生长需求。2.**pH值**:RCM培养基的pH值一般控制在6.8±0.1(25℃),为梭菌提供适宜的生长环境。3.**用途**:主要用于梭菌的增菌培养和计数,特别适用于厌氧条件下梭菌的培养。4.**抑制作用**:醋酸钠成分有助于抑制革兰氏阴性菌的生长,使得RCM培养基更适合梭菌属细菌的选择性培养。5.**稳定性**:微量琼脂(0.5g/L)的添加增加了培养基还原环境的稳定性,有助于厌氧环境的形成,防止二氧化碳、氧气和还原产物的扩散。6.**生长表现**:无动力的细菌在RCM培养基中通常呈颗粒状或条状生长,便于计数;而有动力的细菌则可能呈现浑浊生长,一般不适合计数。7.**制备方法**:将RCM培养基粉末溶解于蒸馏水中,加热至完全溶解后分装,通过高压灭菌以备使用。8.**质控结果**:RCM培养基适用于生孢梭菌和产气荚膜梭菌等梭菌的生长,这些菌株在培养基中的生长情况良好。大肠杆菌在DC培养基上产生典型的反应,表现为产生黑色素沉淀。TSA卵磷脂吐温80平板
Endo培养基,也称为远藤氏琼脂或EndoAgar,是一种用于微生物学检验的选择性培养基,主要用于大肠菌群的检测。以下是Endo培养基的一些基本信息:**配方**:Endo培养基的典型配方包含蛋白胨、乳糖、磷酸氢二钾、亚硫酸钠和碱性品红等成分,以及作为凝固剂的琼脂。具体的配方比例可能根据不同的供应商有所变化。**pH值**:培养基的pH值通常调节至7.3±0.1(25℃)。**用途**:Endo培养基用于大肠菌群的检测,特别是在水质检测中,如生活饮用水及其水源水中的总大肠菌群。**使用方法**:通常称取适量的培养基粉末,加入指定量的蒸馏水或去离子水中,并添加无水乙醇,然后进行高压灭菌。灭菌结束后,将培养基摇匀以防琼脂沉积,备用。**培养基特性**:Endo培养基中的亚硫酸钠和品红对革兰氏阳性菌有弱抑制作用。乳糖发酵型大肠杆菌和大肠菌群在该培养基上产生乙醛和酸,乙醛与亚硫酸品红化合物反应,释放出品红,使菌落和周围培养基变红色。对于大肠杆菌,该反应可能过于强烈,使得品红结晶析出,给予菌落长久性的金色金属光泽。**储存条件**:Endo培养基通常需要在密封、阴凉干燥处保存,避免摄入、呼入和皮肤接触。亚硫酸钠琼脂培养皿TTC的显色作用可以使大肠埃希菌等产生红色的菌落。
木糖赖氨酸脱氧胆盐琼脂(XLD)是一种选择性培养基,用于沙门氏菌的选择性分离培养,以下是其特点:1.**用途**:专门用于沙门氏菌的选择性分离培养,也适用于其他肠道菌的选择性分离。2.**成分**:包含酵母浸粉、L-赖氨酸、乳糖、蔗糖、木糖、氯化钠、硫代硫酸钠、柠檬酸铁铵、去氧胆酸盐、苯酚红和琼脂,pH值控制在7.4±0.2(25℃)。3.**检验原理**:酵母浸粉提供维生素和辅助因子,木糖、乳糖和蔗糖作为可发酵碳源。赖氨酸的加入有助于鉴别沙门氏菌。沙门氏菌发酵木糖产酸,产生的脱羧酶使赖氨酸脱羧,导致pH升高。硫代硫酸钠及柠檬酸铁铵与硫化氢反应,产生黑色硫化铁,苯酚红作为pH指示剂,去氧胆酸盐抑制革兰氏阳性菌的生长。4.**用法**:称取57g培养基,溶解在1000ml蒸馏水中,不要过分加热,冷至50-55℃时倾入无菌平皿,部分开盖干燥2小时,然后盖上备用。无需高压灭菌,在24小时内使用。5.**微生物质控**:使用质控菌株进行微生物灵敏度试验,如肠炎沙门氏菌CMCC50760、大肠埃希氏菌ATCC25922、福氏志贺氏菌CMCC51572等,观察其在XLD培养基上的生长特征。
