赖氨酸培养基(LYS)是一种选择性培养基,主要用于野生酿酒酵母的分离和计数。以下是其主要特点:1.**成分**:-赖氨酸培养基的主要成分包括D-葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、氯化钙、氯化钠、腺嘌呤、DL-甲硫氨酸、L-组氨酸、DL-色氨酸、硼酸、硫酸锌、钼酸铵、硫酸锰、硫酸亚铁、L-赖氨酸、肌醇、泛酸钙、硫胺素、吡哆醇、对氨基苯甲酸、烟酸、核黄素、生物素、叶酸和琼脂等。2.**pH值**:-培养基的pH值通常控制在5.0±0.2,使用10%乳酸调节pH值至5.0。3.**选择性**:-赖氨酸作为氮源,很多酵母可以利用赖氨酸为氮源,这使得培养基具有选择性。4.**应用范围**:-主要用于接种用酵母中野生酵母的分离和计数。5.**制备方法**:-称取6.6g培养基粉末,用100ml去离子水重悬,加入0.84ml的60%乳酸钾溶液,加热煮沸至完全溶解,冷却至50°C,用10%乳酸调节pH至5.0,倒入无菌培养皿。6.**灭菌方法**:-将培养基加热煮沸,溶解于1000ml蒸馏水中,冷至50℃左右时,用16%乳酸溶液调整pH至4.8±0.2,混匀,倾入无菌平皿,备用。7.**保存条件**:-培养基应密封,2-25°C保存。制备好的培养基2-8°C避光保存。改良CCD琼脂培养皿主要用于空肠弯曲菌的分离培养 。pH值控制在7.2±0.2,为特定的生物提供适宜的生长环境 。DYS耶尔森菌琼脂
支原体肉汤培养基是一种专门用于支原体的分离和培养的培养基,具有以下特点:1.**成分组成**:-支原体肉汤培养基的主要成分包括猪胃消化粉、牛肉浸粉、酵母浸粉、氯化钠、葡萄糖和酚红。具体配方为每升含有猪胃消化粉10.0g,牛肉浸粉5.0g,酵母浸粉5.0g,氯化钠2.5g,葡萄糖5.0g,酚红0.02g,pH值调至7.6±0.2(25℃)。2.**用途**:-主要用于支原体的分离培养,特别是肺炎支原体。支原体检查法在2020年版《中华人民共和国药典》中体现,要求使用支原体肉汤培养基培养监测肺炎支原体。3.**培养条件**:-支原体肉汤培养基需要在36℃培养7-14天,观察培养基变色结果。肺炎支原体可以发酵培养基中的葡萄糖,使培养基的pH值降低,遇指示剂酚红使培养基变黄。4.**添加剂**:-每瓶支原体肉汤培养基需配套青霉素溶液(80万IU),每1000ml支原体肉汤培养基溶液中添加1支青霉素溶液(80万IU),以抑制细菌的生长。5.**培养基灵敏度**:-支原体肉汤培养基和精氨酸支原体肉汤培养基的灵敏度均达到10^9CCU·mL^-1。支原体肉汤基础和精氨酸支原体肉汤基础存放于2~8℃有效期为90天。Rustigian氏尿素培养液胡萝卜浸出液葡萄琼脂糖培养基具有一定的透明度,便于观察微生物的生长情况,如菌落形态、颜色等。
霉菌培养基是一类专门用于培养和分离霉菌的培养基,具有以下特点:1.**营养成分**:-霉菌培养基通常包含碳源(如蔗糖、葡萄糖等)、氮源(如蛋白胨、硝酸钠等)、无机盐(如磷酸盐、硫酸镁、氯化钾等)和维生素等营养物质。2.**pH值**:-霉菌培养基的pH值通常控制在6.0-6.5之间,这个pH值范围适合大多数霉菌的生长。pH值对霉菌的生长和代谢活动有重要影响。3.**凝固剂**:-固体霉菌培养基通常加入琼脂作为凝固剂,使其在冷却后形成固体凝胶状,便于霉菌的生长和观察。4.**选择性**:-某些霉菌培养基通过添加特定的物质或化学抑制剂,可以抑制细菌和其他微生物的生长,从而提高霉菌的选择性。5.**应用范围**:-霉菌培养基广泛应用于食品、药品、化妆品、环境监测等领域的霉菌检测和分离。它们也用于研究霉菌的生理、生化特性和抗性。6.**培养条件**:-霉菌培养基的培养条件(如温度、湿度、光照等)需要根据具体的霉菌种类和实验目的进行调整。通常在23℃-28℃的条件下培养,培养时间可能从几天到几周不等。7.**质控结果**:-使用特定的质控菌株(如黑曲霉、白假丝酵母等)对霉菌培养基进行质量检验,确保培养基的性能符合标准。
