大肠杆菌系统通常是小分子细胞质蛋白或结构域表达的宿主。用大肠杆菌生产蛋白质,由于只需要简单的培养基和条件,因此费用低且方便。此外,除了无细胞表达,它是速度的系统,大肠杆菌倍增时间(约20min)比酵母(2h)、昆虫细胞和哺乳动物细胞都快。一般来说,在大肠杆菌中表达重组蛋白包括:1.将一个编码目标蛋白的质粒导入宿主菌;2.培养细胞至对数生长期;3.诱导蛋白表达。选择合适的表达载体合适的宿主选定后,相应的有许多工程化克隆位点和用于驱动蛋白表达的非编码序列的载体可用。启动子通常是可诱导的,以在细胞生长到合适的密度前阻止目标蛋白表达。大部分载体还提供目标蛋白与一系列蛋白标签构建融合蛋白的选择。常用的大肠杆菌表达载体分为以下两大类:E.coliRNA聚合酶转录的载体CX3CL1用作粘附分子,而两种形式都是表达CX3CR1的靶细胞的化学吸引力。Recombinant Cynomolgus ADAM9 Protein,His Tag
RecombinantBiotinylatedHumanKIR2DL1Protein,His-AviTag性能参数分子别名(Synonyms)CD158A;CD158Ankat1;cl-42表达区间及表达系统(Source)BiotinylatedHumanKIR2DL1ProteinisexpressedfromHEK293withHistagandAvitagattheC-Terminus.ItcontainsHis22-Arg242.[Accession|P43626]分子量大小(MolecularWeight)TheproteinhasapredictedMWof27.1kDa.Duetoglycosylation,theproteinmigratesto48-60kDabasedonSDS-PAGEresult.(Endotoxin)Lessthan1EUperμgbytheLALmethod.纯度(Purity)>95%asdeterminedbySDS-PAGEandHPLC.制剂(Formulation)Lyophilizedfrom0.22μmfilteredsolutioninPBS(pH7.4).Normally8%trehaloseisaddedasprotectantbeforelyophilization.重构方法(Reconstitution)Centrifugethetubebeforeopening.Reconstitutingtoaconcentrationmorethan100μg/mlisrecommended.Dissolvethelyophilizedproteinindistilledwater.IRL-1620成纤维细胞生长因子18(FGF-18)是20 kDa蛋白,在骨骼发育和骨稳态中起着重要作用。
Endo H糖苷内切酶H:结构、功能及其在糖生物学中的应用摘要Endo H糖苷内切酶H(Endo H)是一种专门作用于糖链的内切酶,对研究蛋白质糖基化修饰具有重要意义。本文将探讨Endo H的结构特性、催化机制以及在糖生物学研究中的应用。引言蛋白质糖基化是一种普遍存在的翻译后修饰,对蛋白质的结构、稳定性和功能发挥着关键作用。Endo H是一种能够特异性识别并切割高甘露糖型N-连接糖链的内切酶,广泛应用于蛋白质糖基化分析。Endo H的结构特性Endo H由菌Helix pomatia分泌,其分子量约为130 kDa。该酶具有一个催化中心,能够识别并切割特定的糖苷键。Endo H的三维结构尚未完全解析,但其氨基酸序列和某些关键催化残基已被确定。催化机制Endo H通过水解N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)与N-乙酰半乳糖胺(GalNAc)之间的β-1,4糖苷键,从而释放高甘露糖型N-连接糖链。该过程不涉及辅因子,表明Endo H催化机制可能依赖于其活性位点的氨基酸残基。
