LPM琼脂培养皿的制备方法LPM琼脂培养皿的制备通常遵循以下步骤:称量:首先,根据需要的培养基体积,准确称量LPM琼脂粉末。溶解:将称量好的LPM琼脂粉末溶解在蒸馏水中,通常使用1000毫升水溶解50.5克培养基粉末。灭菌:将溶解后的培养基溶液进行高压灭菌,通常在121℃下保持15分钟。冷却:灭菌后的培养基需要冷却至45-50℃,以便于后续添加添加剂。添加添加剂:在冷却后的培养基中加入LPM琼脂添加剂,如拉氧头孢,每100毫升培养基中加入1支。混合:将添加剂与培养基混合均匀。倾倒入平皿:将混合好的培养基溶液倒入无菌平皿中,待其凝固后即可使用。亚硫酸铋指示剂能够抑制革兰氏阳性菌和大肠菌群,但不影响沙门氏菌的生长。HB培养基
赖氨酸培养基(LYS)是一种选择性培养基,主要用于野生酿酒酵母的分离和计数。以下是其主要特点:1.**成分**:-赖氨酸培养基的主要成分包括D-葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、氯化钙、氯化钠、腺嘌呤、DL-甲硫氨酸、L-组氨酸、DL-色氨酸、硼酸、硫酸锌、钼酸铵、硫酸锰、硫酸亚铁、L-赖氨酸、肌醇、泛酸钙、硫胺素、吡哆醇、对氨基苯甲酸、烟酸、核黄素、生物素、叶酸和琼脂等。2.**pH值**:-培养基的pH值通常控制在5.0±0.2,使用10%乳酸调节pH值至5.0。3.**选择性**:-赖氨酸作为氮源,很多酵母可以利用赖氨酸为氮源,这使得培养基具有选择性。4.**应用范围**:-主要用于接种用酵母中野生酵母的分离和计数。5.**制备方法**:-称取6.6g培养基粉末,用100ml去离子水重悬,加入0.84ml的60%乳酸钾溶液,加热煮沸至完全溶解,冷却至50°C,用10%乳酸调节pH至5.0,倒入无菌培养皿。6.**灭菌方法**:-将培养基加热煮沸,溶解于1000ml蒸馏水中,冷至50℃左右时,用16%乳酸溶液调整pH至4.8±0.2,混匀,倾入无菌平皿,备用。7.**保存条件**:-培养基应密封,2-25°C保存。制备好的培养基2-8°C避光保存。动力硝酸盐培养基(B法)基础含糖牛肉汤琼脂培养基在生产过程中会进行质量控制,确保其性能和准确性,适用于微生物实验室研究 。
用途TCBS琼脂培养皿主要用于:临床样本中霍乱弧菌和副溶血弧菌的分离:通过其选择性抑制成分,有效分离目标弧菌。水产养殖中弧菌的检测:用于检测和监控水体中的弧菌数量,预防细菌病害。食品样本的微生物检测:用于从食品样本中分离特定的致病性弧菌。配制与使用方法TCBS琼脂培养皿的配制方法通常包括:称取TCBS粉末,按照说明书比例加入蒸馏水。煮沸溶解,冷却至适当温度(通常为45-50°C)。倾倒入无菌平皿中,待其凝固后使用。使用时,将待检测样本接种到培养皿上,然后倒置培养于适宜的温度下(通常是36±1°C),培养一定时间后观察菌落生长情况。结果分析在TCBS琼脂培养皿上,不同菌种会根据其代谢特性显示出不同的菌落颜色和形态:霍乱弧菌通常呈现黄色,扁平,直径2-3mm的菌落。副溶血弧菌则可能呈现蓝绿色菌落。通过观察菌落的颜色变化和形态特征,可以对弧菌进行鉴别和计数。
