Kovacs氏靛基质试剂是一种用于吲哚(靛基质)试验的试剂,其特点如下:1.**应用领域**:主要用于鉴定肠系细菌,如大肠杆菌等,通过检测细菌分解色氨酸生成的吲哚来进行鉴定。2.**反应原理**:某些细菌能够分解蛋白胨中的色氨酸,生成吲哚。吲哚与试剂中的对二甲氨基苯甲醛结合,形成玫瑰吲哚,产生红色化合物,从而进行显色反应。3.**操作步骤**:首先将纯培养物接种于适宜的培养基中,如色氨酸肉汤或胰蛋白水培养基,然后在36±1℃下培养24±2小时。之后加入2-4滴Kovacs试剂,混匀后立即观察或放置室温5-10分钟观察结果。4.**结果判断**:阳性反应表现为培养基上部有一红色环,而阴性反应则为黄色、桔黄色或棕色。5.**试剂盒组成**:Kovacs氏靛基质试剂盒包含溶液A,配制依据是将5g对二甲氨基苯甲醛溶解于75mL戊醇中,然后缓慢加入25mL浓盐酸。6.**产品规格与价格**:以青岛海博生物提供的产品为例,产品规格为5ml*2,价格为35元,保质期为一年。7.**应用范围**:除了用于病原细菌的鉴定,还可用于食品卫生检测、环境控制、食品毒性检测、水中大肠杆菌检测、食品过敏性检测、食品生产环境的清洁检测、菌落计数及控制系统。改良配方提高了培养基对特定微生物的选择性,有助于特定菌株的检测和鉴定。TOS丙酸盐琼脂培养皿
LB琼脂(Miller)是一种用于实验室的微生物培养基,特别适合于大肠杆菌(E.coli)的培养。这种培养基的配方包括蛋白胨、酵母提取物和氯化钠,以及作为凝固剂的琼脂。Miller配方的特点是含有较高的氯化钠浓度,这有助于选择性地培养某些细菌。**成分**:-蛋白胨(Tryptone):10.0g-酵母提取物(YeastExtract):5.0g-氯化钠(NaCl):10.0g-琼脂(Agar):15.0g**制备方法**:1.将40克LB琼脂粉末加入到1升蒸馏水中。2.加热至沸腾,同时搅拌以确保粉末完全溶解。3.在121°C下高压灭菌15分钟。4.灭菌后,冷却至50°C,然后分装到无菌培养皿中。**应用**:-适用于非选择性培养大肠杆菌菌株,用于克隆、质粒DNA制备和重组蛋白生产。-当加入适当的抗生物质时,也适合选择性培养。**特点**:-无需复杂配置,快速溶解,方便使用。-经济实惠,适合大量培养基的制备。**储存条件**:-通常建议在常温(10-30℃)下储存。LB琼脂(Miller)因其营养丰富、制备简单的应用,成为分子生物学和微生物学实验室中的标准培养基之一。在实际使用时,应严格按照产品说明书或相关标准进行操作,以确保培养效果。TOS丙酸盐琼脂培养皿胰蛋白胨琼脂培养皿可以根据微生物的形态、生长速率、菌落颜色等特征进行初步鉴定。
伊红美蓝琼脂(EMB)是一种常用的微生物学培养基,主要用于大肠杆菌和其他肠杆菌科细菌的分离和鉴别。以下是伊红美蓝琼脂的特点介绍:1.**成分**:伊红美蓝琼脂的主要成分包括蛋白胨、乳糖、磷酸氢二钾、琼脂、伊红Y溶液和美蓝溶液。蛋白胨提供氮源和碳源,乳糖作为可发酵的糖类,磷酸氢二钾作为缓冲剂,琼脂作为凝固剂,而伊红和美蓝则作为pH指示剂。2.**pH值**:伊红美蓝琼脂的pH值为7.1,适合多数肠道细菌的生长。3.**制法**:首先将蛋白胨、磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中,校正pH值后进行高压灭菌。使用前加入乳糖并加热溶化琼脂,冷却至50-55℃时加入伊红和美蓝溶液,摇匀后倾注平板。4.**用途**:主要用于大肠杆菌和产气肠杆菌的分离和鉴别。大肠杆菌在该培养基上分解乳糖产酸,菌落呈深紫色并带有金属光泽;而产气肠杆菌则可能呈现棕色,很少有金属光泽。5.**保存**:伊红美蓝琼脂应在4℃至8℃的条件下保存,避免冻结,以保持其有效性。6.**有效期**:在适当的贮存条件下,伊红美蓝琼脂的有效期通常为三个月。