乳糖蛋白胨培养液(LactosePeptoneBroth)是一种用于微生物学检验的培养基,主要用于水中大肠菌群的测定,符合GB(中国国家标准)的要求。以下是其主要特点和相关信息:1.**成分**:通常包含蛋白胨、牛肉膏粉、乳糖、氯化钠和溴甲酚紫等。蛋白胨和牛肉膏粉提供碳氮源及矿物质;乳糖作为可发酵的糖类;氯化钠维持均衡的渗透压;溴甲酚紫作为pH指示剂,酸性时呈黄色,碱性时呈紫色。2.**检验原理**:乳糖蛋白胨培养液中的乳糖是大肠菌群可发酵的糖类,发酵后产生酸性物质,导致溴甲酚紫颜色变化,从而可以观察到产酸现象。同时,某些菌种如大肠杆菌还能产生气体。3.**使用方法**:称取适量的培养基粉末,加入蒸馏水或去离子水,加热煮沸至完全溶解,分装后进行高压灭菌。然后,将处理好的水样接种到培养基中,进行培养并观察结果。4.**质量控制**:通过接种特定的质控菌株,如大肠埃希氏菌ATCC25922和鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028,进行培养并观察结果。大肠埃希氏菌应表现出良好的生长,产酸产气;而鼠伤寒沙门氏菌则不产酸不产气。5.**储存条件**:应贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期通常为三年。TSFA培养皿,即胰化大豆坚固绿琼脂培养皿,是一种用于微生物培养的固体培养基。
结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂(又称为紫红胆盐葡萄糖琼脂,Kovac'sAgar)是一种选择性培养基,用于分离和鉴定肠道细菌,尤其是大肠杆菌和其他发酵乳糖的革兰氏阴性杆菌。以下是这种培养基的一些特点:1.**选择性**:胆盐成分具有抑制某些细菌生长的作用,特别是对革兰氏阳性细菌。2.**指示剂**:结晶紫和中性红作为pH指示剂,可以反映细菌发酵糖类产生的酸性代谢产物。3.**成分**:包含葡萄糖作为可发酵的碳源,乳糖可能作为次要碳源,胆盐作为选择性抑制剂,结晶紫和中性红作为颜色指示剂,以及琼脂作为凝固剂。4.**pH敏感性**:在细菌代谢过程中,如果产生酸性代谢产物,会使培养基的pH下降,导致颜色变化。5.**菌落特征**:发酵乳糖的细菌会产生酸性代谢产物,导致菌落周围出现紫色环,而不发酵乳糖的细菌则不会产生这种颜色变化。6.**应用**:用于临床样本、食品样本和其他环境样本中的大肠杆菌和其他发酵乳糖的革兰氏阴性杆菌的分离和鉴定。7.**制备方法**:通常按照制造商提供的配方称取培养基粉末,溶解在蒸馏水中,加热至沸腾以确保琼脂完全溶解,然后分装、灭菌,并在冷却至适当温度后倒板。在临床实验室中,BHI Agar常用于从患者样本(如血液、尿液、脑脊液等)中分离和培养病原微生物。6.5%氯化钠葡萄糖琼脂培养皿
接种: 使用无菌的技术在琼脂培养基表面接种待测样品,可以是从食品、水样或其他来源收集的微生物样品。TSA卵磷脂吐温80平板
胆盐乳糖培养基(BL)是一种专门用于增菌培养的微生物培养基,它具有以下特点:1.**用途**:主要用于药品和生物制品中大肠杆菌、沙门氏菌和绿脓杆菌的增菌培养。2.**成分**:包括蛋白胨、乳糖、牛胆盐、氯化钠、磷酸氢二钾和磷酸二氢钾。蛋白胨提供碳氮源,乳糖作为可发酵的糖类,氯化钠维持渗透压,磷酸氢二钠和磷酸二氢钾作为缓冲剂,牛胆盐和去氧胆酸钠作为选择性抑菌剂。3.**pH值**:通常调节至7.4±0.2(25℃)。4.**使用方法**:首先将培养基粉末加入蒸馏水或去离子水,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装后进行高压灭菌。然后,将样品处理后加入培养基中,放入恒温培养箱内培养18至24小时,必要时可延长至48小时,观察结果。5.**应用**:胆盐乳糖培养基也用于乳品中大肠菌群的快速检测研究,通过构建检测片法和细胞培养瓶剂法,可以快速检测乳品中的大肠菌群。6.**选择性**:胆盐的存在使得培养基能够选择性地促进革兰氏阴性菌的生长,抑制革兰氏阳性菌的生长,这使得BL培养基在分离和鉴定肠道细菌中非常有用。7.**检测乳糖发酵能力**:由于含有乳糖,该培养基能够用于检测细菌的乳糖发酵能力,革兰氏阴性细菌如大肠杆菌等通常能够将乳糖发酵产生酸或气体。TSA卵磷脂吐温80平板