4.**培养条件**:-培养基的制备方法包括称取基础培养基14.2g加入180ml蒸馏水,加热溶解并不停搅拌;另取1.2g李斯特氏菌添加剂,加入20ml无菌水,并加入一些玻璃球,不停振动,使其乳化均匀,将二者分别于121℃高压灭菌15分钟。冷至50℃左右时,把李斯特氏菌添加剂加入基础培养基中,并加入李斯特氏菌抑菌剂,混匀,倾入无菌平皿。5.**质量控制**:-质控菌株在37℃培养24-48小时,单增李斯特氏菌和绵羊李斯特氏菌在该培养基上生长良好,形成蓝色菌落,菌落周围有一不透明环。其他菌如金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌则不生长或生长不良。6.**储存条件**:-制备好的固体平板保存于2-8℃,应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处,保存温度2-8℃。7.**注意事项**:-严格按照标签说明进行配制培养基,避免混合时培养基和添加剂温度过高导致平板出现絮状物。干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。这些特点使得李斯特氏菌显色培养基在食品卫生微生物检验中具有重要的应用价值。TBA培养皿中含有胰蛋白胨,这是一种富含氮源的营养物质,能够支持多种细菌的生长。
甘露醇氯化钠琼脂(MannitolSaltAgar,简称MSA)是一种用于分离和鉴定革兰氏阳性细菌特别是金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)的选择性培养基,具有以下特点:1.**成分组成**:-甘露醇氯化钠琼脂的主要成分包括甘露醇、氯化钠、琼脂、酚红指示剂等。具体配方为每升培养基含有甘露醇10克、氯化钠75克、琼脂15克、酚红0.03克,pH值通常调至7.2-7.4。2.**高盐浓度**:-该培养基含有较高浓度的氯化钠(7.5-10%),这种高盐环境有助于抑制革兰氏阴性细菌和一些其他非耐盐细菌的生长,同时促进耐盐的革兰氏阳性细菌如金黄色葡萄球菌的生长。3.**pH值**:-甘露醇氯化钠琼脂的pH值通常在7.2-7.4之间,适合多数细菌的生长。4.**指示剂**:-培养基中添加的酚红指示剂可以显示细菌的代谢活动,帮助鉴别细菌。例如,某些细菌在发酵甘露醇时会产生酸性代谢产物,导致培养基颜色变化。5.**选择性**:-甘露醇氯化钠琼脂具有选择性,特别适合于金黄色葡萄球菌的分离和鉴定。金黄色葡萄球菌能够在高盐环境中生长,并利用甘露醇作为碳源,发酵产生酸,使培养基颜色变化。营养葡萄糖琼脂培养皿可以用于大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌等质控菌株的培养和观察 。模拟葡萄汁培养基(MSM)基础
溴甲酚紫乳糖琼脂培养皿可以用于检测和分离能够发酵乳糖的微生物,如大肠杆菌等,在微生物领域有很大作用。HB培养基
支原体肉汤培养基是一种专门用于支原体的分离和培养的培养基,具有以下特点:1.**成分组成**:-支原体肉汤培养基的主要成分包括猪胃消化粉、牛肉浸粉、酵母浸粉、氯化钠、葡萄糖和酚红。具体配方为每升含有猪胃消化粉10.0g,牛肉浸粉5.0g,酵母浸粉5.0g,氯化钠2.5g,葡萄糖5.0g,酚红0.02g,pH值调至7.6±0.2(25℃)。2.**用途**:-主要用于支原体的分离培养,特别是肺炎支原体。支原体检查法在2020年版《中华人民共和国药典》中体现,要求使用支原体肉汤培养基培养监测肺炎支原体。3.**培养条件**:-支原体肉汤培养基需要在36℃培养7-14天,观察培养基变色结果。肺炎支原体可以发酵培养基中的葡萄糖,使培养基的pH值降低,遇指示剂酚红使培养基变黄。4.**添加剂**:-每瓶支原体肉汤培养基需配套青霉素溶液(80万IU),每1000ml支原体肉汤培养基溶液中添加1支青霉素溶液(80万IU),以抑制细菌的生长。5.**培养基灵敏度**:-支原体肉汤培养基和精氨酸支原体肉汤培养基的灵敏度均达到10^9CCU·mL^-1。支原体肉汤基础和精氨酸支原体肉汤基础存放于2~8℃有效期为90天。HB培养基