T4UvsX重组酶是一种来源于T4噬菌体的酶,属于RecA/Rad51家族的同源体。这种重组酶在双链DNA断裂的修复以及复制叉重新启动的过程中扮演着重要角色。T4UvsX重组酶能够与其他DNA结合蛋白或辅助因子协同作用,与单链DNA形成核酸蛋白复合物。该复合物通过寻找与目标DNA互补的区域进行杂交,以完成链置换反应,且此酶本身不具有核酸酶活性。产品应用方面,T4UvsX重组酶主要用于等温扩增技术,如重组酶聚合酶扩增(RPA)技术。它在实验中与T4UvsY重组酶、BsuDNA聚合酶(大片段)、T4基因32蛋白(gp32)等组分一同使用,以优化RPA扩增反应。T4UvsX重组酶的保存条件为-20℃,可保存3年,或者-20℃储存有效期为2年,避免反复冻融。其储存液通常包含Tris-HCl、KCl、DTT、EDTA和甘油等成分,以保持酶的稳定性和活性。热失活处理为60℃孵育10分钟。在使用T4UvsX重组酶时,需要注意其保存液中甘油含量较高,建议单独分装保存,并且在操作时穿着实验服并佩戴一次性手套,以确保安全。此外,该产品供科研使用,不应用于临床诊断。牛痘DNA拓扑异构酶I是TOPO克隆技术的关键组分,该技术允许快速、简便地将PCR产物克隆到质粒载体中。Recombinant Human IGFBP2 Protein,His Tag
1stStrandcDNASynthesisKit(RNaseH-)通常提供几种不同类型的引物用于启动cDNA的合成。这些引物包括:1.**Oligo(dT)引物**:这种引物通常与mRNA的poly(A)尾部互补配对,适用于从真核生物的mRNA中合成cDNA。它能够产生大量全长cDNA,特别是当模板来源于真核生物时。2.**随机六聚体引物(RandomHexamers)**:这些引物是一组随机的六核苷酸序列,可以与RNA模板的任何部分结合,从而启动cDNA的合成。它们适用于mRNA、rRNA、tRNA和长非编码RNA等多种类型的RNA模板。3.**基因特异性引物(GeneSpecificPrimers)**:这些引物是针对特定基因序列设计的,可以用于从总RNA或mRNA中合成特定基因的cDNA。它们通常用于当需要选择性地扩增特定基因或基因家族时。在选择引物时,需要考虑RNA模板的来源、RNA的质量和特性以及后续实验的需求。例如,如果RNA模板具有复杂的二级结构或较高的GC含量,可能需要使用随机引物以提高cDNA合成的效率。另外,如果后续实验是qPCR,可以将Oligo(dT)与随机引物混合使用,以提高qPCR结果的真实性和重复性。Recombinant Mouse M-CSF R/CSF1R/CD115 Protein,His Tag牛痘DNA拓扑异构酶I是一种来源于牛痘病毒的酶,有多种作用于DNA分子的能力。
dCTPSolution(脱氧胞苷三磷酸溶液)是一种分子生物学试剂,它是进行DNA合成反应的关键成分之一。dCTP与dATP、dGTP和dTTP一起,构成DNA聚合过程中所需的四种脱氧核苷三磷酸(dNTPs)。每种dNTP对应DNA中的一个碱基:腺嘌呤(A)、胞嘧啶(C)、鸟嘌呤(G)和胸腺嘧啶(T)。dCTP的化学名称是2'-脱氧胞苷-5'-三磷酸,它在DNA合成中起到以下作用:-**DNA合成**:在聚合酶链反应(PCR)和其他DNA合成过程中,dCTP作为底物,由DNA聚合酶催化,与DNA模板链上的鸟嘌呤(G)配对,形成新的DNA链。-**DNA测序**:在某些DNA测序方法中,dCTP可能用于标记或合成测序产物。-**分子克隆和其他技术**:dCTP在分子克隆、基因表达分析和其他涉及DNA合成的实验中也有应用。dCTPSolution通常以高浓度(如100mM)的溶液形式提供,以便于在实验中使用时进行稀释。这种溶液需要在低温(通常是-20°C)条件下储存,以保持其稳定性和避免分解。在购买和使用dCTPSolution时,用户应确保产品具有高纯度、无PCR抑制剂、无核酸酶污染等特性,以保证实验的准确性和重复性。此外,dCTPSolution应用于研究用途,不应用于临床诊断过程。
