铜绿假单胞菌低温保存法主要为简单保存法,将琼脂斜面孢子培养物、菌丝悬浮液以及由麸皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培养物置于4摄氏度冰箱保存,保存时间不超过1~2个月,若将谷物原料制备的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蜡,以隔绝外界空气和水汽,保持时间可达3~4个月。液氮较低温保存法,将生长稳定期的细胞悬浮在10%甘油或其他低冰点液体中,密封于安瓿管内,然后控制冷却速度,使安瓿管温度逐步下降至-35摄氏度时,即可置于-150~-196摄氏度的液氮罐中保存。大多数微生物如病毒、噬菌体、多种细菌、放线菌、酵母和原虫、特别是一些用冷冻干燥法有困难的微生物,都可用此法长期保存。铜绿假单胞菌拥有在42摄氏度可以生长的特点。盘状三毛孢菌株
关于铜绿假单胞菌的麸皮保存法是在麸皮内加入60%的水,经灭菌后接种培养,然后干燥保藏。纸片(滤纸)保存法是将灭菌纸片浸入培养液或菌悬液中,常压或减压干燥后,置于装有干燥剂的容器内进行保存。寄主保存法是铜绿假单胞菌侵入其寄主后加以保存的方法。低温冰箱保存法一般为-20摄氏度、-50摄氏度或-85摄氏度,低温冷冻保存时使用螺旋口试管较为方便,也可在棉塞试管外包裹塑料薄膜。保存时菌液加量不宜过多,有些可添加保护剂。此外,也可用φ5mm的玻璃珠来吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器内,再放入低温冰箱内进行保存的。噬果胶黄杆菌菌株铜绿假单胞菌的学名是Pseudomonasaeruginosa。
对铜绿假单胞杆菌的复苏,要先准备一个茶缸或1000毫升的烧坏,内装2/3杯37摄氏度的温水。从液氮中取出冻存管、迅速置于温水中并不断搅动。使冻存管中的冻存物在1分钟之内融化。打开冻存管,将细胞悬液吸到离心管中。1000rpm离心10分钟,弃去上清液。沉淀加10毫升培养液,吹打均匀,再离心10分钟,弃上清液。加适当培养基后将细胞转移至培养瓶中,37摄氏度培养,第二天观察生长情况。器材通常为液氮罐、冻存管(塑料螺口冻存管或安瓿瓶)、离心管、吸管、离心机等。试剂通常为0.25%胰酶、培养基、含保护剂的培养基(即冻存液)。冻存液配制是培养基加入甘油或DSMO,使其终浓度达5—20%。保护剂的种类和用量视不同细胞而不同。配好后4摄氏度下保存。
大肠杆菌检测方法:ATP生物发光法:在近些年的发展过程中,生物发光技术应用很广,是一种比较快速的检测微生物的技术。在活性细胞中,ATP是其常见的能量代谢产,可以提供细胞生理活动过程中所需的能量。并且,该技术可以在生物体内可以在一定范围内保持一定的含量。食品中的大肠杆菌检测技术可以采用荧光光度的方法,因为生物体发光的原因是有荧光素酶的作用,产生了发光的效果。该物质来源于北美的萤火虫体内,可以催化荧光素的氧化作用,不过,该物质性质不稳定,可以对荧光进行快速分解。另外,该检测技术结果获得过程是非常快的,并且该设备携带方便,十分适用于现场检测。金黄色葡萄球普遍分布于自然界,如空气、水、土壤、饲料和一些物品上。
枯草芽孢杆菌为接种微生物,对菲与苯并芘都可进行吸附或生物降解,48h液相PAHs浓度达到平衡时,微生物对菲消除了98%,对苯并芘消除85%;接种的样品48h吸附等温线均呈线形,能较好地符合线性方程;在接种微生物情况下,沉积物与土壤对菲和苯并芘吸附特征均发生较大变化,对菲的吸附量增大约35倍,而对苯并芘的吸附量却降低了2/3左右;未接种微生物的土壤和沉积物对菲解吸率为20%,接种的样品组为2.9%,而对苯并芘的解吸结果与菲相反,未接种的对照组为4%,接种的样品组为3%。脲酶属于土壤中研究得比较深入的一种水解酶类,枯草芽孢杆菌是对尿素在土壤中转化及尿素利用率有重大影响的。铜绿假单胞菌菌体大小(1.5~5.0)um×宽(0.5~1)um,细长且长短不一。副氧化微杆菌菌株
金黄色葡萄球在适当的条件下,能够产生肠有害元素,引起食物中毒。盘状三毛孢菌株
肠毒大肠杆菌是大多数疫苗开发工作所关注的大肠杆菌类型。针对肠毒大肠杆菌的不耐热肠毒和主要定居因子的抗体提供了对产生不耐热肠毒、表达同源定居因子的肠毒大肠杆菌的保护。已经开发了由毒抗原和全细胞组成的口服灭活疫苗,即许可的重组霍乱B亚单位(rCTB)-WC霍乱疫苗Dukoral。肠毒大肠杆菌目前没有获得许可的疫苗,尽管有几种疫苗处于不同的开发阶段。在不同的试验中,rCTB-WC霍乱疫苗提供了很高(85–100%)的短期保护。一种口服肠毒大肠杆菌候选疫苗由rCTB和表达主要定居因子的福尔马林灭活大肠杆菌组成,临床试验表明该疫苗对美国旅行者的严重腹泻是安全的、免疫原性的和有效的,但对埃及儿童的肠毒大肠杆菌腹泻无效。一种由过表达定居因子的重组大肠杆菌株和一种更类似不耐热肠毒的混合类毒LCTBA组成的改良肠毒大肠杆菌疫苗正在进行临床试验。盘状三毛孢菌株
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