NPNL培养基添加剂

Todd-Hewitt肉汤（THB）是一种专为培养链球菌属细菌设计的培养基，尤其适合于肺炎链球菌和B群链球菌的培养。以下是Todd-Hewitt肉汤的一些关键特点：1.**成分**：Todd-Hewitt肉汤的主要成分包括牛肉浸粉、胰蛋白胨、葡萄糖、氯化钠、碳酸氢钠和磷酸氢二钠。这些成分为细菌提供氮源、碳源、维生素和生长因子，同时维持细胞渗透压和培养基的pH值。2.**pH缓冲**：培养基通过碳酸氢钠和磷酸氢二钠进行缓冲，以中和葡萄糖发酵过程中产生的酸性物质，保持适宜的pH环境。3.**应用**：它常用于血清学分型前的链球菌培养，以及制备抗原性链球菌溶血素。此外，它也适用于β-溶血素的制备，特别是用于金黄色葡萄球菌的培养。4.**制备方法**：通常将Todd-Hewitt肉汤的干粉与蒸馏水混合，加热煮沸至完全溶解，调整pH至7.8±0.2，然后进行高压灭菌，以确保无菌。5.**质量控制**：在使用Todd-Hewitt肉汤时，会进行质量控制以确保培养基支持目标微生物的生长。例如，对于肺炎链球菌和B群链球菌，培养后应观察到良好的生长表现。6.**储存条件**：未开封的Todd-Hewitt肉汤干粉通常在常温下保存，保质期为三年。

乳糖亚硫酸盐培养基（LactoseSulfiteMedium，简称LS）是一种用于产气荚膜梭菌确认试验的培养基，具有以下特点：1.**用途**：-主要用于产气荚膜梭菌的确认试验，通过检测其发酵乳糖产酸产气的能力。2.**成分组成**：-培养基的主要成分包括胰酪胨、酵母膏、氯化钠、乳糖和L-半胱氨酸盐酸盐。具体配方为每升含有胰酪胨15.0g、酵母膏2.5g、氯化钠2.5g、乳糖10.0g、L-半胱氨酸盐酸盐0.3g，pH值控制在7.1±0.2（25℃）。3.**添加剂**：-每瓶培养基需配套添加焦亚硫酸钠溶液和柠檬酸铁铵溶液，每8mL乳糖亚硫酸盐培养基（LS）需要1支焦亚硫酸钠和1支柠檬酸铁铵溶液。这些添加剂用于检测硫化氢的产生，使菌落呈黑色。4.**配制方法**：-称取30.3g培养基粉末，加热溶解于1000mL蒸馏水中，分装至含有倒置小导管的试管中，每管8mL，121℃高压灭菌15分钟，冷却，临用前，每管添加0.5mL过滤除菌的焦亚硫酸钠溶液和0.5mL柠檬酸铁铵溶液。5.**培养条件**：-将培养基放置于36℃±1℃的厌氧环境中培养18-24小时。6.**结果观察**：-接种质控菌株如产气荚膜梭菌（ATCC13124），观察其生长情况和特征。产气荚膜梭菌在该培养基上生长良好，菌落变黑，表明其发酵乳糖产酸产气的能力。缓冲葡萄糖蛋白胨水培养基(MRVP培养基)KI培养基中含有葡萄糖和乳糖，以及硫酸亚铁作为指示剂。硫酸亚铁与硫化氢反应，生成黑色的硫化亚铁沉淀。

VRE肉汤基础（VREBrothBase）是一种用于分离抗万古霉素的肠球菌（Vancomycin-ResistantEnterococci,VRE）和高耐氨基糖苷类抗生的肠球菌（High-LevelAminoglycoside-ResistantEnterococci,HLARE）的培养基。以下是其特点介绍：1.**配方**：VRE肉汤基础的配方通常包含牛脑浸粉、牛心浸粉、月示蛋白胨、葡萄糖、氯化钠和磷酸氢二钠等成分，这些成分为细菌提供必需的营养和生长环境。2.**pH值**：培养基的pH值控制在7.0±0.2（25℃），以适应目标细菌的生长需求。3.**选择性**：在每升培养基中添加2mg美罗培南（一种碳青霉烯类抗生物质），以抑制非目标细菌的生长，特别是对万古霉素敏感的细菌。4.**应用**：主要用于从临床样本中分离VRE和HLARE，对于监测和控制医院污染具有重要意义。5.**制备方法**：称取适量的VRE肉汤基础粉末，加入蒸馏水或去离子水中，加热煮沸至完全溶解，分装后进行高压灭菌。灭菌后冷却至55℃左右，加入无菌的美罗培南，混匀后备用。6.**储存条件**：通常建议在常温干燥的条件下储存，以保持培养基的稳定性和有效性。7

