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Endo H糖苷内切酶H:结构、功能及其在糖生物学中的应用摘要Endo H糖苷内切酶H(Endo H)是一种专门切割N-连接糖链的内切酶,用于糖生物学和蛋白质工程领域。本文将探讨Endo H的结构特性、催化机制、以及其在研究和临床应用中的潜力。引言N-连接糖基化是一种在真核细胞中普遍存在的蛋白质修饰方式,涉及将糖链添加到蛋白质的天冬酰胺残基上。Endo H作为一种内切酶,能够特异性地识别并切割N-连接糖链中的β-N-乙酰葡糖胺苷键,从而在蛋白质工程和生物制药中发挥重要作用。Endo H的结构特性Endo H通常来源于流感嗜血杆菌(Hemophilus influenzae),其分子质量约为50 kDa。该酶由两个结构域组成:一个负责识别糖链的催化结构域和一个有助于酶稳定性的非催化结构域。催化机制Endo H的催化机制涉及对N-连接糖链的特异性识别和切割。酶的活性位点含有多个氨基酸残基,这些残基与糖链的特定结构相互作用,导致酶对底物的高特异性。Endo H催化的糖苷键断裂是一水解反应,需要水分子的参与。PNGase F可以用于从糖蛋白上释放完整的N-连接寡糖链,这在蛋白质组学和糖生物学研究中非常有用。Recombinant Rat SCF

Recombinant Rat SCF,标准物质

1stStrandcDNASynthesisKit(RNaseH-)主要用于从RNA模板合成链cDNA,而不是直接用于线性RNA的放大。然而,合成的cDNA可以作为模板用于后续的线性RNA放大过程,这通常涉及以下几个步骤:1.**cDNA合成**:使用1stStrandcDNASynthesisKit(RNaseH-)按照试剂盒的说明进行操作,从线性RNA模板合成链cDNA。2.**第二链cDNA合成**:在某些情况下,可能需要合成双链cDNA。这可以通过使用DNA聚合酶和第二链合成试剂来完成,从而获得完整的双链cDNA。3.**线性RNA放大**:一旦获得了cDNA,可以使用体外转录(IVT,InVitroTranscription)技术来放大RNA。这通常涉及以下步骤:-使用含有RNA聚合酶启动子序列的特定引物对cDNA进行PCR扩增。-使用含有RNA聚合酶识别位点的引物进行体外转录反应,以合成大量RNA拷贝。4.**RNA纯化**:体外转录产生的RNA需要通过适当的方法(如柱层析或沉淀)进行纯化,以去除DNA模板、未反应的核苷酸和其他杂质。5.**RNA质量检测**:使用凝胶电泳或生物分析仪检测RNA的质量和大小,确保RNA的完整性和纯度。Recombinant Mouse VCAM-1/CD106 Protein,His Tag透明质酸的衍生物可以作为基因传递的载体,或用于疫苗佐剂,增强反应。

Recombinant Rat SCF,标准物质

表达与纯化:重组抑肽酶在大肠杆菌中得到了高效表达,并通过纯化过程获得了纯度达到95%以上的产品。活性验证:重组抑肽酶展现出与天然抑肽酶相似的酶学性质,能够有效抑制胰蛋白酶的活性。稳定性测试:重组抑肽酶在推荐的储存条件下(-20ºC至2-8ºC)具有长达24个月的稳定性。讨论生产优势:大肠杆菌表达系统具有成本低、表达速度快、易于扩大生产等优点。此外,重组抑肽酶无动物源性,减少了病毒污染的风险,提高了产品的安全性。科研应用:重组抑肽酶可广泛应用于科研领域,如蛋白纯化、细胞培养、分子生物学实验等,提供了一种稳定且可靠的实验工具。工业生产:在工业生产中,重组抑肽酶可用于重组蛋白药物的生产过程中,防止蛋白酶降解,提高产品纯度和产量。结论大肠杆菌表达的重组抑肽酶具有高纯度、高活性和良好的稳定性,是一种理想的科研和工业用蛋白酶抑制剂。其无动物源性和高生产效率的特点,为生物技术领域提供了一种安全、经济的替代品。