Endo H糖苷内切酶H:结构、功能及其在糖生物学中的应用摘要Endo H糖苷内切酶H(Endo H)是一种专门切割N-连接糖链的内切酶,用于糖生物学和蛋白质工程领域。本文将探讨Endo H的结构特性、催化机制、以及其在研究和临床应用中的潜力。引言N-连接糖基化是一种在真核细胞中普遍存在的蛋白质修饰方式,涉及将糖链添加到蛋白质的天冬酰胺残基上。Endo H作为一种内切酶,能够特异性地识别并切割N-连接糖链中的β-N-乙酰葡糖胺苷键,从而在蛋白质工程和生物制药中发挥重要作用。Endo H的结构特性Endo H通常来源于流感嗜血杆菌(Hemophilus influenzae),其分子质量约为50 kDa。该酶由两个结构域组成:一个负责识别糖链的催化结构域和一个有助于酶稳定性的非催化结构域。催化机制Endo H的催化机制涉及对N-连接糖链的特异性识别和切割。酶的活性位点含有多个氨基酸残基,这些残基与糖链的特定结构相互作用,导致酶对底物的高特异性。Endo H催化的糖苷键断裂是一水解反应,需要水分子的参与。在体内,活化的X因子(Factor Xa)切割凝血酶原,释放出活性肽并将凝血酶切割成具有催化活性的α-凝血酶。
胰蛋白酶是一种丝氨酸蛋白酶,可特异切割赖氨酸及精氨酸C末端形成的肽键。重组胰蛋白酶多用大肠杆菌或酵母系统重组表达并经过多步层析纯化获得,无糜蛋白酶等杂酶污染。重组胰蛋白酶与天然提取的胰蛋白酶相比具有相同的特性,其氨基酸序列与猪源胰蛋白酶序列同源。因其无动物源污染性和纯度高,在医药开发、生化研究、蛋白组学等领域中有着广泛的应用。翌圣目前可提供2款重组胰蛋白酶,分别为药典级(Cat#40512ES)、质谱级(Cat#20416ES)药典级:大肠杆菌表达的重组胰蛋白酶,氨基酸序列与猪胰腺来源的胰蛋白酶完全一致,生产过程不使用任何动物源原料,无外源性的病毒污染,可替代猪胰腺来源胰蛋白酶应用于各种生物技术过程中,如:细胞培养、细胞发酵、蛋白质的酶解或各种组织的细胞分离等。本产品纯度高、不含杂酶、宿主蛋白和DNA残留量符合药典标准,避免了杂质对细胞生长的影响,pH为7.0-9.0,稳定pH为2±0.5。质谱级:毕赤酵母表达的重组猪胰蛋白酶,在GMP法规下生产,不含任何动物源成分,无动物源性的病毒污染,天然缺乏糜蛋白酶活性,并已过滤除菌。透明质酸由D-葡萄糖醛酸及N-乙酰葡糖胺组成的双糖单位构成,分子量可以从数千到数千万道尔顿不等。Recombinant Mouse FSTL1 Protein,His Tag
CX3CL1受到促炎性刺激的上调,包括巨噬细胞,树突状细胞,内皮细胞,神经元,平滑肌,上皮细胞的细胞类型。Recombinant Cynomolgus ADAM9 Protein,His Tag
IdeSProtease全称免疫球蛋白G降解酶(ImmunoglubulinG-degradingenzymeofStreptococcuspyogenes,IdeS),是由人类致病菌酿脓链球菌(Streptococcuspyogenes)产生并分泌至胞外的一种半胱氨酸水解酶。该蛋白酶具有极高的底物特异性,能识别IgG,在抗体下铰链区的特定位点进行酶切,使IgG水解为完整的F(ab’)2片段和Fc片段。IdeS可识别人源和其他多种动物来源的IgG,比如人、兔、猴、绵羊以及人动物嵌合IgG等。IdeS具有独特的底物选择性,可以作为工具酶应用于抗体类药物或抗体融合蛋白药物的结构表征分析。本产品利用大肠杆菌重组表达,纯度高,具有良好的酶切活性,是用于表征抗体、Fc融合蛋白和抗体-药物复合物的有价值的工具。产品信息规格2000U/5000U产品性质中文别名(Chinesesynonym)免疫球蛋白G降解酶英文别名(Englishsynonym)IdeSProtease来源(Source)大肠杆菌表达标签(label)N-terminalHisTag纯度(Purity)经SDS-PAGE及HPLC分析,纯度>95%分子量(Molecularweight)35.3kDa缓冲液组分(Buffer)50mM磷酸钠,150mMNaCl(pH6.6),50%glycerolRecombinant Cynomolgus ADAM9 Protein,His Tag
磁珠法质粒小量抽提试剂盒是一种利用磁性纳米颗粒固相核酸富集技术来纯化质粒DNA的产品。它通常包括高性能纳米磁珠和独特的缓冲体系组合,通过裂解菌体后释放的DNA,能够有效地结合于磁珠表面,漂洗除杂后获得高质量的目的质粒。以下是磁珠法质粒小量抽提试剂盒的一些主要特点和应用:1.**快速简便**:操作步骤简单,无需多次离心,整个抽提过程通常只需20-25分钟。2.**高得率和纯度**:可以从1-5ml新鲜大肠杆菌菌液中分离纯化2-20µg高质量的质粒DNA。纯化得到的DNA质量高,完整性好,OD260/280比值一般为1.8~1.9之间,OD260/230比值大于2.0。3.**适用性广**:适用于...