关于铜绿假单胞菌的砂土保存法,主要是取清洁的砂,过60目筛去掉大砂粒,并用磁铁吸去砂中铁屑,再用NaOH溶液、10%HCl溶液和水交替清洗数次,干燥后,置于试管或安瓶管中保持2~3cm深,再经干热灭菌后,加入1毫升菌种培养液,经充分混匀后,放入真空干燥器中,完全干燥后熔封保存。也可用二份洗净的砂(经HCl预处理)和一份贫瘠、过筛的黄土搀和后灭菌,再进行菌种保藏。在螺旋口试管中装入1/2管高的硅胶(或无水CaSO4),上铺玻璃棉,再放上10~20粒磁珠,经干热灭菌后,接入菌悬液,然后冷藏、室温保藏或减压干燥后密封保藏。本法对酵母菌很有效,特别适用于根瘤菌,可保存长达两年半时间。枯草芽孢杆菌是一种新型的微生物源生物农药。肠沙门氏菌肠亚种波那雷恩血清型菌株
动物的大肠杆菌病可以发生在多种家畜、家禽、养殖经济动物以及其他陆生动物和某些水产动物,其中猪和鸡是至为易感的,而且危害十分严重。通常大肠杆菌的染上均是以幼龄动物的发病率和死亡率高。发病季节大肠杆菌在动物群体间的染上的季节发病特征不是非常明显。在一年四季猪均可发生,但只要是发生在猪的产仔期至断乳期,这与猪的易感日龄相关联。犊牛和羔羊多发生于冬季和春季的舍饲时期。其他动物的大肠杆菌染上在常年均有发生,季节性不明显。紫色红曲菌种铜绿假单胞菌中的O抗原可用以分型。
铜绿假单胞菌的液氮较低温保存法,将生长稳定期的细胞悬浮在10%甘油或其他低冰点液体中,密封于安瓿管内,然后控制冷却速度,使安瓿管温度逐步下降至-35摄氏度时,即可置于-150摄氏度~-196摄氏度的液氮罐中保存。大多数微生物如病毒、噬菌体、多种细菌、放线菌、酵母和原虫、特别是一些用冷冻干燥法有困难的微生物,都可用此法保存。微生物菌种应保藏于低温、清洁和干燥的地方,室温放置时问过长会导致菌种衰退;菌种操作应在无菌条件下进行,防止杂菌污染,斜面菌种保藏时间通常为1-2个月,应根据菌种状况及时转接;冻干菌种保藏时间通常为5~10年;菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降,应及时更换新的菌种。
制备大肠杆菌感受态细胞的关键是什么?(1)感受态细胞的质量:所用的CaCl2等试剂均需是至高纯度的,并用至纯净的水配制,建议分装保存于4℃。(2)细胞的生长状态和密度建议从-70℃或-20℃甘油保存的菌种中直接转接用于制备感受态细胞的菌液。不要用已经过多次转接,及贮存在4℃的培养菌液。细胞生长密度以每毫升培养液中的细胞数在5×107个左右为佳。即应用对数期或对数生长前期的细菌,可通过测定培养液的OD600控制。对TG1菌株,OD600为0、5时,细胞密度在5×107个/ml左右。(应注意OD600值与细胞数之间的关系随菌株的不同而不同)。密度过高或不足均会使转化率下降。枯草芽孢杆菌可利用蛋白质、多种糖及淀粉,分解色氨酸形成吲哚。
枯草芽孢杆菌在农业生产上的作用机理大致归纳为:首先,菌体生长过程中产生的枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌肽等活性物质,对致病菌或内源性影响的条件致病菌有明显抑制作用;或者迅速消耗游离氧,造成低氧环境,促进有益厌氧菌生长,间接抑制其它致病菌生长。第二,刺激植株产生抗病因子,提高植株免疫的能力。第三,通过自身合成α-淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶等酶类,与其它植株体内酶协同发挥作用。同时,通过自身合成B1、B2、B6、烟酸等多种B族维生素,促进植物生长发育。铜绿假单胞菌的学名是Pseudomonasaeruginosa。黏着玫瑰变色菌菌种
两岐双岐杆菌 (Cultech 菌株) 动物双歧杆菌亚种乳酸亚种 克劳氏芽孢杆菌(Enterogermina 菌株) 嗜酸乳杆菌 La5 .肠沙门氏菌肠亚种波那雷恩血清型菌株
大肠杆菌的耐药机制:根据细菌耐药性的起源,可将其分为两类:一类为固有耐药性(intrinsicresistance),即耐药性的产生并不依赖于抑菌药物的存在,而是细菌细胞所固有的,与细菌的遗传和进化密切相关。固有耐药性是细菌稳定的遗传特性,它受细菌染色体DNA控制并且是同属细菌的共同特征,固有耐药性包括自发基因突变导致的耐药性和细胞膜药物外输作用引起的耐药性。另一类为获得性耐药性(acquiredresistance),是指细菌在抑菌药物选择性压力存在下经过基因突变。或细菌在生长过程中由于移动耐药因子的转移而获得的一种表型。其中,移动因子包括质粒、转座子、整合子和噬菌体。获得性耐药性主要包括移动因子和抑菌药压力作用下引起基因突变所导致的耐药性。肠沙门氏菌肠亚种波那雷恩血清型菌株
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