有些铜绿假单胞杆菌的保藏方法,如滤纸保藏法、液氮保藏法和冷冻干燥保藏法等均需使用保护剂来制备细胞悬液,以防止因冷冻或水分不断升华对细胞的损害。保护性溶质可通过氢和离子键对水和细胞所产生的亲和力来稳定细胞成分的构型。保护剂有牛乳、血清、糖类、甘油、二甲亚砜等。铜绿假单胞杆菌的多聚酶链式反应基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性、退火、延伸三个基本反应步骤构成模板DNA经加热至93摄氏度左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备。金黄色葡萄球在含有血液和葡萄糖的培养基中生长更佳,需氧或兼性厌氧,少数专性厌氧。霍氏肠杆菌霍氏亚种菌种
大肠杆菌生物学特征:1、理化特性。大肠杆菌是短杆菌,两端呈钝圆形,革兰阴性。有时因环境不同,个别菌体出现近似球杆状或长丝状。大肠杆菌多是单一或两个存在,但不会排列呈长链形状。大多数的大肠杆菌菌株具有荚膜或微荚膜结构,但是不能形成芽孢。多数大肠杆菌菌株生长有菌毛,其中一些菌毛是针对宿主及其他的一些组织或细胞具有黏附作用的宿主特异性菌毛。2、生化特性。大肠杆菌的生化代谢非常活跃。大肠杆菌可以发酵葡萄糖产酸、产气,个别菌株不产气,大肠杆菌还能发酵多种碳水化合物,也可以利用多种有机酸盐。大肠杆菌在常用的生化特性检测项目中,甲基红试验呈阳性,吲哚产生和乳糖发酵是阳性(个别菌株表现阴性),维-培试验是阴性,尿素酶和柠檬酸盐利用呈阴性(极个别菌株表现阳性),硝酸盐还原试验表现阳性,氧化酶表现阴性,氧化-发酵试验表现为F型[1]。巴西毛壳菌株金黄色葡萄球常见于皮肤表面及上呼吸道黏膜。
铜绿假单胞菌为专性需氧菌,生长温度范围25摄氏度~42摄氏度,较适生长温度为25C~30摄氏度,特别是该菌在4摄氏度不生长而在42摄氏度可以生长的特点可用以鉴别。在普通培养基上可以生存并能产生水溶性的色素,如绿脓素与带荧光的水溶性荧光素等。在血平板上会有透明溶血环。若要长期保存,铜绿假单胞菌在4摄氏度~6摄氏度时易死亡。适于放置于10摄氏度~20摄氏度室温避光保存或者-20摄氏度以下保存。当铜绿假单胞菌放置于2摄氏度~8摄氏度保存时,该菌易死亡。与铜绿假单胞菌相似的菌还有副溶血性弧菌等部分弧菌,在拿到这一类菌株时要注意它们的保存温度,以免保存不当造成损失。
枯草芽孢杆菌具有抗逆能力强、易于繁殖,代谢产物丰富,抗类菌谱广,对人畜高度安全等特点,加之收获后果品贮藏条件的可控性,用于果品生物防腐(病原性腐烂)具有特殊优势。枯草芽孢杆菌抗生体制剂有效地控制由链格孢霉、地霉属、指状青霉等致病菌引起的柑桔果腐病,防效在60%以上。枯草芽孢杆菌可湿性粉剂2,000倍液对锦橙储藏具有良好的保鲜效果。同时,枯草芽孢杆菌还能利用在鲜切花保鲜领域。枯草芽孢杆菌在养殖业作用机理主要包括:调节消化道微生态平衡;提高畜禽消化能力;提高畜禽免疫的能力;产生维生素等营养素。枯草芽孢杆菌能刺激动物(人体)免疫组织的生长发育,激发T、B淋巴细胞。
枯草芽孢杆菌进入人体后,能100%到达大小肠,抑制致病菌,促进有益厌氧菌生长,并产生乳酸等有机酸类,降低肠道PH值,间接抑制其它致病菌生长。提高免疫球蛋白和抗体水平,增强细胞免疫和体液免疫功能,提高群体免疫的能力。合成α-淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶等酶类,在消化道中与动物体(人体)内的消化酶类一同发挥作用。枯草芽孢杆菌对水产中的弧菌、大肠杆菌和杆状病毒等有害微生物有很强的抑制作用,有效预防水产动物肠炎,烂鳃等疾病。分泌大量几丁质酶的功能,几丁质酶可分解病原真类菌的细胞壁而抑制真类菌病害,分解养殖池中的有毒有害物质,净化水质。枯草芽孢杆菌具有广谱抗类菌活性和极强的抗逆能力。小柄凸脐蠕孢
铜绿假单胞菌所产生的带荧光的水溶性青脓素与绿脓素相结合将使得培养基呈亮绿色。霍氏肠杆菌霍氏亚种菌种
使用较低温甘油保存法保存铜绿假单胞菌时,若采用1.5毫升离心管保存菌种,移种时要特别注意无菌操作,尽量采用螺口的带盖冷冻管保存菌种,以减少污染的机会。采用螺口的带盖冷冻管的方法保存肠杆菌科的细菌及革兰阳性需氧杆菌如炭疽芽孢杆菌、腊样芽孢杆菌等均取得良好的保存效果。铜绿假单胞菌保存低温存法,简单保存法,将琼脂斜面孢子培养物、菌丝悬浮液以及由麸皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培养物置于4摄氏度冰箱保存,保存时间不超过1~2个月,若将谷物原料制备的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蜡,以隔绝外界空气和水汽,保持时间可达3~4个月。霍氏肠杆菌霍氏亚种菌种
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