曙红亚甲蓝琼脂培养基(EosinMethyleneBlueAgar,简称EMB)是一种常用的微生物学培养基,主要用于分离和鉴定肠道致病菌,尤其是大肠杆菌。以下是EMB培养基的特点和相关信息:1.**成分**:EMB培养基通常包含蛋白胨、牛肉浸粉、氯化钠、乳糖、亚甲蓝、曙红钠和琼脂。其中,蛋白胨和牛肉浸粉提供细菌生长所需的氮源和其他营养元素;乳糖作为可发酵的碳源;氯化钠维持渗透压;曙红钠和亚甲基蓝作为抑制剂和指示剂,能够在酸性条件下结合形成黑色沉淀;琼脂作为凝固剂。2.**pH值**:培养基的pH值一般调节至7.2±0.2(25℃)。3.**用途**:EMB培养基是一种弱选择性培养基,特别用于分离肠道致病菌,如大肠杆菌。它通过抑制非目标菌的生长,促进目标菌的生长,从而实现分离。4.**实验原理**:曙红钠为酸性染料,亚甲基蓝为碱性染料。细菌分解乳糖产酸时,细菌带正电荷,可以与带负电的酸性染料结合,即染上了曙红钠的颜色;如果细菌因产碱性物质较多,带负电荷时与带正电荷的碱性染料亚甲基蓝结合而使得菌落呈蓝色。细菌产酸量较大时,染料可析出结晶形成金属光泽。通过进一步的生化测试,如氧化/发酵葡萄糖测试、花青素鉴定等,来进一步确认分离的菌株是否为目标肠道菌。平板计数琼脂(PCA)预装培养皿
结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂(又称为紫红胆盐葡萄糖琼脂,Kovac'sAgar)是一种选择性培养基,用于分离和鉴定肠道细菌,尤其是大肠杆菌和其他发酵乳糖的革兰氏阴性杆菌。以下是这种培养基的一些特点:1.**选择性**:胆盐成分具有抑制某些细菌生长的作用,特别是对革兰氏阳性细菌。2.**指示剂**:结晶紫和中性红作为pH指示剂,可以反映细菌发酵糖类产生的酸性代谢产物。3.**成分**:包含葡萄糖作为可发酵的碳源,乳糖可能作为次要碳源,胆盐作为选择性抑制剂,结晶紫和中性红作为颜色指示剂,以及琼脂作为凝固剂。4.**pH敏感性**:在细菌代谢过程中,如果产生酸性代谢产物,会使培养基的pH下降,导致颜色变化。5.**菌落特征**:发酵乳糖的细菌会产生酸性代谢产物,导致菌落周围出现紫色环,而不发酵乳糖的细菌则不会产生这种颜色变化。6.**应用**:用于临床样本、食品样本和其他环境样本中的大肠杆菌和其他发酵乳糖的革兰氏阴性杆菌的分离和鉴定。7.**制备方法**:通常按照制造商提供的配方称取培养基粉末,溶解在蒸馏水中,加热至沸腾以确保琼脂完全溶解,然后分装、灭菌,并在冷却至适当温度后倒板。假单胞菌琼脂P培养皿马铃薯浸出液琼脂培养皿可以更好地维持微生物的多样性,有利于保留微生物的天然群落结构。
亚硫酸铋(BS)琼脂培养基是一种用于微生物学检验的选择性培养基,特别适用于沙门氏菌的选择性分离培养。它遵循GB/SN/USP标准,包括中国国家标准(GB)、中国出入境检验检疫行业标准(SN)和美国药典(USP)。**成分**:亚硫酸铋琼脂培养基的配方通常包含蛋白胨、牛肉浸粉、葡萄糖、硫酸亚铁、磷酸氢二钠、柠檬酸铋铵、亚硫酸钠、煌绿和琼脂等。pH值一般调节至7.5±0.2(25℃)。**检验原理**:蛋白胨和牛肉浸粉提供碳源、氮源、维生素和矿物质;葡萄糖提供能源;亚硫酸铋指示剂抑制革兰氏阳性菌和大肠菌群,但不影响沙门氏菌的生长;磷酸氢二钠作为缓冲剂;硫酸亚铁用于产生硫化氢,并与铁产生沉淀,使阳性培养物为具有金属光泽的棕色到黑色菌落;琼脂作为凝固剂。**使用方法**:称取适量的培养基粉末,加入指定量的蒸馏水或去离子水中,加热煮沸至完全溶解,冷却至适宜温度后倾注平板或试管中,用于接种样品。**培养特征**:沙门氏菌在亚硫酸铋琼脂上生长时,由于其代谢特性,能够将亚硫酸盐还原成硫化物并与硫酸亚铁反应,使得菌落呈黑色,并可能表现出金属光泽。
