配制与使用方法MMA培养基的配制通常遵循以下步骤:称取MMA培养基粉末,按照说明书比例加入蒸馏水。加热溶解,然后进行高压灭菌。冷却至适当温度(通常为45-50°C),倾倒入无菌培养皿中,待其凝固后使用。使用时,将待检测样本接种到培养皿上,然后倒置培养于适宜的温度下(通常是30-37°C),培养一定时间后观察菌落生长情况。结果分析在MMA培养皿上,李斯特菌会呈现出特征性的菌落形态,通常为蓝色或蓝绿色,这是因为萘酚亚甲基蓝在还原状态下改变颜色。注意事项在配制和使用过程中应避免接触和吸入,操作时应戴口罩、手套、护目镜。培养基应密封、避光、在2-8°C条件下保存。MMA培养皿是一种高效的工具,广泛应用于微生物学研究、食品检测和环境监测等领域,为李斯特菌的检测和控制提供了有力的支持。改良番茄汁琼脂培养基的pH值控制在6.8±0.2,这为乳酸菌的生长提供了适宜的酸碱环境 。改良Frey氏培养基基础
乳糖亚硫酸盐培养基(LactoseSulfiteMedium,简称LS)是一种用于产气荚膜梭菌确认试验的培养基,具有以下特点:1.**用途**:-主要用于产气荚膜梭菌的确认试验,通过检测其发酵乳糖产酸产气的能力。2.**成分组成**:-培养基的主要成分包括胰酪胨、酵母膏、氯化钠、乳糖和L-半胱氨酸盐酸盐。具体配方为每升含有胰酪胨15.0g、酵母膏2.5g、氯化钠2.5g、乳糖10.0g、L-半胱氨酸盐酸盐0.3g,pH值控制在7.1±0.2(25℃)。3.**添加剂**:-每瓶培养基需配套添加焦亚硫酸钠溶液和柠檬酸铁铵溶液,每8mL乳糖亚硫酸盐培养基(LS)需要1支焦亚硫酸钠和1支柠檬酸铁铵溶液。这些添加剂用于检测硫化氢的产生,使菌落呈黑色。4.**配制方法**:-称取30.3g培养基粉末,加热溶解于1000mL蒸馏水中,分装至含有倒置小导管的试管中,每管8mL,121℃高压灭菌15分钟,冷却,临用前,每管添加0.5mL过滤除菌的焦亚硫酸钠溶液和0.5mL柠檬酸铁铵溶液。5.**培养条件**:-将培养基放置于36℃±1℃的厌氧环境中培养18-24小时。6.**结果观察**:-接种质控菌株如产气荚膜梭菌(ATCC13124),观察其生长情况和特征。产气荚膜梭菌在该培养基上生长良好,菌落变黑,表明其发酵乳糖产酸产气的能力。LB琼脂(Miller)YEB培养基特别适用于农杆菌的培养和表达,使用此培养基制备农杆菌感受态细胞,转化效率高。
萨氏液体培养基SDY(SabouraudDextroseMediumwithYeastExtract)是一种专门用于培养菌的培养基,其特点如下:1.**成分组成**:-包含肽(Peptone)、酵母提取物(YeastExtract)、葡萄糖(Glucose)等成分,这些成分为菌提供氮源、维生素、矿物质以及碳源。2.**pH值**:-通常需要调整pH值至中性或接近中性,大约在pH7.0左右,以适应菌的生长需求。3.**培养条件**:-适用于需氧条件下的培养,培养温度一般为室温至人体温度(20-25°C至37°C)。4.**灭菌方法**:-培养基在使用前需要进行高温灭菌,通常在121℃下灭菌15分钟或115℃下灭菌20分钟。5.**应用范围**:-主要用于菌的分离和培养,特别适用于医学和食品工业中对菌的检测和研究。6.**质控标准**:-使用特定的质控菌株进行培养基的质量控制,确保培养基的性能符合标准,例如白色念珠菌等。7.**产品形式**:-萨氏液体培养基SDY通常以干粉形式提供,便于储存和运输,使用时加水溶解即可。8.**安全性和操作注意事项**:-操作时应遵循无菌技术,注意粉尘,穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩以避免呼吸道系统不适。