MD培养基(MinimalDextroseMedium)是一种常用于毕赤酵母(Pichiapastoris)等微生物的培养基,具有以下特点:1.**配方成分**:-MD培养基的主要成分包括酵母氮源、无氨基酸和硫酸铵、硫酸铵、D-葡萄糖和琼脂糖H,还含有G418硫酸盐用于抗生物质的筛选。-具体成分如YNB(酵母氮源基)、D-生物素、D-葡萄糖、腺嘌呤和L-组氨酸等。YNB的具体成分可以参见相关产品说明。2.**用途**:-MD培养基主要用于毕赤酵母营养缺陷型菌株的转化子筛选,特别是用于筛选his4标记和ade2标记。适用的酵母菌株包括GS115、X33、KM71、SMD1168、PichiaPinkstrain等。-MDA培养基(MinimalDextroseMedium+Adenine)即含有腺嘌呤的基础葡萄糖培养基,用于培养腺嘌呤缺陷型毕赤巴斯德酵母,如PichiaPink菌株。-MDH培养基(MinimalDextroseMedium+Histidine)即含组氨酸的基础葡萄糖培养基,用于培养组氨酸缺陷型毕赤巴斯德酵母。3.**使用方法**:-如用于配置液体培养基,每包含约16.7g,加入500mL水中,磁力搅拌溶解后,过滤除菌即可。-如用于配置固体培养基,每包含约16.7g,加入250mL水中,磁力搅拌溶解后,过滤除菌70℃备用;配置250mL的4%的琼脂粉,高压灭菌70℃水浴备用;按照1:1混合后倒平板即可。YEB培养基通常包含牛肉浸膏、酵母浸膏、蛋白胨、蔗糖和硫酸镁,pH值控制在7.0±0.2 。
使用特定染料:亮绿染料可以用于区分细胞生长区域,有助于观察和计数。但需要注意的是,某些染料可能对细胞有毒,因此在添加之前应进行测试。优化培养条件:细胞培养需要特定的温度、湿度、CO2浓度和气体组成,这些条件需要根据所培养的细胞类型进行优化。无菌操作:在接种和培养过程中,必须严格遵守无菌操作规程,以避免污染。观察和分析:在培养过程中,定期观察细胞的生长情况,记录细胞形态、生长速率和集落形成情况。分离和筛选:通过观察细胞在培养皿中的分布和生长情况,可以进行细胞的分离和筛选,挑选出具有特定特性的细胞群体。应用:改良后的亮绿琼脂培养皿可以用于某些类型的细胞培养,如干细胞培养、肿瘤细胞培养等,尤其是在需要三维培养环境的情况下。不同细菌在TSA上的生长特征有区别,如金黄色葡萄球菌可能产生黄色的色素,大肠埃希氏菌形成无色透明菌落。CIN-1培养基基础添加剂
制备SDA时,需要按照一定的比例称取各种成分,溶解在蒸馏水中,调节pH值,然后进行高压灭菌。DYS耶尔森菌琼脂
梭杆菌选择性琼脂基础(FusobacteriumSelectiveAgar,FSA)是一种用于梭杆菌选择性分离和培养的培养基。以下是其主要特点:1.**成分**:-梭杆菌选择性琼脂基础的主要成分包括:酪蛋白胨、大豆蛋白胨、组织消化物、葡萄糖、酵母浸粉、氯化钠、亚硫酸氢钠、氯化血红素、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、硫酸镁、吐温80、二硫苏糖醇和琼脂等。2.**使用说明**:-称取53.2克培养基粉末于1升蒸馏水或去离子水中,加热煮沸至完全溶解,分装,121℃高压灭菌15分钟或115℃灭菌30分钟,灭菌结束后摇匀,以防琼脂沉积于器皿底部而凝固,备用。-冷至55℃,无菌操作,每100毫升培养基中加入35℃预热的脱纤维绵羊血5毫升、万古霉素0.5毫克、交沙霉素0.3毫克、新霉素10毫克,混匀,倾注平板。3.**产品规格**:-通常以250克/瓶的形式提供。4.**储存条件**:-常温,避光,干燥。5.**应用**:-主要用于梭杆菌的选择性分离和培养。梭杆菌选择性琼脂基础通过添加特定的抗生物质和血液,能够有效抑制其他细菌的生长,从而促进梭杆菌的分离和培养。DYS耶尔森菌琼脂