长时间高温还会引起磷酸盐、碳酸盐与某些阳离子(特别是钙、镁、铁离子)结合形成难溶性复合物而产生沉淀,因此,在配制用于观察和定量测定微生物生长状况的合成培养基时,常需在培养基中加入少量螯合剂,避免培养基中产生沉淀,常用的螯合剂为乙二胺四乙酸(EDTA)。还可以将含钙、镁、铁等离子的成分与磷酸盐、碳酸盐分别进行灭菌,然后再混合,避免形成沉淀;高压蒸汽灭菌后,培养基pH会发生改变(一般使pH降低),可根据所培养微生物的要求,在培养基灭菌前后加以调整。培养基的pH值需要根据不同微生物的生长适应范围进行调节。酵母氨基酸缺陷型合成琼脂培养基组氨酸/亮氨酸/色氨酸缺陷)
培养细胞时应使用5%还是10%CO2,或者根本没有影响?一般培养基中大都使用 HCO3-/CO32-/H+ 作为pH的缓冲系统,而培养基中NaHCO3的含量将决定细胞培养时应使用的CO2浓度。当培养基中 NaHCO3含量为每公升3.7g时,细胞培养时应使用10% CO2;当培养基中NaHCO3 为每公升1.5g时,则应使用5%CO2培养细胞。NaHCO3的作用:培养基中使用了 NaHCO3-CO2 缓冲系统,并采用开放培养,使细胞代谢产生的CO2及时溢出培养瓶,再通过稳定调节温箱中CO2浓度(5%) ,与培养基中的NaHCO3处于平衡状态,从而调节培养基的PH值。NEAA:非必须氨基酸,NEAA(非必需氨基酸) 是含几种非必需氨基酸的合剂,添加到的原培养基不同,NEAA 也有不同的种类,比如添加至MEM的NEAA,含L-Alanine、L-Asparagine、L-Aspartic Acid、 L-Glutamic Acid、L-Glycine、L-Proline、L-Serine。STAA 琼脂基础酵母培养基通常包含酵母营养素、碳水化合物和氮源。
要获得微生物纯培养,必须避免杂菌污染,因此对所用器材及工作场所进行消毒与灭菌。对培养基而言,更是要进行严格的灭菌。对培养基一般采取高压蒸汽灭菌,一般培养基用1.05kg/cm2,121.3℃条件下维持15-30min可达到灭菌目的。在高压蒸汽灭菌过程中,长时间高温会使某些不耐热物质遭到破坏,如使糖类物质形成氨基糖、焦糖,因此含糖培养基常在0.56kg/cm2,112.6℃15-30分钟进行灭菌,某些对糖类要求较高的培养基,可先将糖进行过滤除菌或间歇灭菌,再与其他已灭菌的成分混合。
总体而言,所有微生物生长繁殖均需要培养基含有碳源、氮源、无机盐、生长因子、水及能源,但由于微生物营养类型复杂,不同微生物对营养物质的需求是不一样的,因此首先要根据不同微生物的营养需求配制针对性强的培养基。自养型微生物能从简单的无机物合成自身需要的糖类、脂类、蛋白质、核酸、维生素等复杂的有机物,因此培养自养型微生物的培养基完全可以(或应该)由简单的无机物组成。例如,培养化能自养型的氧化硫硫杆菌(Thiobacillus thiooxdans)的培养基组成见表3.9。在该培养基配制过程中并未专门加入其他碳源物质,而是依靠空气中和溶于水中的CO2为氧化硫硫杆菌提供碳源。化学制剂和生物制剂都可以用于制备培养基,例如氨基酸、蔗糖和酵母提取物。
按照培养基用途区分:鉴别培养基,一类在成分中加有能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂,从而达到只须用肉眼辨别颜色就能方便的从近似菌落中找出目的菌菌落的培养基。例如,伊红美蓝乳糖培养基(EMB)。培养基的分类有哪些?培养基按功能用途可分为几种?培养基的分类有哪些?培养基按功能用途可分为几种?常见的培养基有细菌培养基、牛心培养基、根瘤菌培养基、放线菌培养基、面粉琼脂培养基、微藻培养基、豆芽汁培养基、食用菌菌种培养基、动物细胞培养基等等。培养基是细胞和微生物生长所需的基本营养物质和环境条件。L型细菌高渗盐增菌培养基
无血清培养基是在常规培养基中添加多种蛋白质、生长因子等等营养物质来代替动物血清。酵母氨基酸缺陷型合成琼脂培养基组氨酸/亮氨酸/色氨酸缺陷)
培养基是高中生物很重要的一个知识点,种类多且复杂,所以学起来也是比较难的。下面小编给大家介绍一下培养基的分类,一起来了解一下培养基吧!培养基是指供给微生物、植物或动物(或组织)生长繁殖的,由不同营养物质组合配制而成的营养基质。一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)、维生素和水等几大类物质。培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质,也是细胞生长和繁殖的生存环境。由于各类微生物对营养的要求不同及科学研究的目的或生产实践的需要不同,因而培养基的种类很多。迄今为止,已有数千种不同的培养基。酵母氨基酸缺陷型合成琼脂培养基组氨酸/亮氨酸/色氨酸缺陷)
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