近年来,由多重耐药性金黄色葡萄球菌引起的院内传染不只是临床医师必须经常面临的棘手问题,而且已对全人类的健康构成极大威胁·一直以来,万古霉素都是临床救治革兰阳性菌传染的选择药物,曾被称为临床抗传染的”之后底线”.但万古霉素耐药性金黄色葡萄球菌已经在许多国家分离出来,这就对开发新型抗传染救治药物提出了迫切要求。金黄色葡萄球菌(Staphalococcusaureus)属革兰阳性球菌,微球菌科,葡萄球菌属。它能引起化脓性炎症,如疖、痈等。当细菌侵入血液时,可引起致病性败血症。某些葡萄球菌产生耐热的肠有害元素,从而引起食物中毒。不同种的金黄色葡萄球产生不同的色素,如金黄色、白色、柠檬色等,色素为脂溶性。直立共养单胞菌菌种
金黄色葡萄球菌免疫学检测方法:分子生物学检测方法:核酸探针技术:通过使用基因特异性核苷酸序列作为探针与目的DNA杂交的一种核酸杂交技术,通过检测该段特异性的标记物,从而判断是否含有目标微生物。核酸探针具有分子生物学检测技术的灵敏度高、特异性强的优点,但是实验周期长,操作繁琐,如果样品中目标微生物含量过低,极易造成样品目标微生物未检出,出现假阴性的实验结果。环介导等温扩增技术:该技术基于DNA扩增技术,能够在恒温条件下,根据设计的多对引物,利用链置换型DNA聚合酶快速的进行核酸的扩增。与PCR方法比较,环介导等温扩增法操作更加快捷简单,花费成本较低,且对仪器要求低,能够普遍利用在食源性致病微生物的检测中。泥土土壤单胞菌金黄色葡萄球是常见的食源性致病菌,普遍存在于自然环境中。
大肠杆菌表达系统是目前应用很广的蛋白表达系统。它具有:遗传背景清楚。易于培养和控制。转化操作简单。表达水平高。成本低。周期短等特点。同时是常用也是经济实惠的蛋白表达系统,在基因表达技术中发展至早。Escherich于1885年发现大肠杆菌。1976年Struhl、1977年Vapnek及1978年Chang等分别将酵母DN段、粗糙链孢霉DN段和哺乳动物cDN段导入大肠杆菌,引起其表型的改变,证明了外源基因在大肠杆菌中可以使现有功能的活性表达。这些研究为大肠杆菌表达系统的发展奠定了理论基础。1980年,Guarante等在Science杂志上发表了以质粒、乳糖操纵子为基础建立起来的大肠杆菌表达系统。这一发展构成大肠杆菌系统的雏形。
铜绿假单胞菌的检测方法成为纤维及其制品检测铜绿假单胞菌的依据。检测铜绿假单胞菌的操作步骤为,制备样液;样液在培养液中,置(35+2)摄氏度增菌培养18h~24h;挑取培养物,于十六烷三甲基溴化铵琼脂平板.上画线接种,置(35土2)摄氏度分离培养18h~24h;取可疑菌落涂片,做革兰氏染色,镜检为革兰氏阴性菌者应进行生化试验。被检样品经增菌、分离培养后,证实为革兰氏阴性杆菌,氧化酶及绿脓菌素试验均为阳性者,即可报告被检样品中检出铜绿假单胞菌。如绿脓菌素试验阴性而明胶液化、硝酸盐还原产气和42摄氏度生长试验三者皆为阳性时,仍可报告被检样品中检出铜绿假单胞菌。铜绿假单胞菌存在的重要条件是潮湿的环境。
如何认识金黄色葡萄球菌?细菌普遍分布于自然界,例如空气、土壤、物品、人和动物体表及与外界相通的腔道中。细菌的种类很多,大部分是不会致人疾病的腐物寄生菌及属于人体正常菌群。而人类致病的主要是金黄色葡萄球菌。革兰阳性菌,球形,直径约1微米,呈葡萄串状排列。无芽孢、无鞭毛,体外培养时一般不形成荚膜,但少数菌株的细胞壁外层可见有荚膜样粘液物质。在某些化学物质(青霉素)作用下,可裂解或变成L型。需氧或兼性厌氧。营养要求不高,在普通培养基中,37摄氏度生长良好。致病性葡萄球菌菌落呈金黄色,于血琼脂平板生长后,在菌落周围还可见完全透明的溶血环。各种水、空气、正常人的皮肤、呼吸道和肠道等都有铜绿假单胞菌存在。微白诺卡氏菌菌株
铜绿假单胞菌拥有在42摄氏度可以生长的特点。直立共养单胞菌菌种
铜绿假单胞杆菌的冻结保存记录内容包括冷冻的日期、细胞代号、冷冻管数、冷冻保存中温度下降的情况、保存位置以及操作者。不使用铜绿假单胞杆菌前,要使用高压蒸汽灭菌,其自身具有杀菌作用。高压灭菌反而破坏了其分子结构,可以降低冷冻保护的效果。对细胞注意冻结保存管投入液氮,操作简单地从液氮向液氮罐内迸发。如果液氮可能会迸发,会冻坏皮肤。操作中尽量带防寒手套、口罩、工作服或防寒鞋。要注意控制冰箱的质量。在冻结之前确保细胞有活力,没有微生物污染,值得冻结在这样的细胞上。另外,几个细胞冻结后,使1~2管复活,观察其活力,观察微生物是否受到污染。直立共养单胞菌菌种
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