5'DNA腺苷酰化试剂盒通过酶学方法高效地将单链DNA(ssDNA)5'端腺苷酰化,通常转化效率可达95%以上。以下是实现高效转化的关键步骤和特点:1.**单步反应**:与传统化学方法相比,该试剂盒可以在一个简单的步骤中完成5'端磷酸化修饰的单链DNA或RNA的腺苷酰化修饰,无需多步骤操作或纯化。2.**高效率**:试剂盒通常能将95%以上的5'端磷酸化的DNA(pDNA)转化成腺苷酰化DNA(AppDNA),从而提高产量并避免胶回收提纯步骤。3.**高温孵育**:在65℃的高温下进行反应,有助于避免DNA或RNA的二级结构对腺苷酰化反应的干扰。4.**酶的来源**:试剂盒中的腺苷酰化酶(Adenylase)通常来源于嗜热古细菌,在大肠杆菌中表达获得,保证反应的高效性。5.**操作简便**:使用MthRNA连接酶、ATP和5'-磷酸化的单链DNA进行反应,操作简单,且腺苷化产物通常不需要进行电泳切胶回收,可以直接通过乙醇沉淀进行进一步浓缩后用于后续的连接反应。6.**失活酶**:反应完成后推荐在85℃孵育5分钟以失活Adenylase,防止去腺苷酰化现象,确保腺苷酰化比率不下降。
1st Strand cDNA Synthesis Kit(RNase H-)的逆转录过程是将RNA模板转换成cDNA的过程。这个过程通常包括以下几个步骤:模板RNA的准备:确保RNA模板的质量和纯度,可能需要使用DNase I来去除RNA样品中的DNA污染。逆转录反应体系的配制:根据试剂盒的说明,将RNA模板、引物(如Oligo(dT)、随机六聚体或基因特异性引物)、dNTPs、逆转录酶和缓冲液等组分混合在一起。逆转录酶的启用:如果需要,可能要将反应体系预热到一定温度以达到逆转录酶。逆转录反应:在适宜的条件下,逆转录酶会根据RNA模板合成一条互补的DNA链。这个过程通常在一定的温度范围内进行,以保证酶的活性和反应的效率。反应的终止:逆转录反应完成后,通常通过加热到较高温度来终止反应,以防止cDNA的进一步合成。产物的纯化:合成的cDNA可能需要通过某些方法(如柱层析或沉淀)进行纯化,以去除未反应的dNTPs、RNA模板和酶等。cDNA的检测和应用:合成的cDNA可以用于后续的PCR、qPCR、克隆、测序等实验。Cas9 NLS与CRISPR/Cas9系统中的gRNA兼容,可以进行位点特异性的DNA切割 。Recombinant Human CLEC4M/CD299 Protein,His-Flag Tag
Phusion DNA Polymerase 应在后面加入反应体系中,以避免其3'-5'外切酶活性降解引物。Recombinant Human IGFBP2 Protein,His Tag
核酸(DNA和RNA)的可视化是分子生物学实验中的一项基本技术,用于检测和分析核酸的存在、大小、数量和纯度。以下是几种常用的核酸可视化方法:1.**紫外线(UV)检测**:-利用核酸分子对UV光的吸收特性,特别是在260nm波长下的吸收峰。-常用的UV检测方法包括凝胶电泳后的凝胶成像系统,可以观察到凝胶中DNA或RNA的条带。2.**荧光染料染色**:-使用荧光染料,如溴化乙锭(EthidiumBromide,EB)或SYBRGreen,这些染料可以与核酸结合并在特定波长的光照射下发出荧光。-EB常用于凝胶电泳后的DNA可视化,而SYBRGreen可用于实时定量PCR(qPCR)中DNA的检测。3.**凝胶电泳**:-通过将核酸样品加载到凝胶中,利用电场驱动核酸分子按大小分离,然后通过上述的UV或荧光染料进行可视化。4.**紫外交联**:-某些荧光染料,如BODIPY或Cy5,可以通过紫外交联直接结合到核酸上,提供更高的灵敏度和特异性。5.**银染**:-一种比EB染色更灵敏的染色方法,通过银离子与核酸的结合,然后还原成金属银,形成可见的黑色或棕色条带。6.**化学发光检测**:-使用特定的化学发光底物,如荧光素或鲁米诺,与核酸结合后,在氧化过程中产生光信号。Recombinant Human IGFBP2 Protein,His Tag
T5核酸外切酶在基因克隆中的优势主要体现在以下几个方面:1.**高效性**:T5核酸外切酶依赖性组装(TEDA)方法在常规克隆中的效率与使用专有DNA聚合酶的商业In-Fusion方法相似,但高于使用T5核酸外切酶、PhusionDNA聚合酶和DNA连接酶的Gibson方法。2.**低成本**:TEDA方法每个反应使用0.04U的T5核酸外切酶,价格为0.25美分,具有很高的成本效益。3.**简单性**:TEDA方法的反应混合物非常简单,易于操作,这使得它在预算有限的实验室中尤其有用。4.**灵活性**:TEDA方法能够组装多个DNA片段,并在多个位点同时进行定点诱变,提供了一种灵活的克隆和突...