木糖赖氨酸脱氧胆盐琼脂(XLD)是一种选择性培养基,用于沙门氏菌的选择性分离培养,以下是其特点:1.**用途**:专门用于沙门氏菌的选择性分离培养,也适用于其他肠道菌的选择性分离。2.**成分**:包含酵母浸粉、L-赖氨酸、乳糖、蔗糖、木糖、氯化钠、硫代硫酸钠、柠檬酸铁铵、去氧胆酸盐、苯酚红和琼脂,pH值控制在7.4±0.2(25℃)。3.**检验原理**:酵母浸粉提供维生素和辅助因子,木糖、乳糖和蔗糖作为可发酵碳源。赖氨酸的加入有助于鉴别沙门氏菌。沙门氏菌发酵木糖产酸,产生的脱羧酶使赖氨酸脱羧,导致pH升高。硫代硫酸钠及柠檬酸铁铵与硫化氢反应,产生黑色硫化铁,苯酚红作为pH指示剂,去氧胆酸盐抑制革兰氏阳性菌的生长。4.**用法**:称取57g培养基,溶解在1000ml蒸馏水中,不要过分加热,冷至50-55℃时倾入无菌平皿,部分开盖干燥2小时,然后盖上备用。无需高压灭菌,在24小时内使用。5.**微生物质控**:使用质控菌株进行微生物灵敏度试验,如肠炎沙门氏菌CMCC50760、大肠埃希氏菌ATCC25922、福氏志贺氏菌CMCC51572等,观察其在XLD培养基上的生长特征。去氧胆酸盐琼脂培养基中含有去氧胆酸盐,这是一种天然的胆酸盐,能够抑制大多数革兰氏阳性菌的生长。
沙门、志贺菌属琼脂培养基(SS)是一种用于选择性分离培养沙门氏菌和志贺氏菌的培养基,具有以下特点:1.**用途**:主要用于沙门氏菌和志贺氏菌的选择性分离培养,也适用于其他肠道致病菌如小肠结肠炎耶尔森氏菌等。2.**成分**:包含牛肉粉、示月胨、乳糖、三号胆盐、枸橼酸钠、硫代硫酸钠、枸橼酸铁、中性红、煌绿和琼脂,pH值控制在6.9-7.1。3.**检验原理**:乳糖作为可发酵糖类,三号胆盐、枸橼酸钠和煌绿用于抑制革兰氏阳性菌及大多数大肠菌群和变形杆菌,硫代硫酸钠和枸橼酸铁用于检测硫化氢产生,中性红作为pH指示剂。4.**用法**:称取培养基63.53克,溶解于1000ml蒸馏水中,加热煮沸不必高压蒸汽灭菌,冷至45-50℃倒成平板。5.**生长现象**:沙门氏菌在SS培养基上通常表现为无色菌落,可能带有黑色中心,志贺氏菌为较小的透明菌落。6.**应用**:除了用于病原菌的分离培养,还可用于研究多重耐药细菌的分离鉴定及介导抗性基因水平转移元件的检测。7.**产品规格与价格**:市面上有250g的产品规格,价格为170元,保质期为三年。
通过进一步的生化测试,如氧化/发酵葡萄糖测试、花青素鉴定等,来进一步确认分离的菌株是否为目标肠道菌。TOS丙酸盐琼脂培养皿
胆盐硫乳琼脂培养基(DHL)是一种用于选择性分离培养肠道致病菌,特别是沙门氏菌和志贺氏菌的培养基。以下是DHL培养基的一些主要特点:1.**用途**:主要用于肠道致病菌的选择性分离培养,特别是沙门氏菌和志贺氏菌。2.**成分**:包含蛋白胨、牛肉浸粉、乳糖、蔗糖、去氧胆酸钠、硫代硫酸钠、柠檬酸钠、柠檬酸铁铵、中性红和琼脂,pH值控制在7.2±0.1(25℃)。3.**检验原理**:去氧胆酸钠和柠檬酸钠抑制革兰氏阳性菌及大多数大肠菌群和变形杆菌,但不影响沙门氏菌的生长;硫代硫酸钠和柠檬酸铁铵用于检测硫化氢产生,使菌落中心呈黑色;中性红作为pH指示剂,发酵糖产酸的菌落呈红色,不发酵糖的菌落为无色。4.**用法**:称取65.2g培养基,加热溶解在1000ml蒸馏水中,待冷至60℃时倾入无菌平皿,无需高压灭菌。5.**质量控制**:使用质控菌株进行微生物灵敏度试验,例如鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028和福氏志贺氏菌CMCC(B)51572,观察其生长率和特异性反应。6.**储存条件**:贮存于避光、干燥处,用后立即旋紧瓶盖,保质期通常为三年。TOS丙酸盐琼脂培养皿