LPM琼脂培养皿是一种选择性培养基,特别设计用于分离和培养单增李斯特菌(Listeriamonocytogenes)111214。这种培养基含有特定的成分,可以促进李斯特菌的生长,同时抑制其他微生物的生长。LPM琼脂培养皿的主要成分包括:氯化锂(Lithiumchloride):用于抑制革兰氏阳性菌和部分革兰氏阴性菌的生长。苯乙醇(Phenylethanol):同样具有抑制杂菌的作用。拉氧头孢(Moxalactam):一种抗生物质,用于抑制葡萄球菌、杆菌和变形杆菌等的生长。甘氨酸酐(Glycine):有助于提高李斯特菌的回收率。氯化钠(Sodiumchloride):维持渗透压平衡。蛋白胨和牛肉浸粉:提供细菌生长所需的碳源和维生素。琼脂:作为凝固剂,使培养基凝固成固体状态。
萨氏液体培养基SDY(SabouraudDextroseMediumwithYeastExtract)在实验室中的灭菌方法应该遵循以下步骤:1.**称量培养基**:首先,根据需要的体积,称量适量的萨氏液体培养基SDY干粉,通常为60克干粉培养基用于制备1升培养基。2.**溶解**:将称量好的干粉加入到蒸馏水或去离子水中,加热并搅拌直至完全溶解。注意,萨氏液体培养基SDY的配方中通常包含蛋白胨10.0g、酵母提取物10.0g、葡萄糖40.0g,pH值控制在6.0±0.2(25℃)。3.**调整pH值**:在使用前,根据需要调整培养基的pH值至7.0,以适应的生长条件。4.**分装**:将溶解并调整好pH值的培养基分装到适合的容器中,准备进行灭菌。5.**灭菌**:有两种推荐的灭菌方法,一种是在121℃下高温灭菌15分钟,另一种是在115℃下灭菌20至30分钟。6.**注意事项**:-灭菌过程中应注意无菌操作,避免微生物污染。-灭菌后应让培养基冷却至室温,并储存在适当的条件下。-使用时应注意个人防护,穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩,以避免粉尘引起的不适。通过遵循这些步骤,可以确保萨氏液体培养基SDY在实验室中得到正确的灭菌处理,为培养提供适宜的环境。Stuart运送培养基TSAM培养皿的pH值通常控制在7.3 ± 0.2(25℃),以适应细菌的生理需求。用于HGMF膜法培养大肠菌群。
支原体肉汤培养基是一种专门用于支原体的分离和培养的培养基,具有以下特点:1.**成分组成**:-支原体肉汤培养基的主要成分包括猪胃消化粉、牛肉浸粉、酵母浸粉、氯化钠、葡萄糖和酚红。具体配方为每升含有猪胃消化粉10.0g,牛肉浸粉5.0g,酵母浸粉5.0g,氯化钠2.5g,葡萄糖5.0g,酚红0.02g,pH值调至7.6±0.2(25℃)。2.**用途**:-主要用于支原体的分离培养,特别是肺炎支原体。支原体检查法在2020年版《中华人民共和国药典》中体现,要求使用支原体肉汤培养基培养监测肺炎支原体。3.**培养条件**:-支原体肉汤培养基需要在36℃培养7-14天,观察培养基变色结果。肺炎支原体可以发酵培养基中的葡萄糖,使培养基的pH值降低,遇指示剂酚红使培养基变黄。4.**添加剂**:-每瓶支原体肉汤培养基需配套青霉素溶液(80万IU),每1000ml支原体肉汤培养基溶液中添加1支青霉素溶液(80万IU),以抑制细菌的生长。5.**培养基灵敏度**:-支原体肉汤培养基和精氨酸支原体肉汤培养基的灵敏度均达到10^9CCU·mL^-1。支原体肉汤基础和精氨酸支原体肉汤基础存放于2~8℃有效期为90天。
4.**培养条件**:-培养基的制备方法包括称取基础培养基14.2g加入180ml蒸馏水,加热溶解并不停搅拌;另取1.2g李斯特氏菌添加剂,加入20ml无菌水,并加入一些玻璃球,不停振动,使其乳化均匀,将二者分别于121℃高压灭菌15分钟。冷至50℃左右时,把李斯特氏菌添加剂加入基础培养基中,并加入李斯特氏菌抑菌剂,混匀,倾入无菌平皿。5.**质量控制**:-质控菌株在37℃培养24-48小时,单增李斯特氏菌和绵羊李斯特氏菌在该培养基上生长良好,形成蓝色菌落,菌落周围有一不透明环。其他菌如金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌则不生长或生长不良。6.**储存条件**:-制备好的固体平板保存于2-8℃,应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处,保存温度2-8℃。7.**注意事项**:-严格按照标签说明进行配制培养基,避免混合时培养基和添加剂温度过高导致平板出现絮状物。干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。这些特点使得李斯特氏菌显色培养基在食品卫生微生物检验中具有重要的应用价值。由于含有不溶性活性炭,BCYE琼脂培养基整体呈现黑色,这有助于在培养过程中观察到的特征性变化 。
LPM琼脂培养皿的优点使用LPM琼脂培养皿具有以下优点:高选择性:LPM琼脂培养皿中的特定成分能够有效抑制非目标细菌的生长,提高李斯特菌的分离效率。易于操作:制备和使用LPM琼脂培养皿的过程相对简单,便于实验室人员操作。稳定性好:LPM琼脂培养皿在适当的存储条件下具有良好的稳定性,便于长期保存。结果可靠:LPM琼脂培养皿能够提供可靠的检测结果,有助于准确诊断和评估李斯特菌的污染情况。适应性强:LPM琼脂培养皿适用于多种样本类型,包括食品、环境和临床样本。R2A琼脂培养皿主要用于纯化水中菌落总数的测定,符合EP、USP、Chp等药典标准 。亚硝酸盐还原菌固体培养基
改良番茄汁琼脂培养皿的质量控制包括对质控菌株的接种和培养,以确保培养基的性能和准确性。麦芽提取物琼脂(MEA)
TCBS琼脂培养皿是一种选择性差异培养基,专门设计用于分离和鉴定肠道致病性弧菌,尤其是霍乱弧菌和副溶血性弧菌。这种培养基的名称来源于其主要成分:硫代硫酸钠(Thiosulfate)、柠檬酸钠(Citrate)、胆汁盐(Bile Salts)和蔗糖(Sucrose),这些成分共同作用以实现对目标菌种的选择性生长和鉴别。成分与原理TCBS琼脂培养皿的主要成分包括:酵母粉和蛋白胨:提供氮源、碳源、维生素和生长因子,支持细菌生长。氯化钠:提供弧菌嗜盐生长的比较好的环境,同时形成的高渗透压抑制其他细菌生长。蔗糖:作为可发酵的碳源,用于检测细菌的代谢活动。胆酸钠、牛胆粉、硫代硫酸钠:与高pH值一起抑制革兰氏阳性菌和大肠菌群的生长。柠檬酸铁:与硫代硫酸钠反应,作为检测硫化氢产生的指示剂。溴麝香草酚兰和麝香草酚兰:作为pH指示剂,能够根据细菌代谢产物改变颜色。琼脂:作为凝固剂,使培养基凝固成固体状态。麦芽提取物琼脂(MEA)