叶酸测定培养基是一种专门用于测定食品中叶酸含量的微生物培养基,具有以下特点:1.**营养成分**:该培养基包含酪蛋白氨基酸和葡萄糖作为氮源和碳源,乙酸钠作为选择剂和能量物质,以及氯化钠、硫酸锰等盐离子和多种维生素成分,为鼠李糖乳杆菌(Lactobacillusrhamnosus)等微生物提供所需的生长因子。2.**pH值**:培养基的pH值调节至6.8±0.2,以适应特定微生物的生长需求。3.**用途**:主要用于食品中叶酸的微生物测定,如GB5009.211-2022《食品安全国家标准食品中叶酸的测定》中所述。4.**制备方法**:通常将干粉培养基与蒸馏水或去离子水混合,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装试管中,每管5ml,加入标准品或测试样品,用无菌蒸馏水或去离子水调整体积至10ml,121℃高压灭菌5分钟。5.**质量控制**:使用特定的质控菌株(如鼠李糖乳杆菌ATCC7469)接种待测试培养基,在36±1℃下培养20-40小时,观察生长情况,如肉汤混浊和试管呈梯度浑浊。6.**储存条件**:应在避光、干燥处储存,未开封保质期通常为三年。7.**注意事项**:在配制和使用过程中,应遵循无菌操作,避免污染,确保水的洁净程度,因为水中的叶酸残留或容器的污染直接影响试验结果。马铃薯浸出液作为一种常见的植物提取物,具有丰富的碳水化合物、氮源和微量元素,是一种潜在的培养基成分。
乳糖发酵培养基(LactoseFermentBroth),也称为乳糖复发酵培养基,是一种用于微生物检测的培养基,主要用于测定大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌。以下是其特点和相关信息:1.**用途**:用于大肠菌群、粪大肠菌群、大肠杆菌的测定。2.**实验原理**:蛋白胨提供碳源和氮源以满足细菌生长的需求;乳糖作为大肠菌群可发酵的糖类;溴甲酚紫作为pH指示剂,酸性环境下呈黄色,碱性环境下呈紫色。3.**成分**:通常包含蛋白胨20.0g/L、乳糖10.0g/L、溴甲酚紫0.01g/L,pH值调节至7.4±0.1(25℃)。4.**使用方法**:称取培养基30.0g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装到有倒立发酵管的试管中,每管10ml,121℃高压灭菌15分钟备用。5.**质量控制**:通过接种特定的质控菌株,如大肠埃希氏菌ATCC25922、弗氏柠檬酸杆菌ATCC43864、鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028和阴沟肠杆菌ATCC23355,来验证培养基的选择性和生长促进效果。6.**细菌生长特征**:不同细菌在乳糖发酵培养基上的生长特征不同,例如大肠埃希氏菌通常会产生酸性环境,使得培养基颜色变为黄色,并可能产生气体。7.**储存和运输条件**:未开盖的乳糖发酵培养基的保质期通常为6个月,需要在4-10度的条件下保存,运输时应保持常温。
DC培养基的主要成分包括:葡萄糖、琼脂、去氧胆酸盐(Deoxycholate)、柠檬酸盐。平板计数琼脂(PCA)预装培养皿
硫乙醇酸盐流体培养基(FluidThioglycollateMedium,FT)是一种使用的微生物培养基,特别适合于需氧菌、微需氧菌和厌氧菌的培养。以下是FT培养基的特点介绍:1.**营养成分**:FT培养基含有胰酪胨、酵母浸粉、葡萄糖、氯化钠、L-胱氨酸、硫乙醇酸盐、琼脂和刃天青等成分。这些成分为细菌提供碳源、氮源、维生素和生长因子,同时维持适宜的渗透压。2.**氧梯度环境**:FT培养基的不同深度提供了从上层的有氧环境到下层的无氧环境的梯度,适合不同需氧性的细菌生长。3.**降低氧化还原电位**:胱氨酸、硫乙醇酸盐和葡萄糖有助于降低培养基的氧化还原电位,防止过氧化物积累对细菌产生毒性,有利于厌氧菌的生长。4.**氧化还原指示剂**:刃天青作为氧化还原指示剂,其颜色变化(氧化时呈红色,还原时无色)可以指示培养基的氧化还原状态。5.**琼脂作用**:少量琼脂的加入可以防止液体对流,减少氧气和二氧化碳的扩散,有利于厌氧环境的形成。6.**无菌操作**:在灭菌和使用过程中应避免摇晃和暴露于空气中过长,以防止培养基被氧化。平板计数琼脂(PCA)预装培养皿