硫酸盐还原菌培养基E是一种专门用于培养硫酸盐还原菌(SRB)的培养基,其配方和使用说明如下:1.**配方**:-成分(g/L):磷酸氢二钾0.5g、氯化铵1.0g、硫酸钠0.5g、氯化钙0.1g、硫酸镁2.0g、乳酸钠3.5g、酵母汁1.0g、硫酸亚铁铵0.3g、维生素C0.1g,pH值控制在7.2±0.2(25℃)。2.**配制方法**:-按照上述配方准确称量各种成分,加入蒸馏水溶解,调节pH值至7.2±0.2,然后进行灭菌处理。3.**灭菌处理**:-配制好的培养基通常在121℃高压下灭菌15分钟以确保无菌。4.**培养条件**:-硫酸盐还原菌的培养条件需要在无氧环境下进行,因为这些细菌通常是厌氧的。培养温度和pH值需要根据具体菌株的偏好进行调整。5.**使用说明**:-培养基融化后应立即移开,室温静置片刻,以免玻璃容器发生破裂。融化后的培养基放入47℃~50℃恒温水浴锅中保温,冷却到适宜温度后尽快使用,放置时间一般不超过4小时。剩余的培养基凝固后不得再次融化使用。6.**注意事项**:-在使用和进一步加热前,应将培养基放置到室温。经过高压灭菌的培养基应尽量减少重新加热的时间,避免过度加热。加入样品的培养基应将温度调节到44℃~47℃,或按照相关标准调节温度。
含糖牛肉汤琼脂培养皿主要成分包括牛肉浸粉、氯化钠、胨、乳糖等,为细菌提供所需的碳源、氮源和维生素。
4.**培养条件**:-培养基的制备方法包括称取基础培养基14.2g加入180ml蒸馏水,加热溶解并不停搅拌;另取1.2g李斯特氏菌添加剂,加入20ml无菌水,并加入一些玻璃球,不停振动,使其乳化均匀,将二者分别于121℃高压灭菌15分钟。冷至50℃左右时,把李斯特氏菌添加剂加入基础培养基中,并加入李斯特氏菌抑菌剂,混匀,倾入无菌平皿。5.**质量控制**:-质控菌株在37℃培养24-48小时,单增李斯特氏菌和绵羊李斯特氏菌在该培养基上生长良好,形成蓝色菌落,菌落周围有一不透明环。其他菌如金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌则不生长或生长不良。6.**储存条件**:-制备好的固体平板保存于2-8℃,应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处,保存温度2-8℃。7.**注意事项**:-严格按照标签说明进行配制培养基,避免混合时培养基和添加剂温度过高导致平板出现絮状物。干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。这些特点使得李斯特氏菌显色培养基在食品卫生微生物检验中具有重要的应用价值。TSA不仅用于微生物的常规培养,还可用于医药环境监测沉降菌、浮游菌等。地杆菌培养基基础
TBA培养基中添加的胆汁盐是其选择性培养特性的关键因素。胆汁盐对革兰氏阳性细菌具有抑制作用。改良Frey氏培养基基础
亚硫酸铋琼脂平板培养皿(BismuthSulfiteAgar,简称BSA)是一种用于选择性分离培养沙门氏菌的培养基,具有以下特点:1.**试验原理**:-亚硫酸铋琼脂培养基通过其成分抑制大肠杆菌、变形杆菌和革兰氏阳性菌的生长,但对沙门氏菌的生长没有影响。沙门氏菌能利用葡萄糖,将亚硫酸盐还原成硫化物并与硫酸亚铁反应,使得菌落呈黑色,此外还可以将铋离子还原成金属铋,使菌落呈现金属光泽,从而使沙门氏菌得到分离。2.**培养基配方**:-培养基的主要成分包括蛋白胨、牛肉粉、葡萄糖、硫酸亚铁、亚硫酸铋、磷酸氢二钠、亮绿和琼脂。具体配方为每升含有蛋白胨10.0g、牛肉浸粉5.0g、葡萄糖5.0g、硫酸亚铁0.3g、磷酸氢二钠4.0g、琼脂15.0g、亚硫酸钠6.0g、柠檬酸铋铵2.0g、煌绿0.025g、纯化水1000mL,pH值为7.5±0.2。3.**使用方法**:-亚硫酸铋琼脂平板培养皿为即用型成品平板,拆包即可使用,注意无菌操作。培养基中的柠檬酸铋铵和亚硫酸钠反应生成不溶物,培养基呈浑浊状,有黑色沉淀,摇匀后倒平板使用即可。4.**储存条件与保质期**:-亚硫酸铋琼脂平板培养皿应储存在2~8℃,避光保存,有效期见包装。改良Frey氏培养基基础