金黄色葡萄球菌免疫学检测方法:其他方法:试剂盒法:试剂盒法通常将十多种,甚至几十种培养基或成分集中在特定微型装置内,通过观察微生物的生长和代谢过程的某些产物或现象,对试验现象进行分析,将传统试验中多次试验通过一次完成,缩短了检测时间。此法可很大缩短测试时间,在24h内得出结果,甚至某些可缩短至4h内。目前,用于检测金黄色葡萄球菌的成品试剂盒有API、MIS等测试片法:其将纸膜、纸片或胶片附着相关培养基和特定显色液作为金葡菌的培养载体,依据金葡菌在载体上的生长以及显色的情况,来衡量食品中金黄色葡萄球菌的存在数量,该方法简便易行,但结果精度不高。大肠杆菌(Escherichia coli),又叫大肠埃希氏菌。蒙特维的亚沙门氏菌菌株
铜绿假单胞菌为专性需氧菌,生长温度范围25摄氏度~42摄氏度,较适生长温度为25C~30摄氏度,特别是该菌在4摄氏度不生长而在42摄氏度可以生长的特点可用以鉴别。在普通培养基上可以生存并能产生水溶性的色素,如绿脓素与带荧光的水溶性荧光素等。在血平板上会有透明溶血环。若要长期保存,铜绿假单胞菌在4摄氏度~6摄氏度时易死亡。适于放置于10摄氏度~20摄氏度室温避光保存或者-20摄氏度以下保存。当铜绿假单胞菌放置于2摄氏度~8摄氏度保存时,该菌易死亡。与铜绿假单胞菌相似的菌还有副溶血性弧菌等部分弧菌,在拿到这一类菌株时要注意它们的保存温度,以免保存不当造成损失。硫化物矿盐单胞菌菌种金黄色葡萄球菌代谢类型为需氧或兼性厌氧,对环境要求不高。
冻存铜绿假单胞杆菌时,要先消化细胞,将细胞悬液收集至离心管中。1000rpm离心10分钟,弃上清液。沉淀加含保护液的培养,计数,调整至5×106/毫升左右。将悬液分至冻存管中,每管1毫升。将冻存管口封严。如用安瓿瓶则火焰封口,封口一定要严,否则复苏时易出现爆裂。贴上标签,写明细胞种类,冻存日期。冻存管外拴一金属重物和一细绳。按顺序降温,室温→4摄氏度(20分钟〕→冰箱冷冻室(30分钟)→低温冰箱(-30摄氏度1小时)→气态氮(30分钟)→液氮。注意操作时应小心,以免液氮冻坏。液氮定期检查,随时补充,不能挥发干净,一般30立升的液氮能用1~1.5月。
对于铜绿假单胞菌的检测,前处理直接混匀制成待测样品或者采用滤膜过滤法进行处理。直接混匀测试揭开检测板上层膜,在检测板纸片上加1毫升直接混匀制成的待测样品,迅速贴好上层膜井水平晃动检测板,静置2分钟.滤膜过滤法处理揭开检测板上层膜,在检测板纸片,上加1毫升无菌水湿润后,迅速用无菌镊子将过滤水样的滤膜移放在检测板纸片上(滤膜截留细菌面向上),滤膜与纸片之间不要夹留着气泡,贴好上层膜。前处理25g(或25毫升)样品放入装有225毫升生理盐水的均质袋中,以8000r/分钟均质1~2分钟,制成1:10样品均液,根据样品污染程度及检验需要,可进一步制成10倍递增的样品稀释液。大肠杆菌的生化代谢非常活跃。
保存条件斜面、穿刺菌和冻干粉可常温运输,但应在4-10度长期保存。甘油菌可常温运输,但应在-80度长期保存。微生物菌种应保存于低温、清洁和干燥的地方,室温放置时间过长会导致菌种衰退。
冻干管的开启方法:方法一:将冻干粉甩至底部圆球位置,然后用70%的酒精脱脂棉球擦净冻干管,将冻干管的前列(注意不是圆球端)放在火焰上加热。然后迅速滴几滴无菌水至加热处,此时冻干管的前列会自动破开。然后用镊子轻轻敲下冻干管前列,并将冻干管开口处在火焰上加热灭菌一下,并且保持下面的菌种菌种活化步骤在火焰旁操作。然后逐渐敲开冻干管,直至适当位置。(敲开位置以可以很好注入无菌水以及吸取混匀后的液体为准)直接敲开法。方法二:首先将冻干粉甩至底部圆球位置,然后用70%的酒精脱脂棉球擦净冻干管,将冻干管的前列(注意不是圆球端)放在火焰稍微加热灭菌。然后直接用大镊子敲打前列,敲开后将破口处在火焰上加热灭菌一下,并且保持下面的菌种菌种活化步骤在火焰旁操作。然后逐渐敲开冻干管,直至适当位置。(敲开位置以可以很好注入无菌水以及吸取混匀后的液体为准)。 大肠杆菌是现代的生物学中研究很多的一种细菌,作为一种模式生物,其基因组序列已全部测出。尼纳诺卡氏菌菌株
铜绿假单胞菌为土壤中存在的较常见的细菌之一。蒙特维的亚沙门氏菌菌株
人的大肠杆菌病的主要传染源是因为在胃肠道染上患者的粪便中有大量大肠杆菌病原菌排至体外构成的。大肠杆菌在人之间的传播途径多是通过粪-口这一传播途径,在一定的条件下可引起大肠杆菌病散发或流行。大肠杆菌病的病原菌多是随粪便从动物的体内排出,经过环境的污染而污染饲料、饮水及饲养环境等,这些污染物在经过饮食或饮水通过消化道传给健康动物。在禽类,通常是以饲料和因水污染来传播的,其中污染水源的消化道传播至为常见,还有通过带菌的尘埃导致呼吸道染上、蛋壳被粪便污染后通过穿透蛋壳传播、具有输卵管炎的种禽通过种蛋的垂直传播等途径。在哺乳期的仔猪、犊牛或其他幼龄哺乳动物等,乳t的污染是主要的传播途径,主要是因母体的乳t被污染后,仔动物通过吮乳经消化道发生染上。蒙特维的亚沙门氏菌菌株
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