AdvanceFastPCRMasterMix(2×)与高保真DNA聚合酶之间的具体联系主要体现在以下几个方面:1.**成分**:高保真DNA聚合酶是AdvanceFastPCRMasterMix(2×)中的关键成分之一。这种酶负责在PCR过程中合成新的DNA链,其保真度决定了扩增过程的准确性。2.**保真度**:AdvanceFastPCRMasterMix(2×)中的HieffCanace™AdvanceFastHigh-FidelityDNAPolymerase具有高保真度,这意味着在复制DNA时,它能够更准确地维持原始模板DNA的序列,减少错误或突变的引入。3.**酶的活性**:该产品中的高保真DNA聚合酶具有5'→3'DNA聚合酶活性和3'→5'核酸外切酶活性,这些活性有助于提高PCR扩增的特异性和效率。4.**扩增速度**:高保真DNA聚合酶在AdvanceFastPCRMasterMix(2×)中提供了快速的扩增速度,如5秒/kb,这有助于减少PCR扩增过程中的非特异性扩增。5.**适用性**:高保真DNA聚合酶使得AdvanceFastPCRMasterMix(2×)能够适用于不同GC含量的基因扩增,包括高GC和低GC区域,提高了PCR的适用性和成功率。

研究泛素-蛋白酶体途径:重组人泛素可用于研究泛素化修饰和蛋白降解过程。

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3C-like蛋白酶是中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)等其它冠状病毒的繁殖过程中极为重要的蛋白酶。它已成为人类在抗冠状病毒领域中的研究热点。本文基于计算生物学方法对与MERS-CoV同属的蝙蝠冠状病毒HKU4(HKU4-CoV)的43个肽类3C-like蛋白酶抑制剂分子,建立三维定量构效关系(3D-QSAR)模型。在基于配体叠合的基础上,发现比较分子相似性指数分析法(CoMSIA)中的四个场组合(位阻场、静电场、氢键供体场与氢键受体场)为比较好的模型(Q2=0.522,Rncv2=0.996,Rpre2=0.904;Q2:交叉验证相关系数,Rncv2:非交叉验证相关系数,Rpre2:验证集分子的预测值相关系数),并借助该模型通过分子对接(docking)与分子动力学(MD)方法阐明了配受体结合作用。实验结果表明:(1)基于比较好的CoMSIA模型基础上的三维等势图形象地说明了分子基团的位阻作用、静电作用、氢键供体与氢键受体作用对分子生物活性的影响;(2)分子对接研究结果显示了疏水性以及结晶水、氨基酸His166和Glu169在配体和受体结合过程中产生重要作用;使用全长A2AR蛋白进行药物筛选:全长A2AR蛋白可以用于ELISA、SPR亲和分析,以筛选和优化潜在的A2AR调节剂。gp100 (619-627)

透明质酸由D-葡萄糖醛酸及N-乙酰葡糖胺组成的双糖单位构成,分子量可以从数千到数千万道尔顿不等。Recombinant Rat SCF

dCTPSolution(脱氧胞苷三磷酸溶液)是一种分子生物学试剂,它是进行DNA合成反应的关键成分之一。dCTP与dATP、dGTP和dTTP一起,构成DNA聚合过程中所需的四种脱氧核苷三磷酸(dNTPs)。每种dNTP对应DNA中的一个碱基:腺嘌呤(A)、胞嘧啶(C)、鸟嘌呤(G)和胸腺嘧啶(T)。dCTP的化学名称是2'-脱氧胞苷-5'-三磷酸,它在DNA合成中起到以下作用:-**DNA合成**:在聚合酶链反应(PCR)和其他DNA合成过程中,dCTP作为底物,由DNA聚合酶催化,与DNA模板链上的鸟嘌呤(G)配对,形成新的DNA链。-**DNA测序**:在某些DNA测序方法中,dCTP可能用于标记或合成测序产物。-**分子克隆和其他技术**:dCTP在分子克隆、基因表达分析和其他涉及DNA合成的实验中也有应用。dCTPSolution通常以高浓度(如100mM)的溶液形式提供,以便于在实验中使用时进行稀释。这种溶液需要在低温(通常是-20°C)条件下储存,以保持其稳定性和避免分解。在购买和使用dCTPSolution时,用户应确保产品具有高纯度、无PCR抑制剂、无核酸酶污染等特性,以保证实验的准确性和重复性。此外,dCTPSolution应用于研究用途,不应用于临床诊断过程。Recombinant Rat SCF

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毕赤酵母表达肠激酶 2024-11-18

T5核酸外切酶在基因编辑中确实有应用,并且具有一些优势:1.**提高编辑效率**:根据一篇研究文章,T5核酸外切酶可以与CRISPR/Cas系统共表达或融合,以提高基因编辑的效率。这种共表达或融合可以增加indel(插入和缺失)频率,尽管增加的幅度可能不大。2.**增强基因编辑效果**:在另一项研究中,通过使用螺旋-螺旋二聚体肽(coiled-coilpeptides)将T5核酸外切酶招募到Cas9或Cas12a蛋白上,可以提高基因编辑的效率,这种方法被称为CCExo(CRISPR-Coiled-coil-Exonuclease)。这种招募方式优于共表达和直接融合,其中强的亲和力CC对显示出高...

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