赖氨酸培养基（LYS）是一种选择性培养基，主要用于野生酿酒酵母的分离和计数。以下是其主要特点：1.**成分**：-赖氨酸培养基的主要成分包括D-葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、氯化钙、氯化钠、腺嘌呤、DL-甲硫氨酸、L-组氨酸、DL-色氨酸、硼酸、硫酸锌、钼酸铵、硫酸锰、硫酸亚铁、L-赖氨酸、肌醇、泛酸钙、硫胺素、吡哆醇、对氨基苯甲酸、烟酸、核黄素、生物素、叶酸和琼脂等。2.**pH值**：-培养基的pH值通常控制在5.0±0.2，使用10%乳酸调节pH值至5.0。3.**选择性**：-赖氨酸作为氮源，很多酵母可以利用赖氨酸为氮源，这使得培养基具有选择性。4.**应用范围**：-主要用于接种用酵母中野生酵母的分离和计数。5.**制备方法**：-称取6.6g培养基粉末，用100ml去离子水重悬，加入0.84ml的60%乳酸钾溶液，加热煮沸至完全溶解，冷却至50°C，用10%乳酸调节pH至5.0，倒入无菌培养皿。6.**灭菌方法**：-将培养基加热煮沸，溶解于1000ml蒸馏水中，冷至50℃左右时，用16%乳酸溶液调整pH至4.8±0.2，混匀，倾入无菌平皿，备用。7.**保存条件**：-培养基应密封，2-25°C保存。制备好的培养基2-8°C避光保存。改良番茄汁琼脂培养皿的质量控制包括对质控菌株的接种和培养，以确保培养基的性能和准确性。

萨氏液体培养基SDY（SabouraudDextroseMediumwithYeastExtract）在实验室中的灭菌方法应该遵循以下步骤：1.**称量培养基**：首先，根据需要的体积，称量适量的萨氏液体培养基SDY干粉，通常为60克干粉培养基用于制备1升培养基。2.**溶解**：将称量好的干粉加入到蒸馏水或去离子水中，加热并搅拌直至完全溶解。注意，萨氏液体培养基SDY的配方中通常包含蛋白胨10.0g、酵母提取物10.0g、葡萄糖40.0g，pH值控制在6.0±0.2（25℃）。3.**调整pH值**：在使用前，根据需要调整培养基的pH值至7.0，以适应的生长条件。4.**分装**：将溶解并调整好pH值的培养基分装到适合的容器中，准备进行灭菌。5.**灭菌**：有两种推荐的灭菌方法，一种是在121℃下高温灭菌15分钟，另一种是在115℃下灭菌20至30分钟。6.**注意事项**：-灭菌过程中应注意无菌操作，避免微生物污染。-灭菌后应让培养基冷却至室温，并储存在适当的条件下。-使用时应注意个人防护，穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩，以避免粉尘引起的不适。通过遵循这些步骤，可以确保萨氏液体培养基SDY在实验室中得到正确的灭菌处理，为培养提供适宜的环境。改良番茄汁琼脂培养基的pH值控制在6.8±0.2，这为乳酸菌的生长提供了适宜的酸碱环境 。BL琼脂基础

VP半固体琼脂（Voges-Proskauer Semisolid Agar）是一种生化培养基，主要用于细菌的V-P试验。NPNL培养基添加剂

甘露醇氯化钠琼脂（MannitolSaltAgar，简称MSA）是一种用于分离和鉴定革兰氏阳性细菌特别是金黄色葡萄球菌（Staphylococcusaureus）的选择性培养基，具有以下特点：1.**成分组成**：-甘露醇氯化钠琼脂的主要成分包括甘露醇、氯化钠、琼脂、酚红指示剂等。具体配方为每升培养基含有甘露醇10克、氯化钠75克、琼脂15克、酚红0.03克，pH值通常调至7.2-7.4。2.**高盐浓度**：-该培养基含有较高浓度的氯化钠（7.5-10%），这种高盐环境有助于抑制革兰氏阴性细菌和一些其他非耐盐细菌的生长，同时促进耐盐的革兰氏阳性细菌如金黄色葡萄球菌的生长。3.**pH值**：-甘露醇氯化钠琼脂的pH值通常在7.2-7.4之间，适合多数细菌的生长。4.**指示剂**：-培养基中添加的酚红指示剂可以显示细菌的代谢活动，帮助鉴别细菌。例如，某些细菌在发酵甘露醇时会产生酸性代谢产物，导致培养基颜色变化。5.**选择性**：-甘露醇氯化钠琼脂具有选择性，特别适合于金黄色葡萄球菌的分离和鉴定。金黄色葡萄球菌能够在高盐环境中生长，并利用甘露醇作为碳源，发酵产生酸，使培养基颜色变化。NPNL培养基添加剂